CD4、CD8及FOXP3T淋巴细胞在子宫颈癌中的表达及意义

栗 婵，韩丽萍（郑州大学第一附属医院，河南 郑州 450003）

CD4、CD8及FOXP3T淋巴细胞在子宫颈癌中的表达及意义

栗 婵，韩丽萍
（郑州大学第一附属医院，河南 郑州 450003）

目的 探讨CD4、CD8及Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化法检测，选取2012年7月～2014年7月我院妇科手术切除或活检的宫颈组织石蜡标本75例，其中宫颈癌患者63例，年龄40～60岁，平均年龄50岁。检测CD4、CD8及Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌组织中的表达，从而进一步了解CD4、CD8及Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌中意义。结果 CD4T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为46%（29/63）；CD8T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为35%（22/63）；Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为78%（49/63）。结论 CD4、CD8分子在宫颈癌组织中表达显著减少或无表达，Foxp3则升高。说明宫颈局部微环境变化和免疫调节系统状态的改变与宫颈癌的发生发展有着密切关系。

CD4；CD8；Foxp3；宫颈微环境；子宫颈癌

随着对免疫调节系统对肿瘤影响的关注度逐年提高，人们对CD4、CD8及Foxp3T淋巴细胞在肿瘤细胞免疫中的作用也越来越重视。故此，研究CD4，CD8及Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌中的表达及意义对了解宫颈癌时子宫微环境的变化及宫颈癌的诊断及治疗有明确的临床意义[1]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年7月～2014年7月我院妇科手术切除或活检的宫颈组织石蜡标本75例，其中宫颈癌患者63例，年龄40～60岁，平均年龄50岁。依据2009年国际妇产科联盟（FIGO）的临床分期标准：宫颈鳞癌I期21例；II期17例；III期11例；IV期14例；其中发生淋巴结转移9例，宫颈炎12例。

1.2 主要试剂和仪器

CD8mAb：兔抗人CD8单克隆抗体，工作浓度为1:500；CD4mAb：兔抗人CD4单克隆抗体，工作浓度为1:250；Foxp3 mAb：鼠抗人Foxp3单克隆抗体，工作浓度为1:100；摊片机，烤片机（新苗DHG-914385-III电热恒温干燥箱）；CHS型光学显微镜（01ympus光学有限公司）。

1.3 试验方法

将选好的石蜡标本连续切片，制成4 μm厚的切片。依次经过脱蜡和水化。行苏木精-伊红染色（HE）和免疫组化染色，高温高压抗压修复，二氨基联苯胺（DAB）显色，最后进行镜检和拍照。

1.4 统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件对数据进行分析，计量资料采用t检验，计数资料采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

CD4阳性产物呈棕黄色颗粒状，主要分布于CD4+T细胞的细胞质及细胞膜中。CD4T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为46%，宫颈癌Ⅰ期（-）5例，（+）11例，（++）5例；宫颈癌Ⅱ期（-）7例，（+）7例，（++）3例；宫颈癌Ⅲ期（-）9例，（+）2例；宫颈癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。CD8分子表达于T淋巴细胞的细胞膜和细胞浆，染色从浅黄到棕褐色。多分布于宫颈上皮层及基底层的间质组织，在癌灶组织亦有少量表达。CD8T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为35%，宫颈癌Ⅰ期（-）8例，（+）10例，（++）3例；宫颈癌Ⅱ期（-）9例，（+）6例，（++）2例；宫颈癌Ⅲ期（-）10例，（+）1例；宫颈癌Ⅳ期（-）13例，（+）1例。Foxp3阳性染色主要位于细胞核内，少数在细胞膜中显色。其阳性表达表现为浅黄色、棕黄色、棕褐色颗粒，逐渐加深。Foxp3T淋巴细胞在宫颈癌中的阳性表达率为78%，宫颈癌I期（-）1例，（+）20例；宫颈癌Ⅱ期（-）3例，（+）6例，（++）8例；宫颈癌Ⅲ期（-）4例，（+）3例，（++）4例；宫颈癌Ⅳ期（-）6例，（+）2例，（++）3例，（+++）3例。

CD4、CD8分子在宫颈癌组的阳性表达率明显低于宫颈炎组（P＜0.05）；Foxp3在宫颈癌组的阳性表达率明显高于宫颈炎组（P＜0.05）。见图1、图2、图3。

图1 CD4在不同宫颈病变组织中的表达情况

图2 CD8在不同宫颈病变组织中的表达情况

图3 Foxp3在不同宫颈病变组织中的表达情况

3 讨 论

3.1 CD4+T淋巴细胞与宫颈癌的关系

CD4+T淋巴细胞主要识别肿瘤细胞分泌的可溶性抗原，同时，CD4+T淋巴细胞还能释放多种细胞因子参与机体的抗肿瘤免疫应答[2]。因此，CD4+T淋巴细胞减少为肿瘤细胞的免疫逃避提供了条件。

3.2 CD8+T淋巴细胞与宫颈癌的关系

CD8分子是T淋巴细胞表面的糖蛋白，T淋巴细胞活化并分化为细胞毒性T淋巴细胞（CTL），从而发挥杀伤靶细胞的作用[3]，当肿瘤细胞HLA-I类抗原表达降低时，被激活的CTL数量减少，机体清除肿瘤细胞的能力相应减弱，从而使肿瘤细胞在体内继续生存。由此可见CD4+T淋巴细胞和CD8+T 淋巴细胞在抗肿瘤反应中虽然发挥了不同作用，但它们一旦改变，就能够使肿瘤细胞逃避机体的免疫系统的监视和清除，为肿瘤细胞的发展、侵润和转移提供了必要条件。

3.3 Foxp3与宫颈癌的关系

有研究发现，持续的HPV感染与Foxp3的表达高度相关，Foxp3+淋巴细胞的数量及功能的增加主要与机体对肿瘤抗原免疫反应差以及机体免疫系统功能紊乱有关[4]。

4 结 语

本研究采用免疫组织化学SP法检测宫颈癌、CIN及慢性宫颈炎中CD4、CD8和Foxp3分子的表达，结果如下。

1）CD4、CD8分子在宫颈癌组的表达率均明显降低；而Foxp3则升高。2）CD4、CD8分子的表达存在正相关关系。3）在宫颈癌组中，CD4、CD8和Foxp3分子在宫颈癌的不同临床分期表达比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，CD4、CD8分子在宫颈癌组织中表达减少及无表达，Foxp3则升高。提示宫颈的局部免疫状态与宫颈病变的发生发展密切相关。

[1] 乐 杰.妇产科学[M].第7版.北京:人民卫生出版社,2011.

[2] RE. Pollock.临床肿瘤学手册[M].第7版.吉林:吉林科学出版社,2001.

[3] 曹泽毅.中华妇产科学[M].北京:人民卫生出版社,2010:565-577.

[4] 覃 烨,王红丽,任 彤.宫颈癌及宫颈上皮内瘤病变与生殖道感染的相关性研究[J].中华医院感染学杂志,2014,24(4):811-813.

本文编辑：吴玲丽

Expression and signifi cance of CD4, CD8and FOXP3T lymphocytes in cervical cancer

LI Chan, HAN Li-ping (The First Affi liated Hospital of Zhengzhou University, Henan Zhengzhou 450003, China)

R737.3

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ISSN.2095-8803.2015.09.009.02