青格达湖湿地野鸟中AIV和NDV监测

文│侯群（石河子大学动物科技学院、青格达湖自然保护区管理站）马长宾 陈文武 崔蕾 刘向鹏 吴挺（新疆生产建设兵团第六师五家渠市畜牧兽医工作站）胡少华（青格达湖自然保护区管理站）李岩（石河子大学动物科技学院、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站）

青格达湖湿地野鸟中AIV和NDV监测

文│侯群（石河子大学动物科技学院、青格达湖自然保护区管理站）马长宾 陈文武 崔蕾 刘向鹏 吴挺（新疆生产建设兵团第六师五家渠市畜牧兽医工作站）胡少华（青格达湖自然保护区管理站）李岩（石河子大学动物科技学院、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站）

新城疫和禽流感均是由病毒感染引起的家养和野生禽类的急性高度接触性传染病。野鸟尤其是野生水鸟是禽流感病毒（AIV）和新城疫病毒（NDV）的天然宿主，并在禽流感和新城疫传播过程中起到一定作用，这些观点已经被大多数学者认可。

青格达湖自然保护区海拔504米，位于新疆维吾尔自治区五家渠市南郊，南距乌鲁木齐市32千米，东南距米泉区18千米，西南距昌吉市19千米，处于乌昌经济带的腹心地带，因其对乌鲁木齐市及周边地区气候起着重要的调节作用，被誉为“天然加湿器”和“首府之肾”。青格达湖湿地自然保护区是根据《中华人民共和国自然保护区条例》第二章第十条第二款珍稀、濒危野生动植物物种的天然集中分布区域应当建立自然保护区的规定，于2002年12月经新疆生产建设兵团批准列入的第一个兵团范围内省级自然保护区。

青格达湖湿地面积23.25平方千米，核心区7.96平方千米，占保护区总面积的34.24%，主要为鸟类栖息地；缓冲区位于核心区的东部，面积14.49平方千米，占保护区总面积的62.32%，主要为灌木林和旅游经营水域；试验区位于主坝北部，面积0.8平方千米，占保护区总面积的3.44%，主要是自然及人文景观。

青格达湖自然保护区及周边区域鸟类约225种，分属18目53科124属，约占新疆鸟类种数的48%，约为全国鸟类种数的19%，可见青格达湖自然保护区及周边区域鸟类资源相当丰富。其中，国家Ⅰ级重点保护物种5种分别是大鸨、黑鹳、金雕、玉带海雕、白尾海雕，Ⅱ级重点保护物种38种。在青格达湖自然保护区野生鸟类的优势种有：大雁、鸬鹚、鹬类、紫翅椋鸟、燕类、野鸭、鸥类、黑鸢、雀类。每年的4～5月、10～11月是鸟类迁徙的主要时间。3条大的国际迁徙路线（通道）经过青格达湖自然保护区：一是西亚—中东—东非路线，二是西伯利亚—中亚—南亚路线，三是北极苔原—亚洲—大洋洲路线。这说明青格达湖自然保护区的地理位置比较独特，是国际3大迁徙路线的一个节点，重要作用不言而喻。

青格达湖自然保护区水草丰茂，鸟类繁多，生物多样性丰富，是国际候鸟迁徙的重要驿站，也是新疆鸟类的重要栖息地。年过鸟量达20万只，常年栖息鸟类2万余只。然而，对于这些野鸟，目前缺乏有效的免疫与疫病监控措施。鉴于此，笔者对青格达湖湿地野鸟进行了禽流感和新城疫的流行病学监测和调查，以便为有效控制或预防禽流感和新城疫提供科学依据。

一、材料与方法

1.材料。

（1）试剂。检测禽流感、新城疫病毒抗体的血凝和血凝抑制（HA和HI）试验诊断试剂，购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。

（2）试剂盒。检测禽流感通用型、新城疫通用型。

2.方法。

（1）样品的采集及处理。于2014年4月至2015年3月，对青格达湖湿地保护站救治痊愈的5只野生鸟类进行了样品采集，样品包括野鸟的血样和喉肛棉拭样品。其中，蓑羽鹤（双侧翅受伤）、大麻鳽（左侧翅受伤）、猫头鹰（幼鸟）、红嘴鸥（爪受伤）、鹈鹕（喙受伤）各1只。

（2）血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验。HA和HI试验参照GB/T18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》和GB/T16550-2008《新城疫诊断技术》进行。

（3）RT-PCR操作程序。按照禽流感病毒通用型RT-PCR和新城疫病毒通用型RT-PCR检测试剂盒说明书，并参照NY/T772-2004《禽流感病毒RT-PCR试验方法》进行。

二、结果

1.野鸟血清中AIV阳性抗体的检测结果。经HI试验对不同亚型AIV抗体（H5/H7）的检测，在受检的5种野鸟的5份血样AIV抗体检测结果均为阴性。

2.野鸟血清中新城疫病毒阳性抗体的检测结果。新城疫HI抗体效价均小于4lg2，血清抗体阳性率为0，说明所检测的野鸟血清中无新城疫病毒抗体。

3.喉肛棉拭样品AI、新城疫病毒的检测结果。采用RT-PCR检测方法对野鸟的喉肛棉拭样品进行H5和H7亚型AIV的病原学检测，结果均为阴性；采用通用型RT-PCR试剂盒对所采集野鸟的喉肛棉拭样品进行新城疫病毒的病原学检测，结果均为阴性。

三、讨论

1.本次通过HI和RT-PCR方法对在青格达湖湿地采集的5种野生鸟类样品进行病毒血清抗体和病原进行检测，检测结果均为阴性，说明所检测的5种野生鸟类并未携带禽流感和新城疫病毒。这一检测结果与孙泉云等和成进等的检查结果不一致，其原因可能是捕获的野鸟为不带毒的状态；二是采样的数量较少，这有待今后持续监测分析。

2.虽然本次调查未发现新疆青格达湖湿地野生鸟类感染禽流感和新城疫病毒感染，但存在野生鸟类与水网密集区家禽（尤其是鸭）接触，有可能在家禽与野禽之间的AIV、NDV循环，2013年周边地区就发现了家禽AIV，因而野生鸟类在AIV、NDV流行病学和生态演化中的作用，需要持续的动态监测和研究。

3.AIV感染的禽类宿主非常广泛。国内外学者现已证实AIV的所有血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）亚型（H1～H16和N1～N9）和大多数HA/NA组合在野生鸟类中储存。众所周知，H5和H7亚型是属于高致病性禽流感的范畴，若没有任何症状或病情的野鸟携带高致病性AIV无疑将对本地区家禽养殖环境构成潜在的威胁和隐患。鉴于此，本次主要对H5和H7两个高致病性禽流感亚型进行了流行病学调查，然而要想弄清楚本地区野生鸟类感染AIV不同HA亚型的范围是否在不断扩大，表明导致基因重组和置换的几率是否也在增加，需要对本地区有关野生鸟类AIV进行持续监测，以便获得长期的、大量的、规律性数据。

2014年第六师五家渠市科技计划，

课题编号：1419