高效液相色谱同时检测麦草畏及其两种中间体

马 勇

（浙江新安化工集团股份有限公司，浙江 建德311600）

麦草畏（3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸），属安息香酸系除草剂，具有内吸传导作用，对一年生和多年生阔叶杂草有显著防除效果，是一种具有选择性和内吸传导型苗后生长素类除草剂，是国家重点鼓励和发展的高效、低毒旱地除草剂。麦草畏的制备过程是将1，2，4-三氯苯用氢氧化钠甲醇溶液水解，生成2，5-二氯苯酚，在压力下与二氧化碳加热反应，生成2-羟基-3，6-二氯苯甲酸，最后用硫酸二甲酯甲基化即得[1]。市场上制备一般以2，5-二氯苯酚（DCP）或3，6-二氯水杨酸(DCS)为起点。反应式如下：

国际农药分析协作委员会（CIPAC）规定用红外光谱分析法作为麦草畏制剂的标准分析方法[2]。蒋闳[3]将麦草畏重氮化衍生以后，用气相色谱进行分析，步骤较为繁琐。Andrew M.Fogarty[4]、Masood Arjmand[5]、马有宁[6]等使用高效液相色谱法对麦草畏进行了分析。本研究采用磷酸盐缓冲溶液等度高效液相色谱，对麦草畏、DCP、DCS同时分析，满足了合成过程中的质控要求。

1实验部分

1.1 仪器与设备

电子天平AB265-S，Mettle Toledo公司；Agilent1260高效液相色谱仪（配有四元高压泵和二极管阵列检测器），安捷伦公司。

1.2 试剂与材料

甲醇，色谱级；磷酸，优级纯；磷酸二氢钾，优级纯；麦草畏对照品（w>99.1%）；DCP对照品（w>98%）；DCS对照品（w>99%）；实验用水为Milli-Q超纯水。

1.3 溶液的制备

标准溶液的配制：准确称取麦草畏、DCP、DCS对照品各50mg（精确至0.2mg），置于50mL容量瓶中，用甲醇定容。该贮备液在4℃以下密封冷藏可保存1个月。使用时稀释至所需浓度。

样品溶液的配制：准确称取样品20mg（精确至0.2mg），置于100mL容量瓶，用30%甲醇溶液溶解，振摇至气泡消失后定容。

1.4 色谱条件

色谱柱：ThermoHypersilGOLD（C18），150mm×4.6mm，粒径5μm；柱温：室温；流动相：V(甲醇)∶V（水）=30∶70；流速：1.0mL／min；检测波长：215nm；进样体积：2μL。

1.5 计算

式中w’——样品含量，%

A’——样品峰面积

m’——样品质量

f ——校正因子

w——对照品含量，%

A——对照品峰面积

m——对照品质量

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的确立

2.1.1 检测波长的确定

扫描麦草畏、DCP、DCS对照品的紫外吸收光谱，如图1。从图1可看出，3种物质在215 nm附近吸收均较强，单位质量吸光度相近，确定将215 nm作为检测波长。

图1 对照品的紫外吸收光谱

2.1.2 流动相的选择

在甲醇+水和乙腈+水溶液中加入0.1%磷酸和4mM磷酸二氢钾，在不同比例进行试验，结果在甲醇/水=40/60，乙腈/水=30/70中均得到较好的结果，选择甲醇/水=40/60作为流动相（参见图2）。

图2 麦草畏、DC S、DC P 出峰顺序

2.2 精密度试验

在上述条件下，对样品进行平行测定，3种物质的相对标准偏差分别为，麦草畏：0.13%；DCP：0.18%；DCS：0.21%。(n=11)。表1示出了样品平行测试的相对标准偏差。

表1 样品平行测试的相对标准偏差

2.3 准确度试验

样品稀释后加入一定量麦草畏、DCP、DCS的混合标样，按本方法进行测定，回收率分别为：98.7～99.4%、98.3～98.7%、101.7～102.5%（参见图3）。

3 结论

本方法精确度和准确度都比较高，样品处理简便，20min内即可完成一次测试。麦草畏生产过程中的主要成分在色谱上完美分离，在产品的离线控制方面得到了满意的效果。

图3 样品加标色谱图

[1]章小波,蒋永祥.安息香酸系除草剂——麦草畏的合成[J]. 农药, 2002,41（11）:13-14.

[2]Analysis of Technical and Formulated Pesticides[M].CIPAC handbook, 1998, Volume H: 127-134.

[3]蒋闳,王华顶.毛细管气相色谱法重氮甲烷化分析麦草畏[J]. 安徽化工, 2003,（4）:50.

[4]Andrew M.Fogarty,Samuel J.Traina.Determination of Dicamba by Reverse-Phase HPLC [J]. Journal of Liquid Chromatography, 1994, 17（12）: 2667-2674.

[5]Masood Arjmand,Terry D.Spittler.Analysis of Dicamba from Water Using Solid-Phase Extraction and Ion-Pair High-Performance Liquid Chromatography [J]. J. Agric.Food Chem., 1988, （36）:492-494.

[6]马有宁,陈铭学.高效液相色谱-串联质谱法分析蔬菜中残留的麦草畏[J]. 农药学学报,2012,14（3）:349-352.