球必妥口服液的安全性评价

贾青辉,李蕴玉,李佩国，张文香，张香斋,张艳英，张清波

（1.河北科技师范学院动物科技学院，河北秦皇岛066600；2.石家庄九鼎药业有限公司，河北石家庄052160）

耐药虫株的出现和药物在肉蛋中的残留是用化学药物防治鸡球虫病需要解决的两大难题。因中药具有毒副作用小和抑杀球虫、增强机体免疫功能及促进生长等优点，尤其是鸡球虫对其不易产生耐药性和无残留，中药成为替代化学抗球虫药的主要途径之一。本试验根据中医理论、辩证理论和鸡球虫发病特点，组成中药复方，应用中药口服液制作工艺制成了球必妥，防治球虫病效果良好。为了评价球必妥的安全性，为临床用药提供保证，以及为今后新药的开发和利用提供科学的依据，对鸡进行了亚慢性毒性试验。

1 材料与方法

1.1 试验用药

球必妥口服液：青篙（25%）、苦参（15%）、大蓟（10%）、仙鹤草（15%）、地榆（10%）、白头翁（15%）、黄芪（10%）。依据中药口服液制作工艺制作而成1.00 克/毫升的母液备用。

1.2 试验动物分组

选择体重相近的14日龄蛋公雏90 只，随机分成3 组，每组3 个重复，每个重复10。其中第I组为空白对照组；第Ⅱ组为饮用质量浓度为45 克/升的球必妥口服液；第Ⅲ组为饮用质量浓度为90克/升的球必妥口服液。于分组后当天开始用药，连续用药30 天。

1.3 临床观察

试验期间逐日观察并记录各组鸡的采食、饮水、排粪、羽毛的光泽度等。试验结束时空腹称重，统计并比较体重增长情况。

1.4 血液生化指标测定

于试验开始前和试验结束时每组随机抽取5只，心脏采血并分离血清，在-20℃下保存，用于血液生化指标测定。其中血清尿酸（UA）：酶比色法；血清肌酐（Cre）：苦味酸法；血清直接胆红素（T.Bi1i）与血清总胆红素（D.Bi1i）：重氮法；血清谷丙转氨酶（GPT）与血清谷草转氨酶（GOT）：连续监测法；血清总蛋白含量（TP）：双缩脲法；血清白蛋白（ALB）：溴甲酚绿法；血清球蛋白（GLB）：差减法（总蛋白-白蛋白）。

1.5 免疫器官指数及病理学观察

在试验结束时每组随机抽取5 只剖杀，观察并记录心、肝、脾、肺、肾、盲肠、法氏囊、胸腺等组织器官的肉眼变化。取胸腺、法氏囊、脾脏分离周围组织后称重，计算免疫器官指数：以免疫器官鲜重（克）占每千克体重（千克）表示。

1.6 统计处理

使用Exce1 2003 和SPASS 11.5 软件包，以单变量方差分析(one-way ANOVA)进行统计，数据以均值±标准差表示，P＞0.05 为差异不显著，P＜0.05为差异显著，P＜0.01 为差异极显著。

2 结果与分析

2.1 临床表现

表1 各组增重和料重比

试验期间雏鸡饮用球必妥口服液后其精神状况、采食、饮水、排粪等均无异常表现，体态发育良好，无任何中毒症状，存活率为100%。

2.2 增重及料肉比情况

从表1 可见，在整个试验期内，Ⅱ组增重最高，达244.31 克，料重比最低为2.49，与Ⅰ组相比，其增重显著提高了10.59%（P＜0.05），料重比显著降低了11.70%（P＜0.05），并于第Ⅲ组差异不显著。

表2 各组不同时间血清生化指标变化

表3 各组免疫器官的重量（克）

表4 各组免疫器官指数（克/千克）

2.3 血清生化指标变化

从表2 可见，Ⅱ组、Ⅲ组GPT、GOT 活力、肌酐、尿酸、总蛋白、白蛋白、球蛋白、T.Bi1i 和D.Bi1i含量与Ⅰ组比较无明显差异（P＞0.05）。

2.4 免疫器官重量及免疫器官指数变化

剖杀观察，与空白对照组比较，球必妥口服液组鸡的心、肝、肾、脾等主要器官的形态、质地、色泽均无异常变化。

从表3、表4 可见，各组间胸腺、法氏囊、脾脏的重量和指数均无差异不显著(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 对雏鸡临床症状和病理组织学的影响

本试验将抗球虫中药制剂以预防量和2 倍治疗剂量用于饮水，连续饮用30 天，对鸡的精神、饮食和生长等均无明显影响。病理剖检及病理组织学观察肝、肾、心等主要器官，未出现异常的病理变化。试验结果表明长期使用该中药制剂没有引起机体出现中毒反应，机体组织器官未受到明显损伤，说明该中药制剂毒副作用比较低。

3.2 对雏鸡生长速度的影响

鸡生长受外源和内源两类因子的影响，内源因子与遗传及生理状况相关，外源因子源于环境，又称环境因子，如食物、温湿度等。本试验是在各种条件相对稳定的条件下进行的。试验结果表明，在试验结束时球必妥口服液中、高剂量组的平均增重显著高于空白对照组，料重比虽然与对照组比较差异不显著，但分别降低了11.70%和10.28%。说明球必妥口服液具有促进机体生长和提高饲料转化率的作用。

3.3 对雏鸡免疫器官重量及免疫器官指数的影响

本试验测定了雏鸡免疫器官重量及免疫器官指数，结果发现饮用球必妥口服液的2 个试验组的免疫器官重量及免疫器官指数虽然与对照组比较差异不显著，但均高于对照组。胸腺、脾脏和法氏囊是机体重要的免疫器官，胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数在一定程度上反映了机体免疫功能的强弱。本试验进一步证实了抗球虫中药能促进雏鸡免疫器官的发育，使机体免疫功能增强。

3.4 对雏鸡肾功能的影响

尿酸是人、猿和禽类嘌吟代谢的终产物，属核酸及蛋白质代谢的一部分。尿酸在血液中的含量既体现畜禽肝肾功能是否正常，也体现了细胞核酸和蛋白质代谢状况是否正常。当尿酸含量增高时，说明肝肾功能异常。

肌酐是肌肉肌酸和磷酸的代谢产物，其数值不受食物中蛋白质含量、蛋白质代谢以及年龄、性别或运动的影响。经肾小球滤出，可作为检查肾小球滤过能力是否正常的诊断指标。

本试验中药组血清肌酐含量和尿酸含量与空白对照组比较差异不显著，反映肾小球滤过率正常，肾脏未受损伤。

3.5 对雏鸡肝功能的影响

肝脏具有旺盛的代谢功能，含有丰富的酶类。谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)是广泛存在于动物组织细胞线粒体内的重要氨基转移酶，在机体蛋白质代谢中起着重要的作用。正常时，谷丙转氨酶主要存在于组织细胞内，以肝细胞含量最多，心肌细胞中含量其次，只有极少量释放血中，所以血清中此酶活力很低。当肝脏、心肌病变、细胞坏死或通透性增加时，细胞内各种酶释放出来，使血清中此酶活性升高。谷草转氨酶在肝细胞内含有较高的浓度，只要肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害，谷草转氨酶就会由肝细胞释放到血中，使这种酶在血清中的活性升高。因此，血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶增高的意义较大，其增高程度可反映肝细胞损害和坏死的程度。

胆红素分为直接胆红素和间接胆红素，二者之和为总胆红素。胆红素主要在肝脏中生成，储存在胆囊中。正常时，肝细胞能够清除肝细胞所产生的胆红素。当肝脏受到损伤时肝细胞产生的直接胆红素和间接胆红素增加，超过肝细胞能够清除率，而滞留在血液中，因而使血清中胆红素浓度升高。

蛋白质是血清的主要成分，血清中白蛋白与球蛋白之和即为血清总蛋白，血清总蛋白大部分由肝脏合成，除作为营养物的载体外，还维持血浆渗透压，同时又是机体蛋白质的一个来源，用于修补组织和提供能量，当肝细胞出现病变，合成功能降低，影响蛋白质的质与量。血清球蛋白是一组成分复杂的蛋白质组合的总称，它包括多种酶类、激素、抗体等特殊蛋白质。球蛋白来源于浆细胞的分泌，反映机体的抵抗力。血清白蛋白系由肝实质细胞合成。检查血清总蛋白、白蛋白、球蛋白可作为反映肝功能的指标。

本试验饮用球必妥口服液的2 组血清中的GPT、GOT 活性以及血清总胆红素、直接胆红素、总蛋白、白蛋白、球蛋白含量与对照组比较无显著差异，反映肝细胞清除胆红素的功能正常，肝脏合成蛋白质的功能正常。试验结果表明，长期使用球必妥口服液肝脏功能正常未受到损伤，进一步证实球必妥口服液是一种低毒或无毒副作用，具有多种生理活性，并能调节机体内环境平衡的有效药物。

（略）