高效液相色谱法测定琥珀酸亚铁片的含量均匀度及溶出度*

窦金凤，邵吉，刘源，胡安青

（江苏省镇江市药品检验所，江苏镇江212003）

高效液相色谱法测定琥珀酸亚铁片的含量均匀度及溶出度*

窦金凤，邵吉，刘源，胡安青

（江苏省镇江市药品检验所，江苏镇江212003）

目的建立测定琥珀酸亚铁片中Fe2+含量均匀度及溶出度的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为Agilent TC-C18柱（250mm× 4.6 mm，5μm），流动相为0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40），检测波长为215 nm。结果Fe2+物质的量浓度在1.62～16.16 mmol/L范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为98.94%，RSD=1.08%（n=6）。结论该方法操作简便、结果准确，可用于琥珀酸亚铁片的质量控制。

琥珀酸亚铁片；高效液相色谱法；含量均匀度；溶出度

琥珀酸亚铁片是补铁的常用制剂，具有补充铁元素和纠正缺铁性贫血的作用，用于缺铁性贫血的预防和治疗。该制剂质量标准是用氧化还原滴定法测定其Fe2+的含量，对其含量均匀度未测定。本研究中参考文献［1-5］采用高效液相色谱（HPLC）法测定琥珀酸亚铁片含量均匀度及溶出度，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters 2695型高效液相色谱仪；3-Star型精密pH计；AG245型天平。琥珀酸亚铁片（金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂，批号分别为110904，110801，111105）；琥珀酸对照品（国产分析纯，含量不低于99.8%）；试验用水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：0.05 mol/L KH2PO4（pH=2.40）；检测波长：215 nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；进样量：20μL。理论板数按琥珀酸计不低于5 000，琥珀酸与相邻杂质峰之间的分离度大于1.5，色谱图见图1。

2.2 溶液制备

精密称定琥珀酸对照品0.381 5 g，置100mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，制成质量浓度为32.31mmol/L的琥珀酸对照品贮备液；精密量取贮备液3mL，置10mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，即得对照品溶液。

取琥珀酸亚铁20片，除去薄膜衣后精密称定，研细，精密称取约2片量的样品粉末置100 mL容量瓶中，加适量流动相，超声处理20 min，用流动相稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验：按处方取其他原辅料，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液，照拟订色谱条件分别进样测定。结果其他辅料对测定无干扰（见图1）。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：精密取琥珀酸对照品贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，得质量浓度不等的系列对照溶液，分别取系列对照溶液各20μL进样测定。以质量浓度（X）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程Y=138 608X-3 369.9，r=0.999 9（n=6）。结果表明，琥珀酸质量浓度在1.62～16.16mmol/L范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液（9.69 mmol/L）20μL，连续进样5次，依法测定。结果琥珀酸亚铁峰面积的RSD=0.40%（n=5），表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批（批号为110904）样品，依法制备5份供试品溶液并依法进样测定含量。结果的RSD=0.90%（n=5），表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于配制后0，2，4，6，8，12 h时依法进样测定。结果的RSD=0.40%（n=6），表明供试品溶液在12 h内基本稳定。

加样回收试验：称取已知含量的同批样品（批号为110904）6份，每份约0.2 g，精密称定，分别加入琥珀酸对照品，依法测定，并计算回收率，结果见表1。

表1 琥珀酸加样回收试验结果（n=6）

2.4 含量均匀度测定

取本品1片，置乳钵中，研细，加流动相适量，并分次转移至50mL容量瓶中，超声20min，放冷，用流动相稀释至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液，依法进样测定。结果见表2。

表2 样品含量均匀度测定结果（%）

2.5 溶出度测定

采用2010年版《中国药典（二部）》附录溶出度测定法（第三法），以稀盐酸24mL加水至1 000mL为溶剂，取200mL，转速为100 r/min，温度为37.0℃，分别于5，10，20，30，45，60min时取溶液适量，滤过，续滤液作为供试品溶液，依法进样测定，绘制溶出曲线。见图2。搅拌桨转速对照品溶出量测定结果见表3。

3 讨论

图2 溶出度测定结果图

表3 搅拌浆转速对样品溶出量的影响（%）

该方法只能测定与琥珀酸根结合的亚铁，不能用于测定总的亚铁含量。由于琥珀酸亚铁片中Fe2+的含量较少，故建议进行含量均匀度检查，不同批次间的结果存在差异。本研究结果显示，流动相的pH对峰形影响较大。琥珀酸亚铁在各种亚铁盐中吸收率较好，是琥珀酸亚铁片的主要有效成分。琥珀酸亚铁中琥珀酸根离子与Fe2+的摩尔比为1∶1，本研究中采用HPLC法测定琥珀酸根离子的量即可计算与琥珀酸结合的Fe2+含量，对控制琥珀酸亚铁片的生产工艺，确保其主要成分的含量，有一定应用价值。

由于琥珀酸亚铁片中Fe2+的含量较少，故采用《中国药典（二部）》中第三法（小杯法）测定其溶出度，以提高其准确度。根据试验数据，溶出的转速以100 r/min为宜，取样时间为60min。

［1］郭小洁.HPLC法测定盐酸特拉唑嗪胶囊溶出度［J］.中国药品标准，2005，6（2）：8-11.

［2］李晓燕，冉晓静.HPLC法测定复方对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸及咖啡因的含量［J］.药物分析杂志，2008，28（5）：801-803.

［3］郑艳彬，印杰，陆威.同厂家那格列奈片的溶出度比较［J］.中国药师，2009，12（11）：1 678-1 679.

［4］阚淑玲，屠锡德，刘建平.琥珀酸亚铁胃内滞留漂浮型缓释片的制备及体外释放度研究［J］.药学与临床研究，2009，17（2）：89-92.

［5］李莺，吴燕，刘丽平，等.自制与进口盐酸左西替利嗪片溶出度比较［J］.中国药业，2012，21（21）：8-9.

Determination of Content Uniform ity and Dissolution in Ferrous Succinate Tablets by HPLC

Dou Jinfeng，Shao Ji，Liu Yuan，Hu Anqing
（Zhenjiang Institute for Drug Control，Zhenjiang，Jiangsu，China 212003）

Objective To establish an HPLC method for the determination of content uniformity and dissolution of Fe2+in Ferrous Succinate Tablets.Methods An Agilent TC-C18column（250 mm×4.6 mm，5μm）was used.The mobile phase consisted of 0.05mol/L KH2PO4（pH=2.40），and the detective wavelength was at 215 nm.Results The linear concentration ranges of Fe2+was 1.62～16.16 mmol/L.The average recoveries were 98.94%and RSD=1.08%（n=6）Conclusion The method is simple and accurate and can be used to control the quality of Ferrous Succinate Tablets.

Ferrous Succinate Tablets；HPLC；content uniformity；dissolution

R927.2；R973+.3

A

1006-4931（2015）22-0116-02

2014-09-30；

2015-03-20）

*江苏省镇江市科技支撑计划项目，项目编号：FZ20130332。