玄参多糖抗肿瘤作用的实验研究

邹　霞　易　萍　曹　江

（湖南省肿瘤医院药学部，湖南 长沙 410006）

玄参多糖抗肿瘤作用的实验研究

邹霞易萍曹江

（湖南省肿瘤医院药学部，湖南 长沙 410006）

目的 玄参多糖抗食管癌Eca-109肿瘤、肉瘤S180肿瘤的作用。方法 小鼠接种Eca-109实体瘤或S180腹水瘤24 h后随机分组，灌胃给予不同剂量玄参多糖［（200、400、800 mg/（kg•d）］。实验结束时，计算玄参多糖对小鼠Eca-109实体瘤生长的抑制率，脾脏指数和胸腺指数，以及S180腹水型荷瘤小鼠的存活时间。结果 与环磷酰胺组比较，给予玄参多糖灌胃的荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数显著增加；低、中、高剂量的玄参多糖对Eca-109实体瘤的抑瘤率分别是18.59%、26.13%、36.17%。玄参多糖各剂量组均可显著延长S180腹水型荷瘤小鼠的存活时间，其中中、高剂量组尤为明显。结论 玄参多糖表现出一定的抑制肿瘤作用和保护机体免疫器官。

玄参多糖；抗肿瘤作用；实验研究

玄参（Radix Scrophulariae）为双子叶植物玄参科玄参的干燥根，是我国传统的中草药，始载于《神农本草经》，具有清热凉血，泻火解毒，滋阴的功效。其有效成分为生物碱、糖类、甾醇、氨基酸、脂肪酸、微量挥发油、胡萝卜素等，具有抗炎、增强免疫、抗肿瘤、抗疲劳等作用。药效学研究中，多从其有效成分生物碱入手，治疗炎症相关疾病，但其他有效成分研究甚少。结合当前药物有效成分研究策略，中药多糖类的有效成分多表现出较好的抗肿瘤活性［1］，故拟以玄参多糖作为研究对象来探讨其抗肿瘤效应，并初步研究其用机制，为其进一步开发利用提供参考。

1　材料与方法

1.1实验材料

1.1.1药物与试剂。玄参多糖：参照文献制备部分纯化玄参多糖，在阴凉干燥处保存。体内实验时用蒸馏水充分溶解，供灌胃使用，现用现配。环磷酰胺（CTX），用生理盐水配成所需浓度。石油醚，乙醇均为分析纯。

1.1.2肿瘤细胞株：人食管癌细胞Eca-109、肉瘤S180细胞株购自中国科学院上海细胞中心，以腹水型传代保种，临用时抽取Eca-109和S180腹水，以灭菌生理盐水稀释备用。

1.3受试动物：清洁级ICR小鼠，体质量（20±2）g，雄性，由中南大学实验动物中心提供。饲养条件：温度20～25 ℃，日温差≤3 ℃，湿度：40%～70%，光照12 h明暗交替。

1.2实验方法

1.2.1提取玄参多糖：玄参烘干、粉碎后，用分析天平准确称取一定量玄参粉末，参照参考文献［2-3］。制定玄参多糖基本提取条件为：按料液比1∶40（玄参质量∶蒸馏水体积=g∶mL）加入蒸馏水，在温度50 ℃、功率250 W下超声提取50min，提取3次后，合并滤液、离心、去上清、浓缩，得到的粗多糖溶液用Sevag法脱蛋白7次，除去游离蛋白质，透析袋对自来水透析48 h，再经蒸馏水透析24 h，除去无机盐、单糖等小分子物质，后用70%乙醇，醇沉24 h。在高速离心机上以3000 r/min将上述醇沉物离心20min后得到沉淀，依次用丙酮、乙醚洗涤，干燥，得到半精品玄参多糖。

1.2.2体内肿瘤生长抑制实验：在灭菌条件下，分别取传代小鼠食管癌Eca-109实体瘤瘤液以生理盐水1∶4稀释，每只0.3mL注入小鼠右腋皮下。接种后24 h，50只动物随机分为空白对照组，环磷酰胺阳性对照组，玄参多糖药物组（其中按灌胃剂量200、400、800［（mg/（kg•d）］，分别设低、中、高3剂量组），每组10只。阴性对照组灌胃等体积蒸馏水，环磷酰胺阳性对照组30 mg/kg，腹腔隔日注射1次，同时灌胃蒸馏水。动物灌胃体积为20 mL/kg体质量，每天1次，连续给药7 d。末次给药后24 h，颈椎脱臼处死动物，小心剥离瘤组织、胸腺及脾脏，分别称重，并计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数，进行疗效评价。肿瘤生长抑制率（%）=（对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%。胸腺指数=胸腺体质量（mg）/小鼠体质量×10。脾指数=脾体质量（mg）/小鼠体质量×10。

1.2.3玄参多糖对S180腹水瘤小鼠生存时间期的影响：具体分组和给药同上。然后在接种肿瘤之日算起，每天观察1次，并记录动物死亡时间，其中以各鼠生存天数计算每组平均生存时间。

1.2.4统计学处理：各组数据以均数±标准差表示，用F检验进行统计学分析。

2　实验结果

2.1对小鼠移植性Eca-109肿瘤生长的抑制作用：见表1。从表1可知，各组动物的初始体质量没有明显差异，经接种移植瘤和给药后，环磷酰胺组、玄参低和中剂量组一定程度上能显著抑制小鼠Eca-109肿瘤生长（P＜0.05），而玄参高剂量组能极显著抑制肿瘤的生长（P＜0.01），均表现出一定的抑瘤率。

表1　对小鼠移植性Eca-109肿瘤生长的抑制作用

2.2对Eca-109荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响：见表2。实验结束时，取样后测得Eca-109荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数显示：玄参各给药组对小鼠指数和脾指数均高于空白对照组，表明其对肿瘤小鼠的生长没有明显的抑制作用；但环磷酰胺组，虽然对小鼠生长有一定保护作用，但要弱于玄参，提示临床中中医药治疗肿瘤具有一定的优势。

表2 对Eca-109荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响

2.3对S180型腹水瘤小鼠生存时间的影响：见表3。表3表明，各药组均较空白对照组能明显延长S180型腹水瘤小鼠生存时间，其中以环磷酰胺组和玄参高剂量组为突出。

3　讨 论

当前，随着大众饮食习惯和易感因素的多现，食管癌的发病率呈逐年增加之势，对其防治也日益凸显其重要性。在肿瘤临床治疗中，主要应用仍然是传统的细胞毒类化疗药物。该类药物在发挥疗效的同时，对机体的不良反应明显，尤其是对免疫力有较大的破坏。而许多临床医师长期以来一直国内中医药治疗肿瘤的必要补充手段。但是由于中药具有成分复杂、作用靶点多、疗效不稳定、质量标准难以控制等特点，再加上有效成分难以提取分离的问题，制约了中药有效成分和药效的筛选。

本实验从玄参有效成分玄参多糖为研究对象，通过小鼠体内肿瘤实验来探讨其对肿瘤的治疗作用。研究结果显示玄参多糖有较好的抑制肿瘤生长、保护免疫器官、延长肿瘤小鼠的生存时间，故其有一定的抗肿瘤活性和提高机体免疫力作用。此外还有文献报道，其尚有对羟基自由基、超氧阴离子自由基以及亚硝酸盐具有不同程度的清除能力［4］。因此，作者准备采用体外实验、免疫学方法、蛋白组学、细胞学等技术手段，进行深入的研究，进一步探讨其抗肿瘤的机制。

［1］ 王军，于震，李更生，等.地黄昔A对“阴虚”及免疫功能低下小鼠的药理作用［J］.中国药学杂志，2002，37（1）：20-22.

［2］ 肖晏婴，陈平，王珲，等.正交实验法优选玄参多糖的提取工艺［J］.武汉工业学院学报，2008，27（2）：16-18.

［3］ 宋健.玄参多糖对游泳小鼠力竭时间及糖储备的影响［J］.食品科学，2009，30（15）：217-219.

［4］ 陈莉华，廖微，肖斌，等.玄参多糖体外清除自由基和抗氧化作用的研究［J］.食品工业科技，2013，7：86-89.

Study on Anti-tumor Effect of Radix Scrophulariae

ZOU Xia， YI Ping， CAO Jiang
（Department of Pharmacy， Hunan Cancer Hospital， Changsha 410006， China）

Objective To analyse the anti-turnout activity of Radix Scrophulariae on Eca-109， S180 tumor mice. Methods Eca-109， S180 tumor mice were adminis-tered orally with 200， 400， 800 mg/（kg/d） dosage of Radix Scrophulariae， then the tumor inhibitionrate， life time， thymus index， spleen index were measured at the end of experiment. Results Radix Scrophulariae can increase Eca-109 tumor mice the thymus index and spleen index of Eca-109 tumor mice，and the tumor inhibition rate was18.59%， 26.13%， 36.17%， respectively. In addition to， Radix Scrophulariae can also prolong life time of S180tumor mice. Conclusion This stydy meanings Radix Scrophulariae have anti-tumor effect and protect immune organs.

Radix Scrophulariae； Anti-tumor activity； Experiment study

表3　对S180型腹水瘤小鼠生存时间的影响

R285.5

B

1671-8194（2015）10-0069-02