ICU病原菌分布及对G-杆菌耐药率的分析

田勇光　陈葛慧

ICU病原菌分布及对G-杆菌耐药率的分析

田勇光陈葛慧★

目的 发现重症监护病房（ICU）患者病原菌的分布、流行趋势、耐药性变化，以便更好地指导临床治疗。方法 收集本院2011年8月至2013年7月ICU患者标本833例，严格按《临床检验操作规程》及相应仪器、试剂操作方法对合格标本进行细菌学培养、鉴定及药敏试验。结果 833例送检标本，阳性479例，阳性率为57.5%。共检出病原菌496株，其中革兰阴性（G-）杆菌占84.5%、真菌占8.7%、G+球菌占6.8%。G-杆菌主要为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、嗜麦芽寡养食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌，各菌的耐药率差异显著。结论 ICU患者病原菌以G-杆菌占优势，病原菌耐药性有明显差异。临床上应及时取样作细菌培养，根据药敏试验合理使用抗生素，尤其对住院时间较长且持续感染者更不能盲目用药。

重症监护病房 病原菌分布 G-杆菌 耐药率

重症监护病房（ICU）是收治危重患者的场所，由于临床危重患者抵抗力弱，接受侵入性治疗操作多，以及广谱抗生素的大量使用，极易感染病原菌，或原有病原菌产生广泛耐药性，直接影响着患者的救治和预后。流行病学调查表明，ICU患者中革兰阴性（G-）杆菌所致重症感染率＞70%［1］。针对以上现状，本文对本院ICU近2年送检标本进行病原菌分布的分析，并着重对分离到的G-杆菌的分布及耐药率进行回顾性分析，为临床合理、高效选用抗生素提供循证医学依据。现报道如下。

1　材料与方法

1.1标本来源 收集2011年8月至2013年7月在本院ICU住院的病例标本833例，主要为痰、下呼吸道分泌物、留置导管、血液等，用无菌瓶送检，进行细菌培养和药敏试验。对痰液标本先行涂片镜检，取合格痰［2］（鳞状上皮细胞＜10个/LP，WBC＞25个/LP）进行接种培养。血培养采集患者两个部位血液各10ml分别接种于两个培养基内，严格无菌操作。

1.2病原菌分离培养 严格按细菌培养操作规程，进行分离培养。采用梅里埃ATB自动细菌鉴定仪，并配套梅里埃鉴定卡及试剂。对同一患者相同菌株标本，若收集时间在15日内视为同一菌株，不重复统计。

1.3药敏试验 采用K-B纸片法［3］。G-杆菌药物主要为：青霉素类（复方氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、替卡西林-克拉维酸、），氨基糖甙类（妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星），头胞菌素类（头胞他定、头胞吡肟、头胞哌酮-舒巴坦），喹诺酮类（环丙沙星），复方磺胺甲恶唑，碳青霉烯类（亚胺培南），多粘酶素E。药敏试验同时采用大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853进行质控。

1.4超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测 采用NCCLS推荐的双纸片协同确证试验［3］，并以大肠埃希菌ATCC35218、肺炎克雷伯菌ATCC700603为质控菌株。

1.5统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。计数资料采用χ2检验和方差齐性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1细菌主要分布及构成比 833例送检样本中，阳性479例，检出率为57.5%。共检出病原菌496株：G-杆菌419株，占84.5%；真菌43株，占8.7%；G+球菌34株，占6.8%。主要病原菌分布：铜绿假单胞菌（104株，占21%），肺炎克雷伯菌（102株，占20.5%），大肠埃希菌（61株，占12.3%），鲍氏不动杆菌（60株，占12.1%），嗜麦芽寡养食单胞菌（53株，占10.7%），洋葱伯克霍尔德菌（33株，占6.7%），真菌（43株，占8.7%），金黄色葡萄球菌（26株，占5.2%），其它（14株，占2.8%）。

2.2G-杆菌中ESBLs检出率 大肠埃希菌52.5%（32/61），肺炎克雷伯菌32.4%（33/102），铜绿假单胞菌20.2%（21/104），鲍氏不动杆菌11.7%（7/60）。

2.3G-杆菌耐药率 G-杆菌对复方氨苄西林耐药率高。哌拉西林仅对铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌有较好的抑菌作用，但其酶复合制剂有较好的广谱抗菌作用；同时哌拉西林-他唑巴坦要优于替卡西林-克拉维酸（P＜0.05）。氨基糖甙类（妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星）对铜绿假单胞菌有较好抑菌作用，对洋葱伯克霍尔德菌无效，对其余G-杆菌效果差异有显著性（P＜0.01）。3代头胞菌素+酶复合制剂比单独3代头胞菌素耐药率低，差异显著（P＜0.01）。除大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南100%敏感，其余菌株均有不同程度耐药。洋葱伯克霍尔德菌与其它G-杆菌的耐药率差异显著（P＜0.01），对氨基糖甙类100%耐药，对亚胺培南耐药率高，但对哌拉西林-他唑巴坦、3代头胞菌素、复方磺胺甲恶唑等有较高的敏感性。各细菌的耐药率见表1。

表1　细菌耐药率（%）

3　讨论

本文对分离的496株病原菌分析表明，G-杆菌在ICU感染病原菌中占绝对优势，其中非发酵菌属占50.5%，肠杆菌科占32.8%，并以铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主要病原菌。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的ESBLs检出率分别为52.5%和32.4%。药敏试验结果表明，复方氨苄西林对非发酵菌基本无效，这与近几年该药的广泛使用和ICU患者长期接触抗菌素相关，哌拉西林-他唑巴坦细菌耐药率要优于替卡西林-克拉维酸。氨基糖甙类对铜绿假单胞菌有较好抗菌作用，但对洋葱伯克霍尔德菌无效。原因为氨基糖甙类作用于细菌核糖体的30S亚单位，抑制细菌合成蛋白质，其最突出的优点是对许多肠道G-杆菌所产生的氨基糖苷类钝化酶稳定，不会为此类酶钝化而失去抗菌活性［4］。3代头胞菌素加酶复合制剂比单独3代头胞菌素耐药率低。亚胺培南耐药率有逐年增高的趋势［5，6］。洋葱伯克霍尔德菌与其它G-杆菌的耐药率差异显著，对氨基糖甙类100%耐药，对亚胺培南耐药率高，但对哌拉西林-他唑巴坦、3代头胞菌素、复方磺胺甲恶唑等有较高的敏感性。头胞哌酮-舒巴坦的体外试验耐药率低，可作为ICU的首选抗菌药物和耐碳青霉烯类细菌的替代治疗，但实际临床疗效需进一步研究探讨。

1 Peleg A Y,Hooper D C. Hospital-acquired infections due to gramnegative bacteria .N Engl J Med,2010,362（19）：1804～1813.

2 叶任高,陆再英,主编.内科学.第6版.人民卫生出版社,2004.15～34.

3 周庭银,主编.临床微生物学诊断与图解.第2版.上海科学技术出版社,2007.33～39.

4 陈茶,黄彬,蓝锴,等.铜绿假单胞菌“泛耐药株”耐药相关基因研究.中国抗菌药物杂志,2009,34（2）：111～113.

5 胡付品,朱德妹,汪复,等.2011年中国CHINET细菌耐药性监测.中国感染与化疗杂志,2012,12（5）：321～329.

6 贾坤如,胡龙华,胡晓彦,等.革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率的变迁.中华医院感染学杂志,2008,18（1）：92～94.

321400 浙江省缙云县人民医院