不同炮制工艺对制首乌外观性状及内在质量的影响△

罗春丽，黄明进，李金玲，刘红昌，王华磊，陆翔恩，赵致﹡

(1.贵州大学，贵州 贵阳 550025；2.贵州省中药材繁育与种植工程实验室，贵州 贵阳 550025)

·中药工业·

不同炮制工艺对制首乌外观性状及内在质量的影响△

罗春丽1，2，黄明进1，2，李金玲1，2，刘红昌1，2，王华磊1，2，陆翔恩1，赵致1，2﹡

(1.贵州大学，贵州 贵阳 550025；2.贵州省中药材繁育与种植工程实验室，贵州 贵阳 550025)

目的：以鲜品何首乌为研究对象，确定合理制首乌炮制加工工艺参数，为制定制首乌炮制加工标准操作规程提供试验依据。方法：对比不同前处理、不同蒸制时间制首乌外观性状及内在质量变化情况。结果：采用鲜品直接干燥后用黑豆汁拌匀，炖制制首乌的时间应为44～52 h；鲜品蒸制干燥后再用黑豆汁拌匀，炖制制首乌则需至少炖制48 h以上，这样才能保证游离蒽醌类成分含量符合要求并相对稳定。结论：为更加合理地优选制首乌工艺并最大限度发挥药效，以二苯乙烯苷及蒽醌类成分的含量来控制制首乌的质量有待商榷，是否增加磷脂类成分和多糖的含量作为制首乌的质量控制检测指标有待进一步研究完善。

制首乌；鲜品；蒸制时间；薄层色谱；含量测定

何首乌为常用中药，为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根。其生用可解毒、消痈、润肠通便；蒸制后，与生首乌相比其性味、功能、主治均发生较大变化[1]。《全国中药炮制规范》[2]和《中华人民共和国药典》2010版[3]对何首乌炮制时间均未做出明确规定，使得制首乌质量稳定性得不到保证。更有甚者，采用加入色素的方式来制备出符合外观性状要求的制首乌，而其内在质量却与中华人民共和国药典标准相差甚远。目前制首乌炮制加工最适宜时间无法确定，一些研究也只是针对黑豆汁清蒸法炮制时间做出试验[4]，目前黑豆汁炖制制首乌时间还未有一个明确的结果。同时鲜何首乌不同前处理方法所测得的指标含量差异也很大[5]。经过一些学者对制首乌黑豆汁制法的研究，得出黑豆汁炖制方法较其他方法所得出的指标含量较高，且优于中华人民共和国药典标准[6-7]。为此，笔者采用两年生何首乌药材[8]，以鲜药材入手，对不同炮制加工方法进行对比研究，在不同时间段考察制首乌外观性状及内在质量变化情况，以期确定合理制首乌炮制加工工艺参数，为制定制首乌炮制加工标准操作规程提供试验依据，为进一步规范制何首乌饮片加工工艺及质量控制方法提供参考。

1 材料

1.1 药材

何首乌为贵州省都匀市王司镇何首乌种植基地大田种植2年生何首乌鲜药[4]，由贵州大学中药材研究所王华磊教授鉴定为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根；黑豆由贵州大学中药材研究所王华磊教授鉴定为豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr.的黑色种子。

1.2 试剂药品

何首乌对照药材、大黄素、大黄素甲醚、二苯乙烯苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号分别为120934-201009，110756-200110，110758-20101，110844-201109)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为纯化水；稀盐酸、硝酸银溶液、三氯甲烷、乙醇为分析纯。

1.3 仪器

CAMAG薄层色谱扫描仪(安捷伦科技有限公司)；Agilent1200高效液相色谱仪；TP-213电子天平(丹佛仪器北京有限公司)；HZT-A500电子天平(福州华志科学仪器有限公司)；HH-8数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)；101-4型电热鼓风干燥箱(北京科伟永兴仪器有限公司)；SX-12-10型箱式电阻炉控制箱(天津市泰斯特有限公司)；KQ-800KDE型超声波清洗机(昆山市超声波仪器有限公司)。

2 方法

2.1 黑豆汁制备方法及用量

取黑豆2 kg，加12倍水浸泡12 h，煮制4 h，得滤液约3 kg。豆渣加水5 kg，煎煮3 h，得滤液约2 kg，合并滤液，备用。

何首乌以干药材计，100 kg药材用黑豆10 kg(约相当于黑豆汁25 kg)。

2.2 制首乌工艺条件

2.2.1 取何首乌鲜药材洗净，控干水分，切7～9 mm块，称重，置烘箱45 ℃左右烘至全干，取出，用黑豆汁拌匀，置非铁质容器内，密闭，坐水锅中隔水炖制64 h。从炖制12 h开始，每隔4 h取样一次，取出，干燥备用。

2.2.2取何首乌鲜药材洗净，控干水分，切7～9 mm块，称重，隔水蒸12 h，取出，45 ℃左右烘至全干，取出，用黑豆汁拌匀，置非铁质容器内，密闭，坐水锅隔水炖制64 h。从炖制12 h开始，每隔4 h取样一次，取出，干燥备用。

以上处理样品均为同批药材，制备好后，按2.3项下方法进行质量检测，优选制首乌的制备条件及工艺参数。

2.3 制首乌饮片质量检测

2.3.1 水分测定 取上述处理制首乌饮片分别粉碎，过二号筛，按《中华人民共和国药典》2010版一部水分测定法项下烘干法(附录Ⅸ H第一法)测定。

2.3.2 总灰分含量测定 按《中华人民共和国药典》2010版一部灰分测定法项下总灰分测定法(附录Ⅸ K)测定。

2.3.3 浸出物的含量测定 按《中华人民共和国药典》2010版一部(附录Ⅹ A)测定。

2.3.4 薄层检查 按《中华人民共和国药典》2010版一部薄层色谱法(附录Ⅵ B)测定。

2.3.5 制首乌中二苯乙烯苷及蒽醌类成分的含量测定对照品、供试品溶液的制备及测定按《中华人民共和国药典》2010版一部制首乌项下及高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

3 结果

3.1 不同炖制时间制首乌外观性状对比

以上处理样品均为同批药材，制备好后，按《中华人民共和国药典》2010版何首乌项下测定方法检测。不同炖制时间制首乌外观性状对比见图1。

从外观性状来看，黑豆汁炖制鲜首乌干燥品，若要达到中华人民共和国药典要求，需蒸制40 h以上；而黑豆汁炖制鲜首乌蒸制品则在12 h左右即可达到性状要求。不同处理及炖制时间制首乌的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物等测定均优于《中华人民共和国药典》标准。

注：A.黑豆汁炖制鲜首乌干燥品；B.黑豆汁炖制鲜首乌蒸制品。图1 不同炖制时间制首乌外观性状

3.2 不同炖制时间制首乌薄层色谱

薄层色谱显示，不同处理制首乌的显色斑点明显较何首乌对照药材及同批何首乌药材生品少，其中炖制48 h后，制首乌中均显示出现一明显的绿色斑点，提示何首乌经不同炮制处理后，内在质量发生变化。见图2。

注：A.黑豆汁炖制鲜首乌干燥品0～48 h；B.黑豆汁炖制鲜首乌蒸制品0～48 h；C.黑豆汁炖制鲜首乌干燥品、黑豆汁炖制鲜首乌蒸制品48～64 h；3～7.黑豆汁炖制鲜首乌干燥品；8～12.黑豆汁炖制鲜首乌蒸制品。图2 不同前处理何首乌炖制0～64 h薄层色谱对比

由图2及薄层色谱显示，前处理为鲜何首乌直接干燥后与黑豆汁拌匀，炖制品中不同炖制时间制首乌中大黄素、大黄素甲醚含量均明显优于何首乌生品及对照药材，且随着炖制时间的延长，颜色呈现加深的趋势，炖制32 h后有一绿色斑点显色较明显；前处理为鲜何首乌蒸制12 h后干燥，再与黑豆汁拌匀，炖制品中大黄素、大黄素甲醚显色斑点颜色相对较浅，随着炖制时间的延长，颜色呈现逐渐加深的趋势，炖制16、36、44、48 h绿色斑点显色明显，尤其在48 h炖制品中大黄素、大黄素甲醚色班明显加深，提示该成分含量明显增加，48 h后颜色变浅，提示此成分在先蒸制后拌黑豆汁炖制48 h达峰值。

3.3 二苯乙烯苷及游离蒽醌类成分含量测定

含量测定结果见表1。

结果显示，不同前处理何首乌二苯乙烯苷含量随着炖制时间的延长均呈现逐渐下降的趋势。不同之处在于，前处理采用先蒸制后干燥，在炖制52 h后，二苯乙烯苷含量有所回升，且相对稳定；而前处理采取直接烘干，在炖制52 h时含量升高，之后呈下降趋势。就整个变化过程来看，先蒸后干燥处理，不同炖制时间二苯乙烯苷含量均高于直接干燥处理的。

表1 不同前处理何首乌不同炖制时间指标成分含量测定

不同前处理何首乌游离蒽醌类成分含量变化随着炖制时间的延长均呈现逐渐上升的趋势。就整个变化过程来看，直接干燥处理的不同炖制时间游离蒽醌类成分含量明显高于先蒸后干燥处理的。见图3。

注：A.二苯乙烯苷随时间变化趋势；B.游离蒽醌含量随时间变化趋势。图3 不同前处理何首乌不同炖制时间指标性成分含量变化趋势

4 结论

定性研究结果显示，鲜何首乌直接干燥后与黑豆汁拌匀，炖制品由12 h的黄棕色逐渐变为56 h的黑色。鲜首乌蒸制后干燥再与黑豆汁拌匀，炖制品由12 h的黑褐色至56 h的乌黑发亮。从外观性状来看，后者明显优于前者；而薄层色谱就其游离蒽醌类成分及二苯乙烯苷的显色斑点来看，则是前者优于后者。

含量测定结果显示，就整个蒸制时间变化范围来看，先蒸后干燥处理，不同炖制时间二苯乙烯苷含量均高于直接干燥处理的；而游离蒽醌类成分含量则是直接干燥处理明显高于先蒸后干燥处理的。

直接干燥后用黑豆汁拌匀，炖制制首乌要符合《中华人民共和国药典》2010版及传统对制首乌的外观要求则至少需炖制44 h以上。要达到《中华人民共和国药典》2010版对制首乌指标性成分含量要求，则需炖制16～52 h才能保证二苯乙烯苷及游离蒽醌类成分含量相对稳定。故以《中华人民共和国药典》2010版为依据，采用直接干燥后用黑豆汁拌匀炖制制首乌，炖制时间应为44～52 h。

5 讨论

2.2.1方法为《中华人民共和国药典》2010版收载方法，以《中华人民共和国药典》2010版为依据，采用直接干燥后用黑豆汁拌匀炖制制首乌，炖制时间应为44～52 h。2.2.2方法采用先蒸制干燥后再用黑豆汁拌匀，炖制制首乌12 h以上的便能符合《中华人民共和国药典》2010版及传统对制首乌的外观要求，而要达到对制首乌指标性成分含量要求，则需至少炖制48 h以上，才能保证游离蒽醌类成分含量相对稳定。

何首乌生品有解毒、消痈、截疟、润肠通便的功能；制首乌主要功能为补肝肾、益精血、乌须发、强筋，用于血虚萎黄、眩晕耳鸣、须发早白、腰膝酸软、肢体麻木、崩漏带下、久疟体虚、高血脂症。仅以二苯乙烯苷及游离蒽醌类成分作为制首乌的质量检测指标，难以解释制首乌与生首乌相比其功能、主治均发生的较大变化。功能、主治均存在明显差异，则提示其物质基础存在明显差异。因而笔者认为，用二苯乙烯苷及游离蒽醌类成分的含量来控制制首乌的质量有待商榷，应选择与药效相关的有效成分而并非指标性成分含量来控制制首乌质量。为更加合理地优选制首乌工艺并最大限度发挥药效，是否增加测定磷脂类成分和多糖的含量作为制首乌的质量控制检测指标有待进一步研究完善。

[1] 王孝涛.历代中药炮制法汇典：现代部分[M].北京：人民卫生出版社，1966.

[2] 中华人民共和国卫生部药政管理局.全国中药炮制规范[M].北京：人民卫生出版社，1988.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010.

[4] 张英华，胡馨，王平，等.何首乌炮制工艺的研究[J].中成药，2005，27(8)：916-919.

[5] 刘振丽，宋志前，李淑莉，等.何首乌净选加工、切制和干燥方法对化学成分的影响[J].中草药，2004，35(4)：404-406.

[6] 陈庆堂，卓丽红，徐文，等.何首乌炮制过程中5种化学成分的含量变化[J].中国实验方剂学杂志，2012，18(5)：66-71.

[7] 马长华，王金星.何首乌炮制前后二苯乙烯苷含量的比较[J].中药材，1995，18(7)：350.

[8] 罗春丽，陆翔恩，赵致，等.综合评分法优选何首乌合理采收期[J].贵州农业科学，2013，41(9)：66-70.

EffectsofdifferentProcessingTechnologyonPreparedRadixPolygoniMultifloriAppearanceandQuality

LUOChunli1，2，HUANGMingjin1，2，LIJinling1，2，LIUHongchang1，2，WANGHualei1，2，LUXiang’en1，ZHAOZhi1，2﹡

(1.GuizhouUniversity，Guiyang，Guizhou550025，China；2.GuizhouLaboratoryforBreedingandPlantingEngineeringofTraditionnalChineseMedicinalMaterials，Guiyang，Guizhou550025，China)

Objective：With fresh products ofPolygonummultiflorumas a research object，the reasonable processing parameters of Prepared Radix Polygoni Multiflori were determined to provide the experimental basis for the preparation of custom Shouwu processing standard operating procedures.Methods：The changes of Prepared Radix Polygoni Multiflori appearance and quality were compared by different treatment and steamed time..Results：The optimal stewing time for fresh directly drying drug mixed with black bean was 44-52 hours.For drug that freshly steamed then dried the stewing time was at least 48 hours.in order to ensure the content of anthraquinones to meet the requirements and stay relatively stable.Conclusion：It is questionable that only the content of two stilbene glucoside and anthraquinones in Radix Polygoni Multiflori were select to control the quality，considering more reasonable processing techonogy for drug efficacy.Phospholipid and polysaccharide may be added as the quality control of Prepared Radix Polygoni Multiflori.

Prepared Radix Polygoni Multiflori；fresh product；steaming time；TLC；content etermination

2014-12-31)

国家科技支撑计划课题(2009BAI74B01)；黔科合重大专项字[(2008)6022]；黔发改高技[2009]2805；黔科合人才团队[2010]4006；黔科合计Z字[2010]4015；黔人领发[2013]15号

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赵致，教授，研究方向：药用植物生产理论及技术研究；E-mail：zzhao@gzu.edu.cn

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.10.018