氯化钠浓度对美洲鲥鱼精子活力的影响

练青平++宓国强++汪亚平++胡廷尖++李倩

摘要 观察了不同氯化钠浓度对美洲鲥鱼精子活力的影响，结果表明：氯化钠浓度为0～0.8%时，精子快速运动时间无显著差异。氯化钠浓度为0.9%（生理盐水）时，精子运动时间和寿命最长。氯化钠浓度为1.0%时，精子活力受到抑制，运动能力和寿命下降。氯化钠浓度为1.4%～4.2%时，精子呈不活动状态，并失去运动能力。

关键词 美洲鲥鱼；氯化钠浓度；精子活力

中图分类号 S917 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）12-0256-02

Effects of Different NaCl Concentrations on Sperm Motility of Cultured Alosa sapidissima

LIAN Qing-ping 1 MI Guo-qiang 1 * WANG Ya-ping 2 HU Ting-jian 1 LI Qian 1

（1 Agriculture Ministry Key Laboratory of Healthy Freshwater Aquaculture，Key Laboratory of Freshwater Aquatic Animal Genetic and Breeding of Zhejiang Province，Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries，Huzhou Zhejiang 313001； 2 Chunan Thousands of Fish Cage Farming Product Specialized Cooperative Society）

Abstract This study was designed to observe the impacts of some factors on the mobility of Alosa sapidissima in different NaCl concentrations. The results showed that there were no differences of the sperm to move swiftly in the NaCl concentration of 0～0.8% range. It was better for the sperm to move swiftly and had a longer life expectancy when the NaCl concentration was 0.9%. The sperm motility would be inhibited when the NaCl concentration was 1.0%，with a decline in capacity and life expectancy. There was no athletic ability of sperm in the NaCl concentration of 1.4%～4.2% range.

Key words Alosa sapidissima；NaCl concentration；sperm activity

美洲鲥鱼（Alosa sapidissima），又名美国鲥鱼、美洲西鲱，以肉质细嫩、丰腴肥美著称[1]。我国从美国引进美洲鲥鱼受精卵进行孵化和种苗培育，并成功开展成鱼的池塘、网箱和水泥池集约化养殖等方面的研究[2-13]，但关于该鱼精子活力和持续时间上的研究尚未见报道。本文研究了不同氯化钠浓度对美洲鲥鱼精子活力的影响，对其精子运动时间和寿命进行了初步观察，探讨了美洲鲥鱼精子的生理特性，旨在为美洲鲥鱼人工繁殖生产提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验鱼的来源

2014年5月取自淳安千渔网箱养殖专业合作社的网箱养殖基地，选取3龄的成熟雄性美洲鲥，要求个体外表无伤且轻压腹部有精液自动流出的成熟雄鱼。

1.2 溶液的配制

取氯化钠（NaCl）分析纯，按0%（去离子水）、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、0.9%（生理盐水）、1.0%、1.4%、1.8%、2.2%、2.6%、3.0%、3.4%、3.8%、4.2%用去离子水配成不同浓度的溶液。

1.3 精液采集

采集精液时先用干毛巾擦干鱼体生殖孔，轻压腹部，用5 mL注射器吸取精液，精液要求无血、无水、无尿等污染，呈正常乳白色。

1.4 精子观察

将干净载玻片置于10×40倍显微镜下，用移液器吸取一滴氯化钠溶液至载玻片上，调节显微镜，以解剖针尖挑取少许精液与载玻片上的氯化钠溶液混合，同时开始计时并观察精子的运动情况。

1.5 精子运动阶段的划分

参考苏德学等[14]的方法，其运动状态可分为快速运动、中速运动、慢速运动和颤动4个连续阶段，精子的寿命即为4个阶段时间的总和。各个阶段的划分标准如下：①快速运动：运动速度快，看不清运动轨迹；②中速运动：运动速度较慢，能看清运动轨迹；③慢速运动：精子缓慢地从一处游向另一处；④颤动：精子只在原地摇动，直至停止摇动。视野中70%以上的精子从快速运动转入中速运动，即认为精子快速运动时间结束，95%以上的精子停止颤动，即认为精子寿命终止。由于精子仅在快速运动时具有受精能力，因此该试验只计精子快速运动时间和精子寿命。每个氯化钠溶液浓度重复3次试验，结果取平均值。

2 结果与分析

2.1 氯化钠溶液浓度对美洲鲥鱼精子活力的影响

由表1可知，美洲鲥鱼精子在不同浓度氯化钠溶液（0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、0.9%、1.0%、1.4%）中快速运动平均时间分别为26、21、21、24、25、28、18、0 s；平均寿命为41、42、41、47、67、74、28、0 s。可见，在纯淡水中，美洲鲥精子快速运动时间为26 s，当氯化钠浓度为0～0.8%时，精子快速运动时间无显著差异。当氯化钠浓度为0.8%时，精子寿命为67 s。当氯化钠浓度为0.9%（生理盐水）时，精子快速运动时间、寿命分别为28、74 s。当氯化钠浓度为1.0%时，精子快速运动时间为18 s，寿命为28 s，精子运动活力和寿命下降。endprint

由图1可知，氯化钠浓度为0.9%时，精子快速运动时间和寿命最长，由此推测，该浓度可能最接近美洲鲥鱼精子本身的渗透压浓度。

2.2 美洲鲥鱼精子的抑制

美洲鲥鱼精子在1.4%～4.2%氯化钠溶液中受到抑制，精子呈不活动状态，但是用吸管继续向溶液中加一滴去离子水后精子可被激活。这是因为去离子水稀释了原来的氯化钠溶液，即降低了溶液的渗透压，使原先处于抑制状态的精子被激活。

3 讨论

（1）不同鱼类精子激活的最适盐度与其生态习性密切相关。美洲鲥鱼精子在0.9%（生理盐水）氯化钠溶液中，快速运动时间和寿命最长，这与其自然产卵水域的盐度相适应，因为美洲鲥鱼为洄游性鱼类，成鱼在海洋中育肥，在其性腺发育成熟后，就向通海的淡水或者低盐度的河流生殖洄游，并在淡水或者低盐度的河流中产卵授精。不同种群鱼类的精子对于氯化钠溶液浓度适应性也不同，如魏开金等[15]对中国鲥鱼研究报道在0.5%氯化钠溶液中鲥鱼精子快速运动时间和寿命最长，在0.9%～3.4%氯化钠溶液时鲥鱼精子处于抑制状态，半刺光唇鱼精子在0.7%氯化钠溶液中的平均寿命最长[16]，宽口光唇鱼精子在氯化钠溶液为0.51%时寿命最长[17]。

（2）鱼类精子保存液要给精子提供一个良好的生存环境，主要防止精子被激活，而美洲鲥鱼精子在1.4%～4.2%的氯化钠溶液中受到抑制，精子呈不活动状态，故1.4%～4.2%的氯化钠溶液可以作为美洲鲥鱼精子临时保存液。进行美洲鲥鱼人工授精时，可考虑0.9%（生理盐水）氯化钠溶液作为激活液，以延长精子激烈运动状态时间，提高受精率。

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