针药复合麻醉对犬应激激素及阿片肽调节的作用

何磊磊等

摘要：为探讨小动物针药复合麻醉调节应激反应的机理，设计了犬腹部麻醉合适的配穴、针刺参数和麻醉药用量，在此基础上将25只犬随机均分为5组，即舒泰组、1/3舒泰复合针刺麻醉组、1/2舒泰复合针刺麻醉组、2/3舒泰复合针刺麻醉组和针刺组，对其进行腹部切皮术，并在试验过程中的7个时间点采血离心取血浆做酶联免疫吸附（ELISA）试验，测定各时间点应激激素—皮质醇和阿片肽（OP）的含量。结果显示，各组虽然麻醉方式不同，但均能达到麻醉的效果。其中针刺组的OP浓度在15～30 min施加针刺时显著高于其他各组，在此时间点，其皮质醇浓度明显降低；而针药复合麻醉各组OP浓度在15～30 min时均有不同程度的升高，皮质醇浓度也在OP浓度达到高峰时有不同程度的降低；舒泰组的OP浓度在整个试验过程中均无明显变化，皮质醇浓度在整个试验过程中偏高。说明针刺麻醉可以使犬的OP浓度升高，降低皮质醇的分泌，有效抑制应激反应；针药复合麻醉效果良好，使皮质醇浓度较为稳定，减小了应激。表明可通过调节OP浓度影响皮质醇的产生来实现机体应激反应的调节。

关键词：针药复合麻醉；应激；应激激素；犬

中图分类号：R246.2；S857.12+4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）12-2964-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.12.040

Regulating Effects of Combined Acupuncture and Drug Anesthesia on Stress Hormones and Opioid Peptide in Dogs

HE Lei-lei，QIAN Peng，ZHANG Shi-qi，JIANG Chun-chi，PENG Yu-lu，LIU Zi-dan，ZHANG Hai-yan，WANG Jin-hua

（Agronomy and Animal Science Department， Hainan University， Haikou 570228， China）

Abstract：For investigating the regulation mechanism of of combined acupuncture and medicine anesthesia on small animal， based on the designs of appropriate abdominal anesthesial acupoints，acupunctural parameter and the dosage of drugs，25 dogs were randomly divided into 5 groups such as simple zoletil group，combined acupuncture and 1/3 zoletil group，combined acupuncture and 1/2 zoletil group， combined acupuncture and 1/2 zoletil group， combined acupuncture and 2/3 zoletil group and acupuncture group. Then they were carried out abdominal incision surgery， and collected plasma samples at 7 time points in experiment for detection of cortisol and opioid peptide （OP） by enzyme linked immune sorbent assay （ELISA）. The results showed that all animals in five groups were anesthetized. The OP concentration in simple acupuncture group between 15 to 30 min when applying acupuncture iwas significantly higher than other groups between 15 to 30 min when applying acupuncture，.At this time point in time， its cortisol decreased significantly；.The OP concentration of the needlecombined acupuncture and medicine compound anesthesia groups all increased with different degree within 15-30 min time all have different degree of increase， and the concentration of cortisol in these groups also decreased with varyingdeferent degrees of lowering when in the peak of OP concentration.The OP concentrations ofin the simple zoletil group had no obvious change induring the process of the whole experiment，and cortisol concentration iwas significantly higher than other groups. ThatIt indicated that acupuncture anesthesia canould makeincrease dog OP higher concentration， reduce the secretion of cortisol， and effectively restrain stress reaction，. The combined acupuncture and drug needle medicine compound anesthesia effect is also had good effect， and could reduce the stress with that relatively stable cortisol concentration. iswere relatively stable，reduced the stress. That can be It suggested that the body′s stress response could be regulated through affect cortisol production by adjusted through the OP concentrations affect cortisol production to implement the regulation of the body′s stress response.

Key words： combined acupuncture and drugs anesthesia； stress； stress hormone； dogs

随着人们的物质生活水平的不断提高，宠物作为家庭伴侣，其健康也不断得到人们的重视，然而在很多临床手术中，常因为麻醉药物过敏等副作用的存在降低了手术的安全性[1]。而针药复合麻醉既可以减少麻醉药物的用量，还可以减少应激反应[2]。有研究表明针刺穴位可以促进脑和脊髓释放出5-羟色胺、内源性阿片肽（OP）物质，从而揭示了针刺镇痛的原理[3]，同时针刺也可以通过调控体内应激物质（促肾上腺皮质激素、皮质酮和儿茶酚胺）恢复和维持机体的生理稳定等[4]。有学者尝试在针药复合麻醉中给予纳络酮阻断阿片受体，发现电针刺激对应激反应的抑制作用减弱，从而提示电针主要通过内源性OP发挥对应激反应的调节作用[5]。目前，针药复合麻醉在宠物临床中基本无使用，因而探究其在犬镇痛过程中的作用机理对于宠物行业的发展具有重要意义，探究舒泰用量对针刺效果的影响对探究针药复合麻醉在宠物临床上的应用也意义重大。本试验通过测定中国数量最多的中华田园犬行腹部切皮术时使用不同的舒泰麻醉用量复合针刺麻醉时体内OP与皮质醇浓度来探究针刺的作用机理。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物与分组 25只健康中华田园犬，每天两餐定时人工饲养。试验犬随机均分为5组，即舒泰组（给予正常用量舒泰进行麻醉），1/3针药组（1/3正常用量舒泰复合针刺进行麻醉），1/2针药组（1/2正常用量舒泰复合针刺进行麻醉），2/3针药组（2/3正常用量舒泰复合针刺进行麻醉），针刺组（单纯使用针刺进行麻醉）。

1.1.2 试验仪器 采血针（自带采血导管）、真空采血管、Centrifuge5418型离心机、Mode680型酶标仪、Smy-10a华佗牌电针仪及其配件。

1.1.3 药品及试剂 阿托品、舒泰、蒸馏水、犬阿片肽（OP）酶联免疫分析试剂盒，犬皮质醇（Cortisol）酶联免疫分析试剂盒，2.5%柠檬酸钠。

1.2 最佳试验参数

试验结果所示，最佳配穴是百会穴配关元俞穴，频率是40 Hz，时间是30 min。

1.3 针药复合麻醉试验方法

1.3.1 犬处理方法 试验犬术前禁食12 h使其空腹，给药前称重，犬两前肢桡内侧剃毛。舒泰50静脉注射正常用量为0.1 mL/kg，阿托品用量为0.2 mL/kg，针刺组犬不给麻醉药。3～5 min后犬基本保持安静，此时以百会穴配关元俞穴加以电针刺激，电针刺激频率为40 Hz，时长30 min。待稳定后（约给药后10 min），用手术刀在腹中线划约1.5 cm左右的表皮，试验犬基本无反应。分别在给舒泰时0 min、给舒泰后的15、30、45、75、105、135 min这7个时间点对试验犬于前肢桡内侧静脉采血1.5 mL于真空采血管中并编号，静置备用。

1.3.2 血样处理 将真空采血管放置于离心机中，以1 500 r/min离心15 min，收集上清液（即血浆）0.8 mL于装有适量抗凝剂的EP管中，充分混匀，静置于EP管架上。

1.3.3 酶联免疫吸附试验 按ELISA试剂盒（上海邦奕商贸有限公司）说明书来进行ELISA试验，测定各个时间点血浆中的OP与皮质醇浓度。

1.4 数据统计处理

试验所得数据使用SAS system 8.1 进行统计分析，试验数据以平均数±标准差表示，组间、组内再分别做单因子变量显著性分析。

2 结果与分析

2.1 试验各组OP浓度变化

由图1可见，在给药后15 min（即加电针刺激后）针刺组的OP浓度开始显著升高，并在给药后30min（即电针刺激结束时）其OP浓度升至顶峰，而在给药后45～105 min，其OP浓度又开始显著地持续降低；整个试验过程中针药组与舒泰组在不同时间点的OP浓度变化均无显著性差异（P>0.05），且变化趋势基本一致。

2.2 试验各组皮质醇浓度变化

由图2可见，尽管试验各组的皮质醇浓度初始值各不相同，但其之间并无显著性差异；在整个试验过程中，针刺组、舒泰组以及2/3针药组皮质醇浓度水平均无明显差异，其中2/3针药组的皮质醇浓度最为稳定；而1/2针药组在15～30 min时间段内皮质醇浓度有显著上升，在30 min后又下降趋于稳定；1/3针药组则在30～75 min时间段内皮质醇浓度明显上升，随后下降并趋于稳定。

2.3 试验各组OP浓度与皮质醇浓度变化关系

2.3.1 舒泰组皮质醇和OP的浓度变化 由图3可知，给予舒泰正常麻醉用量的犬体内的OP浓度在整个试验过程中无明显变化，说明舒泰不能刺激机体产生内源性OP。在舒泰麻醉过程中，犬表现相对稳定，但整个过程中皮质醇浓度水平一直偏高，说明舒泰在整个手术过程中只是起到了麻醉镇静的作用，对于机体的应激反应调节作用较小。

2.3.2 针刺组皮质醇和OP的浓度变化 由图4可知，给予犬百会穴配合关元俞穴的电针刺激后的皮质醇和OP的变化有明显规律。在15～30 min 时给予电针刺激，OP浓度上升，至30 min时达到高峰，之后停止电针刺激，OP浓度开始下降并逐渐恢复到较低水平；皮质醇浓度在OP浓度达到高峰时开始下降并在一般水平上下波动。整个试验过程中犬的状态不是很稳定，但是对犬腹部划皮，犬没有疼痛反应。

2.3.3 2/3针药组皮质醇和OP的浓度变化 由图5可知，给予舒泰正常麻醉用量的2/3剂量复合针刺麻醉的犬体内的OP浓度在整个试验过程中变化较小，无明显变化规律。皮质醇浓度也无明显变化规律。整个麻醉过程中，犬表现相对稳定。

2.3.4 1/2针药组皮质醇和OP的浓度变化 由图6可见，在整个试验过程中，1/2针药组的OP浓度在给药15～30 min电针刺激时明显升高，30 min时达到高峰，此后降低。而皮质醇的浓度在OP浓度达到最高峰时开始下降，并在45 min后又开始缓慢上升。

2.3.5 1/3针药组皮质醇和OP的浓度变化 由图7可知，在对犬进行舒泰正常麻醉用量的1/3剂量配合针刺麻醉的过程中，其OP浓度在给药后30～45 min有上升趋势，随后又下降至一般水平，在整个过程中无显著变化。而皮质醇浓度在给药后45～75 min呈明显上升趋势（其原因有待进一步分析），犬在试验过程中表现平稳。

3 讨论

尽管针刺麻醉的理论研究已日趋成熟，但其在宠物临床上的应用还比较少，本试验揭示了针刺麻醉对犬体内应激激素的调节作用机理，为针药复合麻醉在宠物临床上的应用提供参考。本试验所选穴位为百会穴配关元俞穴。百会穴位于督脉的通路上属会阳经，任督二脉是阴阳大纲，统辖十二经为“阳脉之海”。百会穴属会阳经，所以成为通经调理气血、舒通经络、安神镇静、协助诸穴的重要穴位。而关元俞穴位于后肢膀胱经，又叫“气穴”或“孔穴”，是动物经络脏腑之气，输经传于体表所在。两者配穴针刺有较好的“调气”、“治神”作用[6]。

本试验选用了2/3、1/2、1/3剂量的舒泰正常麻醉用量来复合针刺麻醉，并与单纯使用针刺麻醉和单纯使用正常剂量的舒泰麻醉作比较。5个组犬只在麻醉后行腹部切皮术时，犬均无疼痛反应，说明这5组麻醉均已达到了麻醉的效果。

在本试验中，犬的OP含量在舒泰组、1/3针药组，1/2针药组，2/3针药组中均未表现出显著性差异，而在针刺组中，OP含量在给药后30 min升至顶峰，随后降低到正常值，这说明针刺会促使OP含量升高。同时有研究表明手术过程中给予外源性OP类物质可以减少临床上的应激反应[7]。而本试验选用的麻醉剂舒泰为非OP类物质[8]，故舒泰的用量不会造成犬体内外源性OP的补充。而在针药复合麻醉过程中，各组OP的含量在15～30 min电针刺激时均有不同程度的提升，说明针药复合麻醉一定程度能降低手术过程中的应激反应。

犬在受环境变化、静脉注射、采血以及手术伤害刺激等应激因素影响时，交感-肾上腺髓质系统过度兴奋，体内的应激激素皮质醇水平会显著升高[9]。在本次试验中，单纯的药物麻醉会使皮质醇含量提升，而针刺麻醉和针药复合麻醉则能使皮质醇浓度较为稳定。1/3针药组在45～75 min时，皮质醇浓度突然显著升高，这可能与试验过程中犬突然受到外源性刺激有关。

4 小结

本试验结果表明，针刺麻醉过程中，OP浓度显著升高，皮质醇浓度在OP浓度达到最高峰时显著降低；而单纯的药物麻醉时，OP浓度无明显变化，皮质醇浓度偏高。针药复合麻醉能使OP浓度有一定程度的升高，在OP浓度达到高峰时，皮质醇浓度有所下降，说明针刺能刺激机体产生内源性OP。

参考文献：

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[2] 吴根诚，王彦青，曹小定.针药复合麻醉的回顾与思考[A].第九届全国针刺麻醉、针刺镇痛及针刺调整效应学术研讨会文集[C].北京：中国针灸学会针刺麻醉分会，2007.

[3] 秦必光，胡北喜，张兰英.中国近10年针刺复合麻醉临床研究概况[J].针刺研究，2003，28（4）：303-306.

[4] 吴根诚，陈正秋，秦必光.优化针药复合麻醉和镇痛的临床及机理研究[J].针刺研究，2001，26（3）：161-162.

[5] HAN S H，YOON S H，CHO Y W，et al.Inhibitory effects of electroacupuncture on stress responses evoked by toothpulp stimulation into rats[J].Physiol Behav，1999，66（2）：217.

[6] 马崇文.百会、关元俞组穴电针麻醉效果观察[J].云南畜牧兽医，1980（Z1）：53-59.

[7] 蒋殿宇，吕黄伟.针刺对全身麻醉后相关并发症的治疗和预防作用[J].辽宁中医药大学学报，2010，12（9）：139-141.

[8] PLUMB D C.Veterinary Drug Handbook[M].Iowa：Iowa Stateuniversity Press，1999.

[9] 徐 栋，方剑乔.针药复合麻醉降低手术应激反应的应用前景[J].针灸临床杂志，2010，26（4）：68-71.