食用油中脂肪酸的CGC法分析

周佳，陈芙蓉，张玉霞，宁欣，徐小平

（1.四川大学华西药学院，四川成都610041；2.四川省食品药品检验检测院，四川成都610041）

食用油中脂肪酸的CGC法分析

周佳1，2，陈芙蓉1，张玉霞1，宁欣1，徐小平1

（1.四川大学华西药学院，四川成都610041；2.四川省食品药品检验检测院，四川成都610041）

采用毛细管气相色谱法（CGC）分离鉴定食用清脉油中17种脂肪酸的组成：DB-23型（60m×0.25mm×0.15μm）毛细管气相色谱柱；氢火焰离子化检测器（FID，260℃）；分流/不分离进样器（250℃）；程序升温：起始温度为50℃，1min后以20℃/min升到175℃，再以3℃/min升到190℃，保持3min，最后以5℃/min升到230℃，保持2min。通过与对照品对比，清脉油中共分离鉴别出17种已知脂肪酸，其中不饱和脂肪酸的含量高达90.18%，饱和脂肪酸的含量仅有9.18%，不饱和脂肪酸主要有油酸、亚油酸、亚麻酸等；饱和脂肪酸主要有棕榈酸、硬脂酸等,其他脂肪酸的含量很少。不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例高达9.82:1。所建立的CGC法可适用于混有12种植物油的食用清脉油中脂肪酸检测。

清脉油；脂肪酸；毛细管气相色谱法

1 仪器与试剂

1.1 材料

清脉油（成都悟道科技有限公司提供），脂肪酸甲酯对照品（NU，Chekprep，Inc，M23-W）。

1.2 仪器

安捷伦6890N型气相色谱仪（美国安捷伦仪器公司）；CPA225D型电子天平（上海速展机电有限公司）。

1.3 试剂

异辛烷，氢氧化钾，甲醇，硫酸氢钠（皆购于天津科密欧化学试剂有限公司）。

2 实验方法

2.1 样品的甲酯化

称取样品油60mg至具塞试管中，加4mL异辛烷溶解样品，再加入200μL氢氧化钠甲醇溶液，盖上玻璃塞猛烈振摇30 s后静置至澄清。向溶液中加入约1 g硫酸氢钠，猛烈振摇，中和氢氧化钠。待沉淀后，将含有甲酯的上层溶液倒入进样瓶中，用于气相色谱分析；同样地，40种脂肪酸甲酯对照品用2mL异辛烷溶解，然后倒入进样瓶中，用于气相色谱分析。

2.2 色谱条件筛选

2.2.1 柱子选择

以固定液极性、分离度和分离时间为指标进行色谱柱的评价：试验分别筛选了1）DB-23柱（60m× 0.25mm×0.15μm）；2）SP-2560柱（100m×0.25mm× 0.2μm）；3）OV-624柱（30 m×0.53 mm×0.5μm）；4）FFAP柱（30m×0.53mm×1.0μm）[10]。结果表明，脂肪酸甲酯的专用柱DB-23和SP-2560型毛细管柱分离效率最好，但SP-2560型因柱较长，分析时间更长。而OV-624和FFAP柱极性偏大，对酯化后脂肪酸的分离不如前两根低极性色谱柱。所以最终选择DB-23型色谱柱作为分析脂肪酸的最佳色谱柱。

2.2.2 程序升温的选择

由于清脉油中的脂肪酸成分较多，极性大小不一，为能将所有成分都分离开来，选择程序升温法。实验中筛选5个条件：

1）起始100℃，保持5min，4℃/min升到240℃，保持15min；

2）起始50℃，保持1min，20℃/min升到175℃，再以3℃/min升到190℃，保持3min，以5℃/min升到230℃，保持2min；

3）起始温度为50℃，保持1min，以20℃/min升到175℃，再以4℃/min升到230℃，保持5min；

4）起始温度为50℃，保持2min，以20℃/min升到175℃，再以4℃/min升到230℃，保持5min；

5）起始温度为50℃，保持1min，以20℃/min升到175℃，再以3℃/min升到190℃，保持3min，最后再以4℃/min升到230℃，保持2min。

条件1）不仅分析时间较长（≥55min），且组分间的分离度也不理想；条件3）～5）的分离度不如条件2），所以，从分离时间和分离度综合考虑，选择了2）作为本实验的升温程序。

综上，确定本实验的色谱条件为：色谱柱为DB23型毛细管柱（60m×0.25mm×0.15μm），进样口温度为250℃，检测器为FID，温度为260℃，分流比为10∶1，进样量为1μL。柱温采用程序升温法：起始温度为50℃，保持1min，以20℃/min升到175℃，再以3℃/min升到190℃，保持3min，最后以5℃/min升到230℃，保持2min。色谱图如图1所示。

2.3 脂肪酸的鉴定

根据已有的40种脂肪酸甲酯对照品，本文采用直接对照品比较法对样品油中的脂肪酸组份进行鉴定，其中17种脂肪酸得到对应鉴定如表1所示。

图1 清脉油的气相色谱图

表1 清脉油中鉴别出的脂肪酸甲酯成分1）

3 回收率和精密度

分别取脂肪酸甲酯对照品适量，精密称定，加异辛烷溶解稀释成已知质量分数的混合脂肪酸甲酯对照品溶液。精密量取该对照品溶液1μL，注入气相色谱仪，记录峰面积，重复测定3次，由测得的各脂肪酸组份的质量分数计算回收率和精密度，结果见表2。

由表可知，脂肪酸甲酯对照品的回收率在95%～105%之间，精密度RSD＜0.5%。表明该实验方法可用于本文脂肪酸的分析。

4 质量分数测定

根据样品油中多达17种脂肪酸的特点，本文采用不加校正因子的面积归一化法计算各脂肪酸的质量分数。

取本品适量，照2.1项下方法制备样品供试品溶液，精密量取1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，以归一化法计算各脂肪酸组份的质量分数，结果见表3。

表2 清脉油中主要脂肪酸组分的回收率和精密度（n=3）

5 讨论

1）根据清脉油由12种植物油混合而成的特点，特别选用了弱极性的脂肪酸专用分离柱DB-23（60m×0.25mm×0.15μm）毛细管GC柱作为分析柱，对样品中复杂的脂肪酸组份进了较理想的分离。

2）由于采用面积归一化法进行含量测定，本文重点考察了方法的回收率和精密度。结果各脂肪酸组份的回收率为95%～102%，精密度为0.08%～0.45%，满足本品定量分析的要求。

3）由表1和表3结果显示，从清脉油中共鉴别出17种脂肪酸，其中，不饱和脂肪酸含量高达90.18%，包括棕榈一烯酸（0.02%）、十七碳一烯酸（0.04%）、油酸（19.52%）、亚油酸（24.03%）、δ-亚麻酸（0.18%）、亚麻酸（45.97%）、花生一烯酸（0.18%）、顺-11，14，17-二十碳三烯酸（0.04%）、芥酸（0.10%）、6-二十二碳五烯酸（0.07%）、15-顺-二十四碳一烯酸（0.03%）；饱和脂肪酸的含量为9.18%，包括豆蔻酸（0.03%）、棕榈酸（5.45%）、十七烷酸（0.06%）、硬脂酸（3.39%）、花生酸（0.14%）、山嵛酸（0.11%）。其中，多不饱和脂肪酸的含量高达70.29%。

表3 清脉油中脂肪酸组份的质量分数

6 结束语

本文所建立的CGC法能够较好地分离并鉴定出食用清脉油中最常见的17种脂肪酸，不饱和脂肪酸高达90%以上，且多烯不饱和脂肪酸也高达70.29%，有利于机体的健康和保健。

[1]张国治，韩宝丽，王伟玲，等.葡萄籽油中脂肪酸成分分析[J].粮食科技与经济，2011，36（1）：49-50.

[2]李玉芹，曾虹燕.生物柴油中脂肪酸甲酯成分的气相色谱法测定[J].海南大学学报：自然科学版，2005，23（4）：324-326.

[3]李宏涛.气相色谱法快速测定大豆油中脂肪酸含量[J].药物分析杂志，1995（6）：27-30.

[4]孙翔宇，高贵田，段爱莉，等.多不饱和脂肪酸的研究进展[J].食品工业科技，2012，33（7）：418-423.

[5]宿艳萍，曹志强，于锡刚，等.多不饱和脂肪酸的功效及来源[J].人参研究，2001，13（4）：7-9.

[6]王萍，张银波，江木兰.多不饱和脂肪酸的研究进展[J].中国油脂，2008，33（12）：42-46.

[7]余文三.多不饱和脂肪酸的研究概况[J].国外医学：卫生学分册，1998，25（16）.

[8]王静宇，伋莉，任梦影，等.南天竹籽油的理化性质及脂肪酸组成[J].中国油脂，2014（9）：26.

[9]蒋汉明，张凤珍，翟静，等.ω-3多不饱和脂肪酸与人类健康[J].预防医学论坛，2005，11（1）：65-69.

[10]张继，张燕，张洪斌，等.新疆5种蒿属植物的脂肪酸成分研究[J].西北师范大学学报：自然科学版，2004，40（4）：64-67.

Analysis of fatty acid in edible oil by CGC

ZHOU Jia1，2，CHEN Furong1，ZHANG Yuxia1，NING Xin1，XU Xiaoping1
（1.West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu 610041，China；2.The Food and Drug Testing Institute of Sichuan Province，Chengdu 610041，China）

To separate and identify the 17 fatty acids in Qing Mai Edible Oil by CGC.a DB-23 capillary column（60m×0.25mm×0.15μm）；flame ionization detector（FID，260℃）；a split/onseparation sample injector（250℃）；temperature programming：set the initial temperature at 50℃，increased to 175℃one min later at the rate of 20℃/min，continued to increase to 190℃at the rate of 3℃/min without changing for 3 min，and then up to 230℃at the rate of 5℃/min，maintained at this temperature for 2min.Seventeen fatty acids were identified in Qing Mai Edible Oil，of which the unsaturated fatty acids（UFA）take up 90.18%and the saturated fatty acids（SFA）amount to only 9.18%.The former are mainly composed of oleinic acid，linoleic acid，and linolenic acid，and the latter are primarily made up by palmitic acid and andstearic acid.There are also a small amount of other fatty acids contained in the oil.The ratio of UFA and SFA is 9.82∶1.CGC can be applied to examine the fatty acids in Qing Mai Edible Oil that is mixed with twelve types of vegetable oil.

Qing Mai edible oil；fatty acid；CGC

A文章编号：1674-5124（2015）08-0052-04

10.11857/j.issn.1674-5124.2015.08.012

0 引言

随着社会经济的发展和人民生活水平的不断提高，人们对食用油的营养与保健功能更加重视；特别是现在高血脂、高血压等心脑血管疾病高发，使得人们更加警惕油脂的摄入。因此，开发新的富含不饱和脂肪酸的食用油资源成为研究热点。有助于人体健康的不饱和脂肪酸、维生素、氨基酸等特殊生理活性物质对于营养保健食用油的组成具有十分重要的意义[1]。多不饱和脂肪酸（PUFA）对人体有着重要的生理功能，特别是ω-3系列[2-3]，是维持生物的必须物质。随着对PUFA研究的日益深入，它不仅能调节脂质代谢[4-6]，治疗和预防心脑血管疾病，而且还能促进生长发育[7-9]。为建立食用油中脂肪酸组成的检测方法，本研究拟采用毛细管气相色谱法（CGC）对清脉油中的脂肪酸进行分离，通过脂肪酸甲酯对照品进行对照鉴定，以归一化法评价不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的含量，分析清脉油中脂肪酸的分布规律和含量关系。

2014-11-28；

2015-01-17

周佳（1983-），女，重庆市人，主管药师，硕士，主要从事食品检验工作。