50%呋虫胺?吡蚜酮可湿性粉剂的高效液相色谱分析方法研究

顾爱国　潘虹　王莉

摘要[目的]建立呋虫胺·吡蚜酮制剂含量的高效液相色谱分析方法。[方法]以乙腈-水溶液作为流动相，采用Agilent XDB C18 柱和二极管阵列检测器同时测定有效成分呋虫胺和吡蚜酮的含量。[结果]呋虫胺和吡蚜酮在100～500 mg/L浓度范围内线性关系良好，相关系数（r）分别为0.999 8和0.999 6；标准偏差分别为0.045和0.063，相对标准偏差分别为0.11%和0.61%；平均回收率分别为99.79%和99.64%。[结论]试验建立的高效液相色谱方法操作简便，精密度与准确度完全符合分析检验要求，可同时快速测定呋虫胺和吡蚜酮含量。

关键词呋虫胺；吡蚜酮；高效液相色谱法

中图分类号S482.3文献标识码

A文章编号0517-6611（2015）07-094-02

呋虫胺·吡蚜酮可湿性粉剂是一种全新复配杀虫剂，广谱、高效、低毒、内吸活性强，持效期长、增效效果显著[1-2]；主要用于防治水稻稻飞虱等半翅目害虫，但有关呋虫胺·吡蚜酮复配制剂的高效液相色谱分析方法目前未见报道。为此，笔者以乙腈-水溶液为流动相，采用Agilent XDB C18柱和紫外检测器，建立了同时定量分析有效成分呋虫胺和吡蚜酮的液相色谱分析方法，旨在为相关部门监测呋虫胺·吡蚜酮制剂含量提供参考。

1材料与方法

1.1材料

Agilent 1200 高效液相色谱仪：具二极管阵列检测器和全自动进样器、色谱工作站；乙腈为色谱纯； Millipore 超纯水制备系统；呋虫胺标准品（纯度99.3%，国家农药质检中心）、吡蚜酮标准品（纯度99.5%，国家农药质检中心）；50%呋虫胺·吡蚜酮可湿性粉剂试样。

1.2色谱条件

Agilent XDB C18 不锈钢柱：250.0 mm×4.6 mm（i.d），检测波长250 nm，流动相为乙腈-水（10∶90，V/V），流速1.0 ml/min，进样量5 μl，柱温25 ℃。保留时间：呋虫胺8.70 min，吡蚜酮13.73 min。典型液相色谱分别见图1、图2。

图1呋虫胺·吡蚜酮标样液相色谱图谱

图2 呋虫胺·吡蚜酮可湿性粉剂液相色谱图谱

1.3分析步骤

1.3.1标样溶液的配制。

称取呋虫胺标样0.040 g和吡蚜酮标样0.070 g （精确至0.000 2 g） 置于50 ml容量瓶中，用甲醇稀释定容，超声波振荡5 min使标样溶解，冷却至室温，摇匀。吸取上述配制的标准溶液5 ml，置于25 ml容量瓶中，用甲醇定容，经0.45 μm微孔滤膜过滤后备用。

1.3.2试样溶液的配制。

称取含呋虫胺0.040 g和吡蚜酮0.070 g的试样（精确至0.000 2 g），置于50 ml容量瓶中，用甲醇稀释定容，超声波振荡5 min使试样溶解，冷却至室温，摇匀。吸取上述溶液5 ml，置于25 ml容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜过滤后备用。

1.3.3测定。在“1.2”色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针的响应值相对变化小于1.5%时，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.3.4计算。将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液中的呋虫胺（吡蚜酮）峰面积分别进行平均。试样中呋虫胺（吡蚜酮）的质量分数（Xi）按下式进行计算：

Xi=A2×m1×wA1×m2×100

式中，A1——标准溶液中呋虫胺（吡蚜酮）峰面积平均值；A2——试样溶液中呋虫胺（吡蚜酮）峰面积平均值；

m1——标样溶液中呋虫胺（吡蚜酮）的质量（g）；m2——试样的质量（g）；w——标样中呋虫胺（吡蚜酮）的质量分数（%）。

2结果与分析

2.1色谱分离条件的选择

2.1.1检测波长的选择。

样品为双组分复配制剂，必须避开低波长时溶剂吸收的干扰，同时兼顾复配制剂各组分的有效分离及数据的准确性，因此，采用混配标样，利用色谱工作站数据采集系统，采集波长190～400 nm的各组分紫外光谱吸收曲线，反复试验，最终确定以250 nm作为检测波长。

2.1.2流动相的选择。

试验选择250.0 mm×4.6 mm（i.d）Agilent XDB C18 不锈钢柱，经过反复试验，最终确定最优化流动相为乙腈-水（10∶90，V/V），流速为1.0 ml/min，实现了各组分的有效分离，且保留时间适中，是理想的分析呋虫胺·吡蚜酮复配制剂的分析方法。

2.2线性关系

配制一系列不同质量浓度的标准溶液进行测定。以呋虫胺（吡蚜酮）的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作图（图3、图4），得线性回归方程和相关系数：呋虫胺为y=1 577.2x+227 748，R=0.999 8；吡蚜酮为y=1 448.4x+383 791，R=0.999 6。结果表明呋虫胺和吡蚜酮在100～500 mg/L浓度范围内线性关系良好，具有较好的定量线性关系。

图3呋虫胺线性曲线

图4吡蚜酮线性曲线

2.3方法的精密度

采用呋虫胺和吡蚜酮可湿性粉剂3批次，进行5次重复测定，考察定量分析方法的精密度。结果表明，呋虫胺和吡蚜酮的定量结果变异系数分别为0.11%和0.61%（表1），满足样品定量分析要求。

2.4方法的准确度

在已知呋虫胺和吡蚜酮含量的可湿性粉剂中，各添加了4个不同浓度的标准溶液进行添加回收率试验。结果表明，呋虫胺添加回收率在99.49%～100.21%，平均回收率为99.79%，吡蚜酮的添加回收率在99.23%～100.12%，平均回收率为99.64%（表2），方法准确度较高，满足定量分析要求。

表1精密度试验结果

样品名称试样批次含量∥%12345平均值标准偏差相对标准偏差∥%

呋虫胺 1 40.38040.32040.35040.29040.27040.320 0.0440.11

240.32040.25040.23040.34040.29040.290 0.046

340.48040.41040.39040.45040.37040.420 0.045

吡蚜酮 110.29010.34010.25010.21010.18010.250 0.0630.61

210.46010.37010.33010.43010.48010.410 0.063

310.45010.43010.31010.35010.33010.370 0.062

表2 回收率试验结果

序号 添加后含量∥mg

呋虫胺吡蚜酮实测量∥mg呋虫胺吡蚜酮

回收率∥%呋虫胺吡蚜酮

1 4.512 7.5304.489 7.472 99.49 99.23

2 5.531 8.5635.508 8.512 99.58 99.40

3 6.545 9.5946.537 9.574 99.88 99.79

4 7.563 10.5897.57910.602100.21 100.12

平均99.79 99.64

3结论

试验建立的高效液相色谱方法操作简便，精密度与准确度完全符合分析检验要求，可同时快速测定呋虫胺和吡蚜酮含量，广泛适用于质检机构与生产企业对呋虫胺·吡蚜酮复配制剂的质量监督与控制。

参考文献

[1]

张亦冰. 新内吸杀虫剂——呋虫胺[J].世界农药，2003，25（5）：46-47.

[2] 刘建华，张小峰，季美娟. 吡蚜酮原药高效液相色谱分析[J].农药，2008，47（10）：741-742.