银杏叶黄酮注射液对ACI患者脑损伤因子影响研究

赵磊，牟丽，刘彦青，李文涛

(1.潍坊市益都中心医院 神经内二科，山东 潍坊 262500；2.潍坊医学院 解剖教研室，山东 潍坊 261053)



银杏叶黄酮注射液对ACI患者脑损伤因子影响研究

赵磊1，牟丽1，刘彦青1，李文涛2

(1.潍坊市益都中心医院 神经内二科，山东 潍坊 262500；2.潍坊医学院 解剖教研室，山东 潍坊 261053)

目的 探讨银杏叶黄酮注射液对急性脑梗死(acute cerebral infarction，ACI)患者脑损伤因子的影响及意义。方法 选取2014年6月～2015年2月已确诊为急性脑梗死的患者180例，根据随机数字表法随机分为2组：对照组88例，行临床常规疗法治疗；实验组92例，在与对照组相同的临床常规治疗基础上加用银杏叶黄酮注射液，检测2组患者的临床疗效、神经功能缺损评分、及血清HIF-1α、TNF-α、Caspase-3水平，进而对比分析2种治疗方法的临床疗效。结果 实验组患者经治疗后临床疗效更优于对照组，有效率显著优于对照组(P<0.05)；神经功能缺损评分显著低于对照组(P<0.05)；血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平低于对照组(P<0.05)，均有统计学意义。结论 银杏叶黄酮对急性脑梗死患者据有较好的临床疗效，且能有效改善患者神经功能缺损症状，对临床治疗脑梗死具有重要意义。

银杏叶黄酮；急性脑梗死；神经功能缺损；HIF-1α；TNF-α；Caspase-3

脑梗死(cerebral infarction，CI)又可称之为缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)，是由于各种原因所致脑部血液供应障碍，导致局部脑组织缺血、缺氧性坏死，而引起神经功能缺损的一类临床综合征[1]。据相关流行病学调查发现[2]，我国每年大约有200万患者被诊断为脑梗死。有文献证实[3]，高血压、高血脂、高血糖即“三高”病与本病的发生具有非常密切的联系，男性因其吸烟、饮酒发病率也高于女性，且随着年龄的增高其发病率也随之上升。祖国医学将脑梗死归之于“中风”范畴，治疗当予益气活血、祛瘀通络之法。银杏叶黄酮(GinkgobilobaP.E.)是提取自银杏干燥叶的有效成分，亦被称为银杏叶提取物，经研究发现其注射液具有增加脑血管流量、降低脑血管阻力、改善血液循环以及保护脑组织细胞的药理作用[4]，临床已有将之应用于治疗急性脑梗死的报道，并取得了较为理想的疗效。低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、血清肿瘤坏死因子(TNF-α)作为脑损伤因子在急性脑梗死早期具有重要意义，但银杏叶黄酮对急性脑梗死患者的HIF-1α、Caspase-3、TNF-α影响的相关的报道却较为鲜见，因此通过对临床脑梗死患者观察，探讨急性脑梗死患者经银杏叶黄酮治疗急性脑梗死的临床机制，为临床医生的诊段和治疗提供新的思路和方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 病例来源选择2014年6月～2015年2月于潍坊市益都中心医院神经内科以急性脑梗死为诊断而收入院的患者180例，采用随机数字表法随机分为实验组和对照组。其中实验组92例，男性58例，女性34例，38～79岁，平均年龄(67.2±8.4)岁；对照组88例，男性52例，女性36例，42～79岁，平均年龄(65.3±7.9)岁。诊断及排除标准：参照2010年中国急性缺血性脑卒中诊治指南[5]中诊断标准而拟定以下纳入标准：①初次发作的脑梗死患者；②发病24 h内接受治疗的患者；③CT或核磁共振等影像检查确诊为急性脑梗死患者；意识清醒同意并自愿参与本实验的患者。排除标准：①不愿参与本研究或不符合纳入标准者；②患有心肌梗死、周围血管性病变、较大手术病史者；③患有乙肝、艾滋病等具有较重传染性疾病患者；④合并有严重肝、肾功能不全疾病患者；⑤对银杏叶提取物注射液过敏者；⑥年龄超过80周岁者；⑦患有精神类疾病不能配合研究者。

1.2 治疗方法 对照组严格按《2010年中国急性缺血性脑卒中诊治指南》，予以临床常规治疗，奥扎格雷钠注射液(沈阳药大药业有限责任公司，国药准字H20093279)80 mg，250 mL氯化钠注射液稀释，每天2次静脉滴注；小牛血去蛋白提取物注射液(长春天诚药业有限公司，国药准字H20003820)800 mg，250 mL氯化钠注射液稀释，每天1次静脉滴注；阿司匹林肠溶片(哈尔滨泰华药业股份有限公司，国药准字H23020521)100 mg，1晚1次口服，共治疗2周。

实验组在与对照组相同的临床常规治疗基础上加用银杏叶提取物注射液(悦康药业集团有限公司，国药准字H20070226)20 mL，以5%葡萄糖注射液250 mL稀释，每天1次静脉滴注，共治疗2周。

1.3 观察指标及检测方法 通过观察治疗前后2组患者临床疗效、神经功能缺损评分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平变化比较研究。

1.3.1 疗效评判标准：参照2004年第六届全国脑血管病学术会议制定的标准[6]判定，显效：神经功能缺损评分减少90%以上；有效：神经功能缺损评分减少45%～90%；进步：神经功能缺损评分减少18%～45%；不进步：神经功能缺损评分减少17%～0%：恶化：神经功能缺损评分增加18%以上；死亡。

1.3.2 神经功能缺损评分：参照1995年全国第四届脑血管病会议制定的评分方法[7]进行2组患者的神经功能缺损评分，最低为0分，最高为45分。

1.3.3 血清指标采集：所有研究对象均在治疗前、后，空腹8 h后从肘静脉抽取静脉血3 mL，置于真空采血管中，4 ℃低温环境下静置1 h后用水平离心机以3000 r/min转速离心 20 min， 分离血清，行双抗体夹心ELISA法检测血清中HIF-1α、Caspase-3、TNF-α浓度水平(试剂盒均由康泰生物科技有限公司提供)，试剂盒使用方法按其说明书严格执行。

2 结果

2.1 患者的一般资料 在各项人口学基本特征数据中，2组患者的性别、年龄、病程、收缩压、舒张压、高血压、冠心病、糖尿病人数的差异均无统计学意义，见表1。

表1 2组患者一般资料的比较Tab.1 Comparison of the gerenal data of two groups

2.2 治疗2周后2组患者疗效比较 经2周治疗后，对照组死亡6例，恶化15例，实验组死亡3例，恶化8例，其余患者均有较好的治疗效果。实验组患者总有效率显著高于对照组(χ2=4.363，P<0.05)，见表 2。

表2 治疗2周后2组患者疗效比较[n(%)]Tab.2 Comparison of clinical effect of two groups after two weeks treatment [n(%)]

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.3 2组患者治疗前后神经功能缺损评分情况比较 治疗前2组神经功能缺损评分差异无统计学意义；经2周治疗后，实验组患者神经功能缺损评分显著低于对照组(P<0.05)，见表 3。

表3 2组患者治疗前后神经功能缺损评分比较±s)Tab.3 Comparison of MESS of two groups before and after ±s)

*P<0.05，与同组治疗前比较,compared with before treatment in the same group；#P<0.05，与对照组比较,compared with control group

2.4 治疗2周后2组患者血清各指标情况比较 经2周治疗后，2组患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平均有所降低，但实验组显著优于对照组(P<0.05)，见表 4。

表4 治疗2周后2组患者血清HIF-1α、Caspase-3与TNF-α比较Tab.4 Comparison of HIF-1α，Caspase-3 and TNF-α of two groups after two weeks ±s)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with before treatment in the same group；#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

3 讨论

急性脑梗死是一种具有高发病率、高死亡率、高致残率的临床常见病，且由于人口老龄化的加剧、饮食结构等因素的变化，不仅其好发人群逐渐年轻化，其发病率亦也呈逐年上升的趋势。据相关流行病学发现，高血脂、高血糖、高血压都是促进本病发生的主要因素，且与吸烟、饮酒以及高压力的工作环境有较大联系。急性脑梗死是脑部动脉及其分支发生粥样硬化的主要结局，当机体发生急性脑梗死后，其脑部组织的生物氧化功能随即发生异常改变，产生大量自由基，脑组织细胞因其细胞膜脂质被大量自由基发生过氧化反应而死亡，临床即形成神经功能受损症状[8]。传统医学将急性脑梗死归属于“中风”范畴，治疗当以益气活血、祛瘀通络为主要治疗方法[9]。银杏叶提取物注射液是近年来新兴的药物，提取自银杏科植物银杏的干燥叶，其主要有效成分为银杏叶黄酮。现在临床主要将之应用于治疗冠心病、心绞痛、脑动脉硬化以及高血压等心脑血管疾病。据现有文献报道[10]，银杏叶黄酮具有多种药理作用，不仅能增加脑血流量、改善脑部组织血液循环、扩张冠状动脉，还能抑制血小板聚集、抗衰老、提高免疫力的功能。临床虽有将银杏叶黄酮用于治疗急性脑梗死的文献报道，但并没有从HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等血清指标的角度进行分析研究。因此，本研究通过对急性脑梗死患者应用银杏叶提取物注射液，进一步探究其对患者神经功能缺损评分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指标的影响，以明确其临床疗效，并得出相关结论。

本研究结果表明，银杏叶黄酮能有效改善急性脑梗死患者神经功能缺损症状，提高治疗率。实验组患者经2周治疗后，其有效率明显优于对照组，死亡率明显低于对照组。其原因可能是银杏叶黄酮能有效增加受损脑部组织的血流量，改善其缺血程度，以及还能抑制血小板聚集，防治血栓形成、缺血加剧，从而降低神经功能缺损评分，提高治疗有效率，降低死亡率[11]。亦有学者研究证明[12]，银杏叶黄酮具有降低血液黏稠度、清除自由基、改善脑功能的作用，在急性脑梗死发生早期可及时有效地清除大量自由基，在一定程度上防治神经功能缺损症状的加剧，这一结论也可能是实验组患者有效率、神经功能缺损评分优于对照组的原因。

本研究结果表明，银杏叶黄酮能有效调节急性脑梗死患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指标水平。HIF-1α是在人体缺氧的条件下而产生的一种转录调节因子，在正常氧气充足条件下并不表达，只有当机体组织发生缺氧时，才会被诱导激活并发挥其特有的生理作用，是人体在缺氧条件下维持内环境稳态的主要物质[13]。研究发现[14]，HIF-1α主要通过调节缺氧反应性基因表达的分子通路而发挥其生理作用，据现有文献统计，HIF-1α的下游基因多达百余种，在缺氧发生时不仅可以促进红细胞、血管的生成，还能调节糖代谢、维持人体微环境稳态。但其发挥作用的具体机制目前仍未十分清楚，各家观点亦不十分相同[15]。在本研究中治疗前2组患者HIF-1α水平均较高，其原因可能与脑组织突发梗死急剧缺氧、缺血促进其大量表达有关，而治疗结束后实验组明显低于对照组，其原因可能是实验组在应用银杏叶黄酮后，病变部脑组织的血流量增加，其缺血、缺氧程度得到有效改善，因此血清HIF-1α水平也随之恢复。Caspase-3是一种能够促使细胞凋亡的蛋白酶，在急性脑梗死发生时具有促进病变区神经元凋亡的重要作用。人体在正常生理条件下，Caspase-3以没有活性的酶原形式存在，并不发挥其生理作用，只有被细胞开始凋亡的信号激活后，才会活化并发挥其加速诱导细胞凋亡的作用。研究发现[16]，急性脑梗死患者在应用Caspase-3抑制剂后，能够明显减轻病变区脑组织缺血神经元的损伤，且通过抑制Caspase-3表达亦可减轻脑缺血的损伤程度，降低致残率。在本研究中，2组患者在新发病时，Caspase-3皆高度表达，而治疗结束后实验组患者血清Caspase-3水平明显低于对照组，这一结果可能与实验组在应用银杏叶黄酮后体内Caspase-3表达受到相应抑制有关，结合“抑制Caspase-3表达亦可减轻脑缺血的损伤程度”的结论，本研究中实验组患者疗效及神经功能缺损评分低的结果能够得以解释。TNF-α是一种早期炎性因子，主要由单核-巨噬细胞活化产生，在脑梗死急性期可加重患者脑缺血局部组织的损害，实验组患者经治疗后其血清TNF-α水平明显低于对照组，其原因可能与银杏叶黄酮调节免疫的功能有关，但其具体抗炎、调节免疫的机制目前尚不十分清楚。

本研究通过对180例急性脑梗死患者的治疗疗效及血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平变化进行分析，证实了银杏叶黄酮对急性脑梗死患者具有更好的疗效。因此，对于急性脑梗死患者及时地应用银杏叶黄酮进行治疗具有重要意义。在未来的研究中，将对银杏叶黄酮影响患者免疫功能的实质原因进行更深入的研究，为本实验所得出的结果做出进一步的论证和分析。

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(编校：王冬梅)

Study on effect of brain injury factor in patients with acute cerebral infarction by Ginkgetin injection

ZHAO Lei1, MOU Li1, LIU Yan-qing1, LI Wen-tao2

(1.The Second Department of Neurology, Weifang YiDu Central Hospital, Weifang 262500, China; 2.Department of Anatomy, Weifang Medical University, Weifang 261053, China)

ObjectiveTo explore effect of ginkgetin injection on brain damage factor in patients with acute cerebral infarction.Methods180 cases of acute cerebral infarction patients were selected from June 2014 to February 2015, and divided into experiment group and control group.88 cases in control group were treated with clinical routine therapy, 92 cases in experimental group were treated on base of the control with ginkgetin injection, 2 weeks for a course.The clinical efficacy, MESS and serum HIF-1α, TNF-α, Caspase-3, were detected and compared.ResultsThe clinical efficacy of the experiment group was better than that of control group(P<0.05),and the MESS of the experiment group was lower than the control group(P<0.05).Serum HIF-1α, Caspase-3, TNF-α levels were lower than the control group(P<0.05).ConclusionGinkgetin injection can effectively improve the patient’s neurological symptoms, it is of great significance to the clinical treatment of cerebral infarction.

ginkgetin injection; acute cerebral infarction;MESS HIF-1α;TNF-α;caspase-3

赵磊，男，本科，住院医师，研究方向：神经内科，E-mail：sjkzlei@163.com。

R74

A

1005-1678(2015)05-0150-04