牙痛宁酊辅助根管植入对患者龈沟液内IL-8、CD4及HSP70水平的影响

王香芸，张夫波

(浙江省余姚市第二人民医院 口腔科，浙江 余姚 315400)



牙痛宁酊辅助根管植入对患者龈沟液内IL-8、CD4及HSP70水平的影响

王香芸Δ，张夫波

(浙江省余姚市第二人民医院 口腔科，浙江 余姚 315400)

目的 探究牙痛宁酊辅助根管植入对牙周炎患者血清白细胞介素-8(interleukin 8，IL-8)、白细胞分化抗原4(cluster of differentiation 4，CD4)及热休克蛋白70 (heat shock protein 70，HSP70)水平影响。方法 收集2013年12月～2015年9月浙江省余姚市第二人民医院口腔科收治的牙周炎患者64例，根据治疗方法不同分为对照组和治疗组，治疗组33例，对照组31例，2组患者均实施根管植入治疗，治疗组在此基础上实施速效牙痛宁酊治疗方案，治疗结束后对比分析2组患者临床疗效、疼痛发生率、IL-8、CD4及 HSP70水平。结果 治疗组临床总有效率为96.97%(32例)，显著高于对照组的80.65%(31例)(χ2=4.373，P<0.05)。治疗组疼痛发生率为30.30%(10例)，显著低于对照组的58.06%(18例)(χ2=5.006，P<0.05)。治疗后，2组血清IL -8水平均明显升高，CD4、HSP70水平显著降低(P<0.05)，与对照组相比，治疗组血清IL -8水平显著升高，CD4、HSP70水平显著降低(P<0.05)。结论 牙痛宁酊辅助根管植入提高根管治疗效果，缓解牙组织损伤，改善手术后患者疼痛。

牙痛宁酊；根管植入；牙周炎；白细胞介素-8；白细胞分化抗原4；热休克蛋白70

牙周炎是一种破坏性疾病，与微生物、宿主和环境有关，是导致成年人牙齿丧失的主要原因[1]。在局部致病因素中，以菌斑多见，吸烟和肥胖则是众多全身因素中的高危因素。临床以根管治疗为主要治疗手段，采取机械或者化学等手段，清除根管内大部分感染物，通过根管填充防止反复感染的发生，应用生物相容性较好的人工材料，用充填材料长期严密地封闭根管，预防根尖周病变的发生或促进根尖周病变的愈合[2]。研究发现[3]，采用速效牙痛宁酊辅助根管植入具有较好的镇痛疗效。本文基于大量数据研究，探究牙痛宁酊辅助根管植入对牙周炎患者血清白细胞介素-8(interleukin 8，IL-8)、白细胞分化抗原4(cluster of differentiation 4，CD4)及热休克蛋白70 (heat shock protein 70，HSP70)水平影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2013年12月～2015年9月浙江省余姚市第二人民医院口腔科收治的牙周炎患者64例，男性30例，女性34例，年龄45～74岁，平均年龄(60.18±7.56)岁，29颗上颌磨牙，35颗下颌磨牙。采用随机数字分配法分为治疗组与对照组，治疗组33例，男性15例，女性18例，年龄48～74岁，平均年龄(61.45±8.11)岁，14颗上颌磨牙 ，19颗下颌磨牙；对照组31例，男性15例，女性16例，年龄45～73岁，平均年龄(59.84±7.59)岁，15颗上颌磨牙 ，16颗下颌磨牙。2组患者一般资料相仿，差异无统计学意义，具有可比性。本研究获得本院伦理协会批准。

1.1.1 纳入标准：所有患者均符合以下条件：①诊断符合中华医学会《临床诊疗指南——口腔医学分册》[4]中牙周炎的诊断标准具备以下临床特点：齿龈出血、肿胀以及疼痛等症状；②牙齿有触痛感，刷牙容易出血；③患者均为自愿参与本实验，并签署知情同意书。

1.1.2 排除标准：①药物过敏史，治疗前1周内接受抗生素治疗的患者，根管再治疗者；②感染、严重高血压、糖尿病以及严重心、肝、肾等多脏器功能障碍或衰竭；③恶性肿瘤、癫痫等神经系统疾病。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：患者入院后均进行X片、血常规、尿常规等常规检查，根据患者根管形状、走向以及主要的病理改变类型等，实施根管治疗，具体方法如下，实施2%盐酸普鲁卡因注射液(重庆迪康长江制药有限公司，国药准字H50020914)或者利多卡因(盐酸利多卡因注射液，国药准字H11020558)进行局部麻醉患牙，打开牙髓腔并剔除冠髓，将根髓抽出，根管预备完成，将患牙隔湿，吸除根管内液体，充填根管应用氧化锌丁香油碘仿糊剂配合牙胶尖侧方加压法，X线片检测根管，预防异样的出现。应用维生素C以及抗生素等药物进行常规治疗，疗程为4周，并进行复查。治疗组在此基础上实施速效牙痛宁酊(湖北午时药业股份有限公司，国药准字Z42020010)治疗方案，棉签蘸取药液适量，均匀涂于患处，每天3次，重症患者可多次反复使用。

1.2.2 观察指标：

① 疗效评定标准：疗效评定标准依据《中医病证诊疗常规》中胃火牙痛症状进行评价[5]，治疗结束后患牙无疼痛感，牙齿咀嚼正常，不存在不适感、叩击痛以及牙龈红肿等情况为显效；患牙疼痛感基本消失，咀嚼功能除稍不适其余恢复正常，牙龈红肿等症状改善为有效；患牙临床表现无缓解或加重，显示严重牙周炎症状为无效。总有效率=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。根据疼痛视觉模拟评分(VAS)评价[6]，分为无痛、轻痛、中痛以及重痛，疼痛的发生率=(轻痛例数+中痛例数+重痛例数)/总例数×100%。

② 2组患者IL-8、CD4及HSP70水平检测：采集龈沟液1 mL，选择2组患者单侧1位、4位以及6牙位，使用periopaper置于中牙周袋插进入龈沟底，直至遇轻微阻力，持续30 s，测量其长度并称重，3位点periopaper放置同一消毒EP管，于-70 ℃冰柜内冷冻保存，检测前放置室温内解冻，使用500 μL PBS液洗脱龈沟液内的样品，震荡取上清液，应用晶美生物工程有限公司生成的ELISA试剂盒，实施酶联免疫吸附法(ELISA)(M600酶标仪，上海研卉生物科技有限公司) 检测患牙龈沟液内IL-8、CD4以及HSP70水平。

2 结果

2.1 2组患者疗效比较 治疗组临床总有效率为96.97%(32例)，显著高于对照组的80.65%(31例)(χ2=4.373，P<0.05)。见表1。

表1 2组患者疗效比较[n(%)]Tab.1 Comparison of efficacy between two groups[n(%)]

#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.2 2组患者疼痛发生率比较 治疗组疼痛发生率为30.30%(10例)，显著低于对照组的58.06%(18例)(χ2=5.006，P<0.05)。见表2。

表2 2组患者疼痛发生率结果[n(%)]Tab.2 Comparison of pain incidence between two groups[n(%)]

#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.3 2组龈沟液内IL-8,CD4及HSP 70水平比较 治疗后，2组IL -8水平均明显升高，CD4、HSP70水平显著降低(P<0.05)，与对照组相比，治疗组IL -8水平显著升高，CD4、HSP70水平显著降低(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者龈沟液内IL-8,CD4及HSP 70水平比较Tab.3 Comparison of IL-8, CD4 and Hsp70 levels in gingival crevicular fluid between two ±s，pg/mL)

*P<0.05，与同组治疗前比较，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

人类牙齿容易出现血液循环障碍，出现牙周炎。牙周炎分为急性牙周炎以及慢性牙周炎，急慢性牙周炎患者无法自愈，牙齿未受到滋养，导致局部组织脓肿以及骨质受损，牙器官缺失。现代临床对于根管治疗研究较多，并随着治疗医师手术熟练程度、麻醉效果、医疗器械以及方法的更新换代，临床治疗例数得到稳步提高，获得临床医疗人员的广泛应用[7]。根管治疗的术中器械的使用、根管细菌、碎屑等微生物较多导致清洗不彻底，术后感染、红肿等不良反应较多[8]，预后较差，患者依从性较差，导致术后炎症反应发生率高达10%。研究表明[9]，运用速效牙痛宁酊进行辅助治疗可预防各种并发症以及预后疗效较高。牙痛宁酊由芫花根以及地骨皮等中药组成，并应用现代工艺提取、提炼和制备生成的酊剂[10]。芫花根是瑞香科植物芫花的根茎，具有利水消肿，解毒散结，祛风盛湿的疗效，应用于局部水肿、瘰疬、乳痈、风湿筋骨痛以及跌打损伤等疾病;地骨皮是一种茄科植物枸杞的根皮部位，芜花采用醋酸乙酯进行分离纯化具有凉血除蒸，清肺祛火的疗效，应用于治疗高血脂、高血糖、免疫力降低、疼痛、瘀滞以及疥疮等疾病。此方诸药合用具有消肿化淤，祛风止痛的疗效，临床用于急慢性牙痛、牙本质过敏以及牙周炎等症。本研究显示，治疗后与对照组相比，治疗组临床总有效率较高，疼痛发生率较低(P<0.05)，证实牙痛宁酊辅助根管植入对牙周炎患者明显降低患者术后疼痛，提高患者生活质量，强化了临床根管植入治疗的效果，提高患者依从性。

与对照组相比，治疗组IL -8水平较高，CD4水平较低(P<0.05)，证实牙痛宁酊辅助根管植入对牙周炎患者具有改善牙周，缓解牙组织损伤，有效治疗疾病，改善牙龈免疫应答功能。IL-8是中性粒细胞的主要功能调节因子之一，对中性粒细胞具有很强的活化和趋化作用，通过调节中性粒细胞在牙龈组织中的补充和激活而在牙周炎病变的发生发展中起重要作用[11]。发病初期，牙龈内皮细胞受IL-1β以及TNF和细菌等多种因素刺激产生IL - 8，导致IL-8水平增高；若趋化以及激活中性粒细胞减弱与IL-8水平降低共同发生，吞噬微生物作用减弱，感染物质在龈沟液内无法清除，炎性因子增多，牙周组织遭到严重损坏，牙槽骨受损。CD4是一种由单核细胞、巨噬细胞及中性粒细胞分泌产生的分化抗原，是脂多糖/脂多糖结合蛋白( LPS/LBP)复合物的受体蛋白，其中内毒素即脂多糖 (LPS)是一种以革兰氏阴性细胞壁为主的内毒素[12]。牙周炎患者纤维蛋白原水平增高，口腔内病菌增多，患者体内LBP与CD4作用增强，使单核细胞激活，免疫应答以及免疫病理发生，细胞因子分泌增多，体内出现病理损伤，CD4基因中具有急慢性牙周炎的患病风险因子。曾有研究显示，HIV阳性牙周炎患者与健康人相比机体CD4阳性表达率较高[13]。

HSP70具有诱发牙周炎发生发展以及免疫应答发生的作用，是临床经典外源抗原，作为宿主细胞免疫以及体液免疫产生应答的抗体，具有很强的佐剂性,在体液和细胞免疫应答中均可产生作用[14]。细菌源性的 HSP70由于其同源性能够被宿主作为抗原识别，在毒物应激及致癌物质应激中反应增强[15]。激活对自身HSP70的交叉反应，促使过度的免疫调节导致牙周炎等自身免疫疾病的发生。本研究显示，与对照组相比，治疗组HSP70水平较低(P<0.05)，证实牙痛宁酊辅助根管植入改善患者过度自身免疫，缓解疼痛。

本研究通过对本院口腔科收治的64例牙周炎患者的临床疗效、疼痛发生率、IL-8、CD4及 HSP70水平进行研究，证实了牙痛宁酊辅助根管植入提高根管治疗效果，缓解牙组织损伤，改善手术后患者疼痛。在下一步研究中，本课题组将进行药理学方面研究，对本实验过程中出现现象做进一步研究。

[1] 陈宏宇.牙周炎的研究进展[J].医学综述，2013，19(6)：1037-1039.

[2] 胡颖，何克新.根尖微渗漏的检测方法研究进展[J].广西医学，2008，30(3)：398-400.

[3] 刘志军.速效牙痛宁酊辅助牙髓炎根管治疗的临床疗效观察[J].中医药学报，2014，42(4)：148-150.

[4] 王陇德.临床诊疗指南·口腔医学分册[M].2007.北京：人民卫生出版社.

[5] 陈园桃.中医病证诊疗常规[M].东南大学出版社，2008.

[6] 孙兵.视觉模拟评分法(VAS)[J].中华神经外科杂志，2012，28(6)：645.

[7] 潘建东.80例根管治疗术并发症的临床分析[J].中国医药指南，2013，11(23)：222.

[8] 何金梅，边专，樊明文，等.根管残余细菌对根管治疗预后的影响[J].华西口腔医学杂志，2004，22(3)：198-200.

[9] 赵厚玺，杨发，李然.牙髓炎根管治疗中速效牙痛宁酊的辅助效果观察[J].中国医药指南，2015，13(23)：123-124.

[10] 邵泽艳，赵娜夏，夏广萍，等.芫花醋酸乙酯部位的化学成分研究[J].现代药物与临床，2013(3)：278-281.

[11] 朱治宇，刘国勤.慢性牙周炎治疗前后患牙龈沟液中IL-8和TNF-α水平变化比较[J].细胞与分子免疫学杂志，2010(11)：1111-1112.

[12] 任建东.鲎抗内毒素因子模拟肽CLP-19抗革兰氏阴性菌脓毒症活性及其机制的研究[D].重庆：第三军医大学，2008.

[13] 贾洪诚，王璇，华文浩，等.HIV阳性的牙周炎患者CD4+T淋巴细胞计数和龈沟液前列腺素E2与牙周临床指标的相关性分析[J].中华口腔医学杂志，2014，49(2)：73-77.

[14] 罗静，邓鑫轶.热休克蛋白70在新生小鼠中起有效佐剂作用并能防御HSV攻击[J].国际生物制品学杂志，2006(4)：186-187.

[15] 蒋琳.镍铬合金修复体患者牙龈组织中COX-2，HSP-60，HSP-70的表达[D].大连：大连医科大学，2007.

(编校：王俨俨)

Effect of Yatongning tincture root canal implantation on IL-8,CD4 and HSP70 levels in gingival crevicular fluid of patients with periodontitis

WANG Xiang-yunΔ, ZHANG Fu-bo

(Department of Stomatology, Yuyao Second People’s Hospital, Yuyao 315400, China)

ObjectiveTo explore the effect of Yatongning tincture root canal implantation on interleukin 8 (IL-8), cluster of differentiation 4(CD4) and heat shock protein 70(HSP70) in in gingival crevicular fluid of patients with periodontitis.Methods64 patients with periodontitis from December 2013 to September 2015 in stomatology department of Yuyao Second People’s Hospital were selected and according to the different treatment methods divided into treatment group and control group, 33 cases in treatment group, 31 cases in control group. Patients received root canal implantation in two groups, the treatment group received Yatongning tincture root canal implantation on the basis of control group. The clinical curative effect, incidence of pain, IL-8, CD4 and HSP70 levels were compared between two groups.ResultsThe clinical curative effect of treatment group was 96.97% (32 cases), which was higher than 80.65% (31 cases) of control group (χ2=4.373,P<0.05). The pain incidence of treatment group was 30.30% (10 cases), which was higher than 58.06% (18 cases) of control group (χ2=5.006，P<0.05). After treatment, the IL -8 levels were higher and CD4, HSP70 levels were lower in two groups than those pre-treatment(P<0.05), compared with control group, the IL -8 levels were higher and CD4, HSP70 levels were lower in treatment group(P<0.05).ConclusionYatongning tincture root canal implantation could enhance the clinical efficacy, relieve tooth tissue damage and improve the post-operative pain in patients.

Yatongning tincture; root canal implantation; periodontitis; interleukin 8; cluster of differentiation 4; heat shock protein 70

王香芸，通信作者，女，本科，研究方向：口腔综合偏口腔外科，E-mail：wxykqk@163.com。

R782.3

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1005-1678(2015)12-0160-03