糖及其代谢物测定

王威威

【摘要】本文对糖及其一些代谢物的测定进行论述。

【关键词】糖；代谢物；测定

【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）03-0270-01

一、空腹葡萄糖检测

临床上所称的血糖专指血液中的葡萄糖而言。每个个体全天血糖含量随进食、活动等情况会有被动。一般在空腹时的血糖水平较为恒定。临床检测时采用葡萄糖氧化酶的方法可以特异地测出真实的血糖浓度。

（一）方法和原理

1.葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖糖酸，并产生过氧化氢：

葡萄糖+2H20→葡萄糖酸+2H20

在色原性氧受体的存在下，过氧化物酶催化过氧化氢氧化色素原，生成有色化合物。

2.已糖激酶法 在已糖激酶催化下，葡萄糖和三磷腺苷发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸与二磷酸腺苷。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸，同时使氧化型辅酶还原成还原型辅酶。

3.邻中苯胺法 葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热，葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合成葡萄糖基胺，后者脱水生成席夫碱，再经结构重排，生成有色化合物，吸收峰630nm。

（二）参考值

葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法（HK）、邻甲苯胺法：3.9—6.4mmol/L。

（三）临床意义

血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定。当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖。

1.生理性高血糖 见于饭后1—2小时；摄入高糖食物；也可由运动、情绪紧张等因素引起。

2.病理性南血糖

（1）糖尿病是造成高血糖最常见的原因之一；（2）颅内压力宿，如颅内出血、颅外伤等；（3）由于脱水引起的高血糖，如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度升高。

3.生理性低血糖 如饥饿或剧烈运动。

4.病理性低血糖

（1）胰岛β细胞增生或癌瘤等，使赎岛素分泌过多。（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶机能减退、肾上腺皮质机能减迟等（3）严重肝病患者，肝脏不能有效地调节血糖。

二、口服葡萄糖耐量试验

（一）方法和原理

葡萄糖耐量试验是检查人体血糖调节机能的一种方法。正常人在服用一定量葡萄糖后，血糖浓度暂时升高（一般不超过8.88mmol/L或160mg/d1），但在2小时内又恢复到空腹水平，称为耐糖现象。在服用一定量葡萄糖后，间隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血糖水平及有无尿船出现，称为糖耐量试验。若因内分泌失调等因素引起糖代谢失常时，食入大量糖后，血糖浓度可急剧升高或升高极不明显，短时间内不能恢复原值者即称为耐糖现象失常。临床上常对症状不明显的患者采用糖耐量试验来诊断有无糖代谢异常。

（二）实验步骤

（1）检测前3天患者可正常饮食（每天进食糖类不得不少于150g，且维持正常活动，停用胰岛素、肾上腺皮质激素等药物治疗，不抽烟，不喝咖啡和茶，试验前一天晚餐后即不再进食。

（2）次晨空腹抽静脉血2mI，抗凝或否，并同时收集尿液标本，测定血液与尿液中的葡萄糖含量。

（3）将75g葡萄糖溶于250ml温开水中，令受检者5分钟内服下，服后每隔60分钟各取血1次，共4次，每隔lh留尿液，测定血糖及尿糖。若疑为反应性低血糖病例，可适当延长标本收集时间。

（4）将各次测得的血糖和尿糖数值，以数字或曲线报告。

（四）临床意义

1.糖尿病 空腹的血糖常超过正常值，服糠后血糖更高.而且维持高血糖时间较长，尿中可检测到尿糖。 、

2.肝病患者 服糖后半小时或一个半小时之间血糖急剧升高，一个半小时到三小时之间血糖迅速下降至正常或低于空腹血糖。血糖升高时可以现尿糖。

3.肾病患者 糖耐量曲线正常，服糖后尿内可出现尿糖。

4.某些内分泌疾病 如垂体前叶机能亢进，肾上腺皮质、肾上腺髓质肿瘤低于正常人，进食大量糠后，血糖升高不明显，糖耐量减低。

三、糖化血红蛋白检测

糖化血紅蛋白是血红蛋白与领萄糖经非酶促反应结合而成的，其含量的多少取决于血糖浓度以及血糖与血红蛋白接触时间的长短。

（一）方法和原理

糖化血红蛋白检测方法很多，常用的有微柱法离子交换层析、亲和层析、高压液相、免疫凝集、离子捕获法、电泳法等。

离子交换层析，分手工和仪器两种。手工微柱有Bio—BaD和西班牙BIOSYSYEMS

等多家公司产品，手工微柱操作受到人工因素影响，可能会洗脱不完全或过度洗脱，并受外界环境温度的影响，而某些红蛋白如HbF异常增加时，也会与糖化血红蛋白同时洗脱而使结果产生偏差。采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术可全自动分离血红蛋白的变异体与亚型，除可测定糖化血红蛋白外，还可同时检测出HbS与HbC的存在与否，在计算糖化血红蛋白值时会自动扣除变异体产生的影响，从而使结果更为准确、可靠，CV值小于2%。

亲和层法是目前糖化血红蛋白检测的新方法，该方法特异性强，不受异常血红蛋白的干扰。DS1糖化血红蛋白分析仪已经获得美国仪器药品管理署（FDA）的认可获准上市，作为目前世界唯一的快速床边糖化血红蛋白仪，它采用硼酸亲和层析法，只需10?1全血即可在4分钟内快速分离检测糖果化血红蛋白，为临床提供即时的化验结果，从而使医生在患者就诊的第一时间明确诊断并制定相应的治疗方案，特别适合于临床科室使用，尤其对小儿患者而言更有优势。其检测结果也完全达到并超过临床要求，CV值5%以内。

离子捕获法亦是新近发展起来的新方法，其原现是糖化血红蛋白与相应抗体结合后，联以荧光标记物，而在IMX反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胶合物，使纤维表面带正电，使前述的反应复合物吸附在纤维表面，经过一系列的清洗后测定其荧光强度，从而得到糖化血红蛋白的浓度，该方法适用于成批糖化血红蛋白标本的检测。

电泳方法如毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白质的变异体，但目前尚无商品化、具有批量样本通过能力的仪器面世，相当程度地限制了该方法的临床应用。

综上所述，糖化血红蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一项良好的指标，糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白，并据此制定，修正相关治疗方案。

（二）临床意义

CHb升高主要见于糖尿病及其他高血糖患者的血液中，由于糖化过程比较缓慢、一

旦形成后不再解离、并持续于红细胞生命周期中，故测定糖化血红蛋白所占的百分比率能反映测定前1—2月内的血糖水平。对血糖和尿糖波动较大的糖尿病患者；进行CHb测定不但可用于诊断，。而且是监测病情的良好指标。

参考文献：

[1]唐跃年 张菀陵. 阿糖胞苷及其代谢物在血液中的HPLC测定方法[J]. 中国药学杂志， 1994（06）.

[2]安富荣，费艳秋，袁静，祝德秋，孙黎，王平全，曹惠明；HPLC法测定白血病患者血浆中阿糖胞苷及其代谢物浓度[J]；中国临床药理学杂志；2001年03期