乳头状甲状腺癌中KISS－1、VEGF－C的表达及与临床病理的关系

李学庆，党永岩，汤承辉，孙晓红，候益民，史永照

（1.上海市第五人民医院普外科，上海200240；2.华东师范大学生命学院，上海200241）

乳头状甲状腺癌中KISS－1、VEGF－C的表达及与临床病理的关系

李学庆1，党永岩2，汤承辉1，孙晓红1，候益民1，史永照1

（1.上海市第五人民医院普外科，上海200240；2.华东师范大学生命学院，上海200241）

目的研究乳头状甲状腺癌中KISS－1、VEGF－C的表达及与临床病理的关系。方法选取2012年7月到2013年7月我院收集的乳头状甲状腺癌病理标本60例（研究组），另选取正常甲状腺组织30例（对照组），应用免疫组织化学SP法测定KISS－1、VEGF－C在两组中的表达情况，并分析其与临床病理的关系。结果研究组KISS－1阳性者显著少于对照组，VEGF－C阳性者显著多于对照组，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；KISS－1、VEGF－C在乳头状甲状腺癌组织的表达和肿瘤大小、临床分期以及颈部淋巴结转移有关，且差异具有统计学意义（P＜0.05），KISS－1、VEGF－C的表达和年龄、性别无关，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论KISS－1、VEGF－C的表达和乳头状甲状腺癌存在一定关系，且和肿瘤的大小、临床分期以及颈部淋巴结转移有关。

乳头状甲状腺癌；KISS－1；VEGF－C；临床病理

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0223）

乳头状甲状腺癌是甲状腺癌最常见的类型，其恶性程度较轻，但若存在血管侵犯，则应该扩大手术范围，进而延长患者寿命。但是如何触诊乳头状甲状腺癌颈部淋巴结的转移情况，进而制定合理的手术方式，需要有可靠的诊断依据。本研究旨在分析KISS－1、VEGF－C在乳头状甲状腺癌中的表达，并且分析其和乳头状甲状腺癌临床病理的关系，进而为选择合适的手术方式做准备，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年7月到2013年7月我院收集的乳头状甲状腺癌病理标本60例（研究组），另选取正常甲状腺组织30例（对照组），所有患者实施手术前均未进行任何的治疗，且入选病例均有较完整的临床资料和病理学资料。研究组男性21例，女性39例，年龄介于23－69岁，平均年龄为（58.3±0.8）岁，临床分期Ⅰ期者19例，Ⅱ期者23例，Ⅲ期者16例，IV期者2例，肿瘤直径超过1cm者38例，低于1cm者22例，有颈部转移者22例，无颈部转移者38例。对照组男性11例，女性19例，年龄介于23－70岁，平均年龄为（58.4±0.6）岁。两组一般情况比较无显著差异（P＞0.05），具有可比性，研究经伦理委员会批准，所有入选者均知情同意并签订知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 试剂 选取浓缩型兔抗人KISS－1型蛋白单克隆抗体（由美国Santa Cruz Biotechnology inc生产），且经预实验确定其浓度是1∶50；采用即用型的兔抗人VEGF－C的多克隆抗体（由美国Santa Cruz Biotechnology inc生产）。

1.2.2 试验方法 入选的组织标本均应用10%的中性福尔马林溶液固定，然后应用蜡块包埋，然后将组织以4μm的厚度连续切片，应用SP免疫组化技术检测组织中KISS－1、VEGF－C的表达情况。检测操作均根据试剂盒上的说明书进行，并且由经验丰富的专业人员操作。

1.3 检测结果评价标准

KISS－1主要的着色位于细胞浆中，呈棕褐色或者棕黄色颗粒。高倍镜下有低于10%阳性细胞数目即为阴性（－）；阳性细胞数目超过10%则为阳性（＋）；VEGF－C主要于细胞浆中着色，其阳性的染色部分呈现棕黄色，高倍镜下有低于10%阳性细胞数目即为阴性（－）；阳性细胞数目超过10%则为阳性（＋）。

1.4 统计学方法

全部数据均在SPSS17.0软件上统计，计数资料应用χ2检验，检验标准以P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果

2.1 两组KISS－1、VEGF－C的表达情况比较

研究组KISS－1阳性者显著少于对照组，VEGF－C阳性者显著多于对照组，两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组KISS－1、VEGF－C的表达情况比较（例，%）

2.2 KISS－1、VEGF－C表达水平和临床病理的关系

KISS－1、VEGF－C在乳头状甲状腺癌组织的表达和肿瘤大小、临床分期以及颈部淋巴结转移有关，且差异具有统计学意义（P＜0.05），KISS－1、VEGFC的表达和年龄、性别无关，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 KISS－1、VEGF－C表达水平和临床病理的关系（例，%）

3 讨论

甲状腺癌的发病率较高，其发病率呈逐年上升的趋势。乳头状甲状腺癌是主要类型的甲状腺癌，据统计，该类型大约占80%－90%。乳头状甲状腺癌的主要转移途径为颈部淋巴结转移，临床触诊检测肿瘤是否发生转移的误诊率较高，即使触诊不到肿大的颈部淋巴结其转移率仍高达64.3%。且临床上缺乏较准确的分子诊断方法。KISS－1是一种肿瘤转移的抑制基因，该基因位于染色体的Iq32－q41区，是由4个外显子构成的，编码145个氨基酸构成的蛋白质。KISS－1主要表达于正常的组织，或者是未出现转移的细胞组织中表达，而肿瘤出现转移时会缺失。据报道，该物质在乳腺癌、食管癌以及胃癌等恶性肿瘤淋巴结转移中缺失，KISS－1抑制肿瘤转移的主要机制为：KISS－1和受体作用以后会抑制肿瘤细胞的增殖、转移和趋化，KISS－1基因缺乏可能与活化的肿瘤细胞侵袭粘附有关，进而促进肿瘤的转移。本研究发现，研究组KISS－1阳性表达阳性率显著高于对照组，和其他研究结果具有一致性，提示KISS－1在乳头状甲状腺癌中表达较少。

VEGF－C是淋巴管的生成因子，该物质的基因定位在4q34中，是一种近期发现的血管内皮生长因子家族中的，该物质由肿瘤细胞分泌，和其受体结合作用以后，可以引起淋巴管增生。有研究显示，VEGF－C作用于淋巴管内皮细胞，诱导内皮细胞发生较强的有丝分裂，促进肿瘤细胞的淋巴管生成。而淋巴管形成是恶性肿瘤出现淋巴转移的基础。本研究发现，研究组VEGF－C表达阳性显著高于对照组，提示乳头状甲状腺癌患者中VEGF－C表达较正常组织高。且研究还发现，KISS－1、VEGF－C在乳头状甲状腺癌组织的表达和肿瘤大小、临床分期以及颈部淋巴结转移有关，且差异具有统计学意义（P＜0.05），KISS－1、VEGF－C的表达和年龄、性别无关，差异无统计学意义（P＞0.05），提示KISS－1、VEGFC的表达和肿瘤大学、临床分期以及颈部淋巴结转移存在密切的关系。但是两者的表达均和年龄、性别无关。

综上所述，乳头状甲状腺癌组织中会出现KISS－1表达缺失和VEGF－C的异常表达，且两者的表达和肿瘤大小、临床分期以及颈部淋巴结转移有关，而与年龄、性别无关，提示KISS－1和VEGF－C可以用来筛选是否发生淋巴结转移的患者，进而为临床选择治疗方案提供依据。

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The expression and relationship with clinical pathology of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma

LI Xue－qing1，DANG Yong－yan2，TANG Cheng－hui1，et al.（1.Department of general surgery，The Fifth People＇s Hospital of Shanghai，Shanghai 200240，China；2.School of Life，East China Normal University，Shanghai 200241，China）

ObjectiveTo study the expression and relationship with clinical pathology of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma.Methods60cases（the study group）pathological specimens of papillary thyroid carcinoma were collected from our hospital during the period from July 2012to July 2013，30cases（the control group）normal thyroid tissue were also collected，the expression of two groups of KISS－1，VEGF－C were measured in immunohistochemical SP method，and to analyze its relationship with clinical pathology.ResultsThe KISS－1positive of the study group were significantly less than the control group，VEGF－C positive of the study group were significantly more than the control group，the difference was statistically significant（P＜0.05）；the expression of KISS－1，VEGF－C in papillary thyroid carcinoma had relationship with tumor size，clinical stage and lymph node metastasis，the difference was statistically significant（P＜0.05），the expression of KISS－1，VEGF－C had no relationship with age and sex，the difference was no statistically significant（P＞0.05）.ConclusionThe expression of KISS－1，VEGF－C had relationship with papillary thyroid carcinoma，and had relationship with tumor size，clinical stage and lymph node metastasis.

Papillary thyroid carcinoma；KISS－1；VEGF－C；Clinical Pathology

R736.1

A

李学庆（1970－），男，本科学历，副主任医师，从事乳腺甲状腺方向的研究。

2014－02－20）

1007－4287（2015）02－0223－03