酶联免疫法检测唾液中幽门螺杆菌抗体的效果分析

滕岩 迟伟 姜顺爱 杨梅

酶联免疫法检测唾液中幽门螺杆菌抗体的效果分析

滕岩 迟伟 姜顺爱 杨梅

目的 探讨酶联免疫法(ELISA)检测唾液中幽门螺杆菌(Hp)抗体在诊断Hp感染中的临床效果。方法 通过对110例感染幽门螺杆菌患者唾液中的Hp抗体进行ELISA和其他三种常规方法检测,评价ELISA检测Hp感染的临床效果。结果 110例患者应用ELISA法检测Hp感染与其他三种常规方法之间差异无统计学意义(P＞0.05), Hp抗体在胃肠道疾病中检出率较高。结论 ELISA对唾液中的Hp抗体检测灵敏度和特异度高, 且具有创伤小、恢复快、方法简单等特点, 可作为检测Hp感染的诊断指标。

酶联免疫法；幽门螺杆菌；唾液

Hp是一种呈现螺旋状或弧状的慢性感染性细菌, Hp通常是导致胃肠道出现炎症的主要因素, 在人群中的感染率较高, 但是由于Hp感染没有临床特异性症状, 在我国诊断治疗中, 主要是借助临床病理学诊断检查和快速尿素酶实验(Rapid Urease Test, RUT)等方法作为主要诊断依据［1］, 但是此类方法较为繁琐, 且对患者机体造成一定的伤害。临床检验需要一种简便、可行及易被患者接受的快速检测Hp的方法, 通过对国内外检测方法的研究［2,3］, 应用ELISA对唾液中的Hp抗体进行检测, 检测出Hp抗体呈现阳性。本院对110例感染幽门螺杆菌患者唾液中的Hp抗体进行检查, 同时采用临床常规检测方法对比, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取110例本院2013年6月~2014年12月消化内科住院患者进行研究, 其中男54例, 女56例, 年龄14~75岁, 平均年龄(44.5±4.8)岁, 110例患者患病包括慢性胃炎、胃、十二指肠溃疡、胃、十二指肠急性穿孔及胃癌等。所有患者检测前应用唾液采集器采集患者唾液, 并置于-18℃冰箱中保存, 同时在食管和胃肠道活检黏膜若干块,以备快速尿素酶试验、HE染色和病理学检查使用。

1.2 试剂材料和仪器 唾液采集应用北京中创先锋科技有限责任公司的唾液采集器及Hp-IgG试剂盒, 幽门螺杆菌抗体检测采用北京美康生物技术研究中心有限责任公司提供的检测试剂盒, 酶标仪采用上海赛默科技生物发展有限公司Thermo MK3酶标仪及其相关试剂, 分光光度计采用北京普析通用仪器有限责任公司T6紫外可见分光光度计。

1.3 方法 通过酶联免疫法检查患者唾液中的幽门螺杆菌抗体, 在受检者做内镜检查前40 min用唾液采集器采集患者唾液, 通过Thermo MK3酶标仪对唾液中的Hp-IgG检测, 对IgG进行标记形成抗原复合物, 捕获标记的亲和物显色后, 在450 nm波长下测定A值(吸光值), 阴性孔A值+0.20为上限值, 大于上线值判定为阴性。内镜活检样本分别进行RUT、HE染色及WS染色法检测Hp。通过以上三项检查, 如果其中大于等于两项检查为阳性者预判为阳性, 三项检查均为阴性者为阴性。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 唾液Hp抗体检测 通过对110例患者唾液样品检测, ELISA法Hp阳性检测结果为79例, Hp阴性为31例；三种常规检测方法检出阳性均值为81例, 阴性均值为29例。通过与RUT比较, ELISA的灵敏度为97.4%(76/78), 特异度为90.6%(29/32)。与HE染色法比较, 灵敏度为96.2%(75/78),特异度为87.5%(28/32)。与WS染色法比较, 灵敏度为97.5%(77/79), 特异度为93.5%(29/31)。通过统计学分析得出ELISA与其他三种常规方法之间差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

2.2 不同疾病患者唾液Hp-IgG检出情况 Hp抗体在不同疾病患者检出率有所不同, 其中在胃、十二指肠溃疡、慢性胃炎等疾病中检出率相对较高。见表2。

表1 110例患者唾液幽门螺杆菌抗体与三种常规检查方法比较(n)

表2 不同疾病患者唾液幽门螺杆菌抗体检出情况(n, %)

3 讨论

通过本次研究得出, Hp与胃、十二指肠溃疡及慢性胃炎相关, 这也与Marshall［4］的研究结果一致, 消除和降低Hp对于改善胃肠道疾病有显著性意义, 可以降低疾病的复发和其他并发症的出现。目前我国诊断Hp感染主要采用内镜活检在黏膜上的检查［5］, 但是此种方法属于侵入性检查, 且费用较高, 多数患者在经济和精神上难以接受。部分医院采用13C和14C呼气试验间接检测Hp抗原, 但是14C对人体及环境会造成污染, 尤其不适用于孕妇及婴幼儿检查, 作为14C升级版的13C检查虽然去除了放射性, 但由于造价较高, 不易被患者接受, 推广程度并不高。

本次研究通过与其他三种常规检测方法进行比较发现, ELISA检测结果与常规方法差异无统计学意义(P＞0.05)。此外, 作者还发现测定血清中的抗Hp-IgG与测定唾液抗Hp-IgG一致性较高, 说明在体内循环的作用下血清中的抗Hp-IgG可以循环到唾液及胃液等地方, 可以作为诊断是否感染Hp的依据, 因此Hp-IgG可以作为Hp感染的诊断指标。此外, 本次研究结果显示, ELISA检测Hp的灵敏度和特异度均较高, 口腔中存在多种不同的菌体抗原和免疫蛋白可能是导致诊断出现少数假阳性和假阴性结果的原因［6］。本研究结果显示唾液中的Hp-IgG水平高低可以作为检测Hp感染的诊断指标, 与三种常规检测方法之间差异无统计学意义(P＞0.05), 并且易被患者接受, 具有临床诊断意义, 值得推广。

［1］ 俞莹莹, 吴勤动, 许凯声.唾液幽门螺杆菌抗原检测与慢性胃炎活动性及癌前病变关系的研究.中国实用内科杂志, 2006, 26(18):1421-1423.

［2］ 宋敏, 李进, 李仕英, 等.用聚合酶链反应扩增16SrRNA基因检测幽门螺杆菌.中华医学检验杂志, 2003, 16(5):268.

［3］ Desai HG, Gill HH, Shankaran K, et al.Dental plaque: a Permanent Reservoir of Helicobacter pylori? Scand J Gastroenterol, 1991, 26(11):1205-1208.

［4］ Marshall BJ, Warren JR.Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration.Lancet, 1984, 1(8390): 1311-1315.

［5］ 朱人敏, 路又可, 王琳.唾液抗幽门螺杆菌抗体的检测.中华内科杂志, 1997(36):469-470.

［6］ Patel P, Mendal MA.Salivary antibodies to Helicobacter pylori: screeing dyspetic patients befor endoscopy.Lancet, 1994, 344(8921): 511-512.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.030

2015-01-21］

154002 佳木斯市传染病院(滕岩 姜顺爱 杨梅)；佳木斯大学附属第一医院(迟伟)