张略
·临床医学·
尿液红细胞、白细胞干化学法检测与镜检结果的对比分析
张略
目的 通过对尿液中红、白细胞干化学法检测与镜检的结果对比分析, 得出镜检在尿液常规检查中的必要性。方法 对1300份新鲜尿进行干化学法和镜检检验, 然后对红、白细胞的检测结果对比分析。结果 红细胞检测结果阳性符合率86.41%, 阴性符合率88.85%, 假阳性率 11.15%, 假阴性率13.59%;白细胞检测结果阳性符合率84.55%, 阴性符合率94.66%, 假阳性率 5.34%, 假阴性率15.45%。结论 尿液干化学法检测尿液中红、白细胞虽然快速, 省力, 但因其方法学的特性会使有些检出结果与真实结果不一致, 为提高检测结果的准确性与可靠性, 镜检与干化学法结合是必要的。
干化学法;镜检;尿红细胞;尿白细胞
随着尿液分析仪在临床上的普遍使用, 尿液的常规镜检在很多医院的检验科里已经被忽视。尿液干化学法检测虽具有操作简便、快速、可获得多项参数的优点, 但干化学法检测结果往往受到多种因素干扰, 不能完全取代涂片镜检。本文对1300份尿液样本中红、白细胞干化学检测与镜检检测的结果进行对比和分析, 现报告如下。
1.1 材料 尿液标本来自2014年2~6月门诊就诊患者的随机尿液标本。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 仪器 采用日本OLYMPUS CX-21显微镜和长春迪瑞N-600 型11项尿分析仪。
1.2.2 试剂 H12-MA尿液分析试纸条。
1.3 实验方法 将患者收集的新鲜尿液用一次性塑料杯充分混匀后用洁净试管取尿液10 ml。干化学分析实验严格按照使用说明书进行, 每天开机时均用校正带对仪器进行校正,用室内质量控制物随尿标本同时测定进行监控。镜检时标本进行完干化学检测后按照《全国临床检验操作规程》规定方法操作。将10 ml上述标本以3000 r/min离心5 min, 离心后手持离心管以45~90°倾去上清液, 留取0.25 ml尿沉渣标本,充分混匀后镜检, 在高倍镜(10×40)观察10个视野, 记录结果。
1.4 结果判断 干化学分析法标准:红细胞为阴性, 白细胞为阴性。人工镜检结果标准:红细胞数0~3/高倍视野, 白细胞数0~5/高倍视野, 超出此范围为阳性。以镜检结果为标准与干化学结果对比, 两者均为阳性结果为真阳性;两者均为阴性结果为阴性;镜检结果阳性, 干化学阴性为假阴性;镜检结果阴性, 干化学阳性为假阳性。
1.5 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2.1 以镜检法为标准, 干化学分析法与镜检法检测红细胞结果对比见表1。1300份患者尿液进行干化学法与镜检法检测, 其中阳性符合率86.41%, 阴性符合率88.85%, 假阳性率11.15%, 假阴性率 13.59%。两种方法阳性率及阴性率比较差异有统计学意义(P<0.05) 。
2.2 以镜检法为标准, 干化学分析法与镜检法检测白细胞结果对比见表2。1300份患者尿液进行干化学法与镜检法检测, 阳性符合率84.55%, 阴性符合率为94.66%, 假阳性率5.34%, 假阴性率 15.45%。两种方法阳性率及阴性率比较差异有统计学意义(P<0.05) 。
表1 干化学分析法与镜检法检测红细胞结果对比(n)
表2 干化学分析法与镜检法检测白细胞结果对比(n)
近年来, 随着医学科学技术的不断进步, 医学检验的仪器设备也在快速的发展。尿液干化学分析仪器的出现和发展给尿液的临床检验提供了极大的帮助。它的特点是方法简便,检测速度快, 灵敏度较高, 重复性较好。但是, 尿干化学分析仪对红细胞、白细胞的检测是根据多联试带上各膜块化学反应后的颜色变化, 间接辨别有无细胞, 易受到仪器本身的稳定性和灵敏度、试纸条质量、环境温度[1]等多种因素的影响, 容易出现假阳性或假阴性。而其中出现假阳性或假阴性的主要的原因还是与反应原理有关的。
3.1 尿液红细胞检测的原理、方法和出现假阳性的原因分析 利用尿液中游离血红蛋白中的血红素催化过氧化氢产生氧而氧化色素原使之呈色, 其颜色深浅与血红蛋白含量成正比, 从而据此可以换算为红细胞数。此法既能与完整的红细胞反应, 也能测定游离的血红蛋白。出现假阳性的原因包括:①尿液标本不够新鲜, 因标本放置时间过长, 导致红细胞破坏, 干化学潜血反应呈阳性, 而显微镜检查却呈阴性。但是这种人为的因素是可以避免的。②肾病患者尿液中的红细胞在肾脏或尿道中被破坏, 或者尿比密过低, 尿pH值偏高, 可以造成红细胞干化学法出现假阳性[2]。③当肌肉受损时, 血中肌红蛋白浓度升高, 由于肌红蛋白含有Hb基团, 经肾排泄时, 导致尿液肌红蛋白水平升高可以与试纸条反应, 干化学潜血反应因此呈阳性, 而显微镜检查却呈阴性。④大多数革兰阴性菌和一部分革兰阳性菌可能释放过氧化物酶活性物质, 或者菌体代谢过程中合成一些触酶或过氧化物酶或超氧化物歧化酶使干化学法出现假阳性反应[3], 主要应避免尿液放置过长时间滋生细菌造成不必要的假阳性。出现假阴性的原因包括:①尿液中含有大剂量维生素C或其他还原性物质会导致结果出现假阴性, 当干化学反应中出现维生素C为阳性的情况时, 需要镜检。②高蛋白、高比重尿会影响干化学感应的敏感性, 从而出现假阴性结果[4]。
3.2 尿液白细胞检测的原理、方法和出现假阳性的原因分析 粒细胞中存在α-醋酸萘酯酶, 其能作用于吲哚酚酯,使吲哚酚酯释放吲哚酚, 吲哚酚与重氮盐发生反应而产生紫色, 其颜色深浅与酯酶活性成正比, 从而据此可以换算为白细胞数。该项目测试只能与中性粒细胞反应以检查尿液中的中性粒细胞, 而检测不出淋巴细胞和单核细胞。出现假阳性的原因包括:①尿液在体外贮存时间过长或在膀胱内贮存时间过长致使白细胞破坏, 中性粒细胞酯酶释放到尿中所致。如果尿液样本新鲜可以减少这个误差。②某些药物如甲醛污染、药物呋喃可致假阳性反应。③一些女性患者尿液分泌物中含有大量扁平上皮细胞、小圆上皮细胞、鳞状上皮细胞,可造成干化学法呈阳性而沉渣镜检呈阴性[5]。出现假阴性的原因包括:①肾移植患者发生排异反应, 淋巴细胞白血病患者, 尿中出现大量淋巴细胞, 及某些尿液中含有以单核细胞为主的患者, 干化学无法检出, 就会导致结果出现假阴性。②温度偏低。③尿中含有的蛋白质, 糖及胆红素等物质较高时。④某些药物如庆大霉素、先锋霉素Ⅴ可致假阴性反应。⑤尿液大量脓细胞时, 可使检出结果偏低或出现假阴。
综上所述, 尿液分析的目的是要检出尿液的阳性病例,虽然尿干化学检测方便快捷, 但是规范的尿沉渣镜检是尿液分析结果准确的基础。有部分专家指出尿液外观、浑浊度正常的标本, 如果试剂条同时显示红细胞、白细胞、亚硝酸盐及蛋白四项指标全部阴性, 可以认为尿中红细胞、白细胞、管型数量在正常范围之内, 无需进一步做显微镜检查。但作者认为原则上每份尿液标本都应将干化学检测和镜检结合起来报告结果, 以防止漏报。如果标本量太大, 无法对每个标本都进行镜检时, 肾科和泌尿外科患者及以镜检结石、结晶、肿瘤细胞作为诊断依据或观察疗效时, 必须镜检。只有两者结合, 严格按照规范操作, 才会为临床提供正确的检验报告,从而达到尿液分析的最终目的。
[1] 陈津, 王德春, 朱忠勇.低温对干化学法测定尿白细胞的影响.临床检验杂志, 2006, 24(1):33.
[2] 王权.尿镜检法在尿液检测中的重要性.内蒙古中医药, 2012, 31(4):102.
[3] 丛玉隆.实用检验医学(下册).北京:人民卫生出版社, 2009:5.
[4] 向碧英.尿液分析仪与镜检法检测尿液中红细胞的结果对比.中外医学研究, 2012, 2(10):5.
[5] 王玲.尿液干化学法检测与镜检相结合的重要性.中国农村卫生事业管理, 2011, 1(31):12.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.01.010
2014-09-19]
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