沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴细胞亚群的影响

高志刚，袁永红，詹建华

(杭州市萧山区第一人民医院 儿科，浙江 杭州 311200)

哮喘(bronchial asthma，BA)也叫支气管哮喘，是指由多种细胞和细胞组分共同参与的气道慢性炎症性疾病，这种慢性炎症与患者气道高反应性有较大关系，因广泛而多变的可逆性气流受限而导致反复发作的喘息、气促、胸闷伴或不伴咳嗽等症状。据流行病学调查显示，儿童是哮喘疾病的高发人群，我国儿科哮喘协作组于1988～1990年报告中国0～14岁儿童哮喘的患病率平均为1%，2000年调查结果则显示我国城市儿童哮喘2年内有喘息发作的现患病率为0.5% ～3.34%，全国平均为1.54%，既往有哮喘的累计哮喘患病率为0.25% ～4.63%，平均1.98%，可见其增长速度之快[1]。研究表明[2]:空气污染可能对于哮喘急诊就诊患者病情轻重程度有一定影响。其原因可能不仅仅由于空气污染物中一些微尘微粒诱导哮喘的发生或者加重，而污染的空气中存在的一些过敏原可能是空气污染地区哮喘加重的原因之一。

临床治疗小儿哮喘的方法主要以吸入激素等长期抗炎，或β2受体激动剂及茶碱类药物以缓解气道痉挛等。儿童应用大量激素后会产生抑制儿童生长、骨质疏松或低血钾等不良反应。进行对症治疗，虽然取得了一定的疗效，但不能完全控制咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma，CVA)的发作，毒副作用较大。《慢性阻塞性肺疾病全球倡议》指出，吸入长效β2受体激动剂是治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)最有效的方法，对需要规则使用支气管扩张剂的中至重度COPD患者，推荐使用长效β2受体激动剂替代抗胆碱药和口服缓释茶碱或联合用药[3]。沙丁胺醇是一种具有选择性作用的β2受体激动剂，具有抑制组胺等致过敏性物质释放从而缓解支气管痉挛的药理作用，临床亦多应用于哮喘的治疗。硫酸镁具有消除非特异性炎症和缓解气道痉挛的作用。本研究通过对38例哮喘患儿联合应用沙丁胺醇气雾剂和硫酸镁，以观察其对于患儿IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴细胞亚群的影响，为小儿哮喘的治疗提供新的思路和治疗方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集本院2014年5月～2015年3月已确诊为哮喘的患儿38例，年龄在5～14岁之间，男性18例，女性20例。采用随机数字表法将患者随机分为实验组和对照组。实验组19例，平均年龄(9.39±1.72)岁;病程1～5个月，平均(3.19±0.56)个月;对照组19例，平均年龄(9.14±1.76)岁;病程1～5个月，平均(3.23±0.62)个月。纳入及排除标准:符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定支气管哮喘防治指南[4]。

纳入标准:①反复发生咳嗽1个月以上，常在运动、吸入冷空气及上呼吸道感染后诱发。胸片正常，体检时无哮鸣音，支气管激发试验阳性，使用一般抗生素、止咳化痰药无明显疗效，使用抗组胺药、糖皮质激素或支气管解痉剂有效;②年龄在5～14岁之间;③家属及患儿自愿参与本实验，并签署知情同意书。

排除标准:①伴有严重的肝功能、肾功能不全;②患儿同时伴有肺炎等其他肺部疾病者;③对沙丁胺醇或硫酸镁过敏者;④近1个月内使用过糖皮质激素或其他药物治疗者;⑤不符合纳入标准者。

1.2 治疗方法 实验组:予沙丁胺醇气雾剂(深圳大佛药业有限公司，批准文号:国药准字H20000348)联合硫酸镁(哈药集团三精制药股份有限公司，批准文号:国药准字H23021033)混悬液氧气雾化吸入，每次10 min，每天2次，沙丁胺醇气雾剂5～8岁患儿每次0.5 mL，9～14岁患儿每次0.75 mL，必要时予抗生素和吸氧，共治疗1周。对照组:予布地奈德气雾剂(Astra Zeneca AB，进口药品注册证号:H20080294)1.0 mg雾化吸入，每天2次，每次10 min，必要时与抗生素和吸氧，共治疗1周。2组患者均在治疗前、治疗结束后空腹采集5 mL肘静脉血，将静脉血装入采血管中，将采血管按3000 r/min离心10 min，待离心结束后将上层血清装入EP管中，在EP管上标明姓名、组别及日期等，放入－80℃冰箱中保存备用。

1.3 观察指标及检测方法

1.3.1 血清细胞因子检测:本研究采用ELISA法检测细胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ)水平，试剂盒均由北京雅安达生物技术有限公司提供，其操作完全按照说明书严格执行。

1.3.2 T淋巴细胞亚群检测:本研究采用流式细胞计数仪测定T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)含量，具体操作步骤参照试剂盒说明，试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供。

1.3.3 疗效评价标准:根据支气管哮喘防治指南将患者预后分为4个等级:①痊愈:治疗1周内患儿咳嗽、喘息、肺部哮鸣音等主要症状消失;②显效:治疗1周内患儿主要症状明显好转;③有效:治疗1周内患儿主要症状略有好转;④无效:治疗1周内患儿主要症状未见改善或加重。

1.4 统计学方法 采用统计学软件SPSS 19.0进行统计分析，正态计量资料用“”表示，2组间比较采用t检验;计数资料用例数或百分比表示，2组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患儿吸入药物前后血压、心率、呼吸比较 本研究结果显示，吸入药物前2组患儿收缩压、舒张压、心率、呼吸等指标差异无统计学意义，吸入药物30 min后2组患儿收缩压、舒张压、心率、呼吸等指标差异均无统计学意义。见表1。

表1 2组患儿吸入30 min后收缩压、舒张压、呼吸、心率比较()Tab.1 Comparison of the systolic pressure，diastolic pressure，respiration and heart rate between two groups()

表1 2组患儿吸入30 min后收缩压、舒张压、呼吸、心率比较()Tab.1 Comparison of the systolic pressure，diastolic pressure，respiration and heart rate between two groups()

组别 例数收缩压(mmHg)吸入前 吸入30min后舒张压(mmHg)吸入前 吸入30 min后呼吸(次/min)吸入前 吸入30 min后心率(次/min)吸入前 吸入30 min后对照组 19 115.29±16.03 114.12±15.13 83.14±11.38 84.24±10.54 32.30±4.40 33.20±4.31 112.00±16.85 110.00±13.07实验组 19 114.68±14.66 113.96±15.10 84.21± 9.61 85.19±10.30 31.80±3.26 32.50±3.83 114.00±13.10 112.00±12.97

2.2 2组患儿治疗前后血清细胞因子水平比较 本研究显示，治疗前2组患者血清 IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ水平比较，差异无统计学意义。治疗后2组患者血清IL-2、IFN-γ水平均较治疗前明显升高，且实验组更高于对照组(P＜0.05)，2组患者血清IL-4、IL-5水平均较治疗前明显降低，且实验组更低于对照组(P＜0.05)。见表2。

表2 2组患者体液免疫指标水平比较(，μmol/L)Tab.2 Comparison of humoral immune index level between two groups(，μmol/L)

*P＜0.05，与治疗前相比，compared with pre-treatment;#P＜0.05，与对照组治疗后相比，compared with control group pre-treatment

IL-2IL-4IL-5IFN-γ组别 例数治疗前 治疗后对照组 19 45.57±5.78 51.68±7.03* 46.84±5.07 32.19±4.62* 38.56±4.53 27.87±3.69* 12.14±1.35 14.12±1.86治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后*实验组 19 45.98±6.14 56.14±5.81*# 47.21±5.33 24.33±3.16*# 37.89±4.70 19.16±2.69*# 12.35±1.45 18.71±2.03*#

2.3 2组患者治疗前后T淋巴细胞亚群比较 入院时2组患者细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)差异无统计学意义。治疗后2组患者血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前明显升高(P＜0.05)，且实验组更高于对照组，2组患者血清CD8+水平均较治疗前明显降低，且实验组更低于对 照组(P＜0.05)。见表3。

表3 2组患者细胞免疫指标比较()Tab.3 Comparison of cellular immune parameters between two groups()

表3 2组患者细胞免疫指标比较()Tab.3 Comparison of cellular immune parameters between two groups()

*P＜0.05，与治疗前相比，compared with pre-treatment;#P＜0.05，与对照组治疗后相比，compared with control group pre-treatment

CD3+(%)CD4+(%)CD8+(%)CD4+/CD8+组别 例数治疗前 治疗后对照组 19 46.49±4.86 63.32±6.65* 25.76±2.92 36.42±4.56* 38.14±5.34 29.26±3.96* 0.93±0.11 1.43±0.18治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后*实验组 19 46.26±5.47 75.48±7.91*# 25.33±3.61 45.83±5.01*# 36.91±4.06 23.23±2.98*# 0.92±0.12 2.05±0.22*#

2.4 2组患者治疗疗效比较 本研究显示，治疗后实验组总有效率(94.74%)明显高于对照组(68.42%)(χ2=4.378，P＜0.05)。见表4。

表4 2组患者临床疗效比较[n(%)]Tab.4 Comparison of clinical efficacy between two groups[n(%)]

3 讨论

哮喘是由各种原因导致的呼吸道高反应性通气障碍性疾病，具有反复发作、可逆性等特点。而小儿体质较为敏感，受外界刺激因素较多，其发病比较突然，且病情较重，严重影响患儿学习、生活。临床对于小儿哮喘的治疗主要以吸入激素等长期抗炎，或β2受体激动剂及茶碱类药物以缓解气道痉挛等，患儿长期应用会产生抑制生长、骨质疏松或低血钾等毒副作用，因此寻找一种副作用小、疗效明显的治疗方法十分迫切。

有效控制小儿哮喘患者血清T淋巴细胞亚群各指标比例能明显减轻患儿呼吸道黏膜炎症反应，从而改善临床症状，而T淋巴细胞亚群释放的细胞因子在炎症反应中起着重要作用。临床上应用沙丁胺醇治疗哮喘的报道虽不少见，但是联合应用硫酸镁共同治疗小儿哮喘的报道却较少。

本研究结果显示，沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘患儿血压、呼吸、心率没有不良影响。有研究指出，患儿在应用氢化可的松治疗后，患儿血压、心率均不同程度升高[5]。而在本研究中，表1显示，治疗前后2组患者的血压、呼吸、心率与对照组差异并无统计学意义，而治疗所应用的布地奈德气雾剂为临床常规用药，2组之间差异无统计学意义，可见应用沙丁胺醇气雾剂与硫酸镁联合应用的安全性与应用布地奈德气雾剂相似，且沙丁胺醇气雾剂采用吸入疗法，吸入药物能够直接作用于气道黏膜，在气道局部发挥较强的药效，因此对患儿造成的全身不良反应相对少，比较适合患儿临床应用。

本研究显示，沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁能有效调节哮喘患儿T淋巴细胞亚群比例以及其释放的细胞因子。从表3中可以看出，2组患儿治疗前具有调高免疫应答能力的CD3+、CD4+比例相对较低，而调低免疫应答能力的CD8+比例则相对较高，且CD4+/CD8+＜1，也从侧面证实了这一结论。其原因可能与哮喘患儿气道炎症反应过多表达有关。研究发现，哮喘患儿发生哮喘的主要原因与患儿的免疫力低下以及免疫功能紊乱有关[6]，T淋巴细胞亚群是主要参与气道炎症反应的细胞[7]，患儿用药后咳嗽、喘息等临床症状的减轻可能与用药后T淋巴细胞亚群比例得到有效调整，气道炎症得到缓解，免疫功能得到调节有关。IL-2是最早发现的具有广泛生物活性的细胞因子，在调节机体免疫功能中具有重要作用，能有效调节人体T细胞、自然杀伤细胞以及单核细胞的活性以及增值发育。IL-4是促进B细胞合成lgE的细胞因子，还能促进各种炎症介质的释放，抑制Thl细胞释放IFN-γ，加速气道高反应性的形成[8]。IL-5是哮喘患者炎症反应中的主要调节因子[9]，具有增强过敏原和增加敏感性，以及促进组胺释放的作用。IFN-γ是一种对细胞功能具有调节作用的小分子多肽，可抑制B细胞产生IgE、IgG，能有效降低哮喘患儿呼吸道的高反应性[10]，明显改善患儿临床症状。表2中可以看出，治疗后2组患者血清IL-2、IFN-γ水平均较治疗前明显升高，且实验组更高于对照组，2组患者血清IL-4、IL-5水平均较治疗前明显降低，且实验组更低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。其原因可能与硫酸镁中镁离子能够消除非特异性炎症的作用，研究发现，镁离子具有类激素样的作用，能解除分泌物对呼吸道的阻塞，抑制肥大细胞介质释放，而且镁离子能升高呼吸道β受体对β受体激动剂的亲和力，增加了沙丁胺醇气雾剂的疗效，2者之间的协同、促进作用共同使实验组疗效优于对照组。

本研究通过对哮喘患儿T临细胞亚群、细胞因子、血压、心率、呼吸和临床疗效的变化，证实沙丁胺醇气雾剂联合硫酸镁对小儿哮喘患儿的治疗具有一定的意义。在未来的研究中，将对沙丁胺醇气雾剂和硫酸镁对小儿哮喘患儿治疗的药理作用进行更深入的研究，为本实验所得出的结果做出进一步的论证和分析。

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[5]李路鹏.两种口服激素在皮质醇增多症术后激素替代治疗中的应用比较[D].天津:天津医科大学，2014.

[6]俞君.儿童支气管哮喘基质金属蛋白酶-9及免疫功能变化的研究[D].苏州:苏州大学，2011.

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