王文哲
凝血检验项目的影响因素分析及对策
王文哲
目的 研究并探讨各种因素对凝血检验项目的影响, 并做出分析与对策, 使临床检验的准确性大幅度的提高。方法 选取200例来本院参加体检的学生, 抽取他们的血液作为血液检测样本, 在不同的放置时间和离心时间以及是否溶血等环境下进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)和纤维蛋白原(Fib)等的检验。结果 APTT、Fib 及 TT值因标本放置时间的不同而存在差异, PT值不受标本放置时间的影响;PT、APTT 值在一定程度上受离心时间的影响, TT及Fib值不受离心时间的影响。结论 在临床凝血检验时, 标本放置的时间和离心时间影响检验结果, 因此患者的血液标本应当即采即检, 并且在离心的过程中要把握好离心的时间与转速, 防止出现溶血现象。
凝血检验;标本;放置时间;影响因素
随着现代科学技术的发展, 尤其在医学技术的发展上(如免疫学、生物学技术以及生物化学), 并且伴随着各种精密仪器的使用(如高精度的凝血分析仪), 临床应用时, 血液分析结果的准确性与实际结果的符合程度对患者有着重要的意义, 并且作为一种辅助指标被广泛的应用于临床诊断中[1]。凝血检验的项目逐年增多, 其中常见的项目有APTT、TT、PT、Fib等, 相应的, 在临床诊断时, 对于这些项目的检测结果的准确性与精确度有着更加严格的要求, 而且各方面的因素均会对PT、APTT、TT、Fib的结果产生影响[2]。在不同的影响因素下, 随机抽取200例本院体检人员的血液进行凝血检测实验和分析实验结果, 并且对实验结果作如下报告。
1.1 一般资料 从2014年7~10月来本院抽血体检学生的血液样本中随机抽取200例, 所有的血液样本均是健康的血液样本, 并且是在学生空腹且心情放松的状态下抽取的静脉血。学生的年龄19~22岁、性别不限、身高150~175 cm、体重35~65 kg。
1.2 方法
1.2. 1 检测仪器 应用Sysmex CA-1500全自动血凝仪, 检测试剂和质控用品均应用配套产品[3]。DT5-3型低速自动平衡离心机(北京时代北利离心机公司)。
1.2. 2 检测方法 应使用一次性的真空采集管对血液进行采集, 并且将血液标本均分为每管2.7 ml, 与规格为0.109 mmol/L的枸橼酸钠抗凝剂混合(按照9:1的比例)[4], 按照影响因素的不同, 对标本做出相应的处理, 并且做好标记, 然后进行凝血检验项目的检测。PT的正常值为12~16 s, APTT的正常值为24~36 s, TT的正常值为11~18 s, Fib的正常值为2~4 g/L。
1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。P<0.05为差异具有统计学意义。
2.1 标本放置的时间对凝血检测项目的影响 APTT、Fib及 TT值因标本放置时间的不同差异有统计学意义(P<0.05), PT值不受标本放置时间的影响, 差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
2.2 离心时间对凝血检验项目的影响 用3000 r/min的离心机对标本进行离心, 离心5 min与离心10、20 min进行比较, PT 与APTT值显著增高, 差异有统计学意义(P<0.05), 但是对TT与Fib值没有影响, 差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。
2.3 溶血现象对凝血检验项目的影响 将标本放在冷藏柜中-40℃保存30 min, 取出后速溶, 并且溶血的标准为血清中血红蛋白浓度达4 g/L。将标本溶血前后的数值进行比较, 可得出溶血前PT、APTT、Fib的数值明显低于溶血后, TT的值高于溶血后, 差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。
表1 200例标本放置时间的影响比较±s)
表1 200例标本放置时间的影响比较±s)
注:不同放置时间APTT、Fib 及TT值比较, P<0.05
放置时间PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L) 1 h13.25±2.1927.32±1.2517.58±2.323.15±0.61 3 h14.20±2.0229.21±1.3015.88±2.192.78±0.83 5 h13.56±2.1831.45±1.7514.21±2.052.70±0.71
表2 200例标本离心时间的影响比较±s)
表2 200例标本离心时间的影响比较±s)
注:离心5 min与离心10、20 min比较,aP<0.05,bP>0.05
离心时间PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L) 5 min 13.45±1.7625.35±3.7513.87±2.683.88±1.12 10 min 15.19±2.25a26.62±4.21a15.25±2.52b3.52±1.72b20 min 14.32±2.32a28.56±4.66a15.15±2.74b3.48±1.35b
表3 200例标本溶血现象的影响结果比较(±s)
表3 200例标本溶血现象的影响结果比较(±s)
注:与溶血前比较,aP<0.05
溶血情况PT(s)APTT(s)TT(s)Fib(g/L)溶血前13.21±2.3525.23±1.6815.25±2.993.41±0.78溶血后 15.35±2.42a31.21±1.87a11.58±2.54a3.89±0.68a
本研究表明, 标本放置时间、离心时间以及溶血现象对PT、APTT、TT、Fib 等凝血检测项目都有不容忽视的影响。目前, 临床上广泛采用全自动的血凝仪, 但是其检测结果存在很大的差异。为保证临床检验结果的准确性, 排外检验师的技术、患者的生理状态等因素的影响, 结合本实验结果可从以下几个方面入手。
3. 1 标本的存放 血标本最好是在实验室内采血, 严防剧烈震动、日光直射和进入异物。需在室温下保存, 低温会损伤血小板, 使Ⅴ、Ⅺ因子活化, 造成APTT和TT缩短。全血贮存在4~10℃ 不超过2 h, 最好在1 h内分离血浆。
3. 2 标本的离心 富含血小板血浆须在室温20~25℃下, 以200~400 g离心10 min;我国采用800 r/min, 离心15 min。在室温22~24℃ 下, 富含血小板血浆可存放2 h。大多数凝血试验采用缺乏血小板血浆应以 1000 g以上离心 20 min;我国采用2000~2500 r/min, 离心30 min, 以去除全血中的血小板第3因子、血小板第4因子和某些凝血因子。缺乏血小板血浆在室温22~24℃下可存放2 h, 在2~4℃可存放4 h, 在-20℃可存放2周, 在-70℃可存放6个月。
3. 3 溶血情况的预防 标本采集与离心的过程中, 要避免出现溶血的情况。如果在检测前发现标本中出现溶血、血块应该停止检测, 重新采集血液标本[5]。
本次的研究表明, 凝血检验项目的影响因素很多, 作者通过实验发现标本放置的时间和离心时间对检验结果有明显影响, 临床中检验人员严格把握相关时间的合适程度, 将极大地提高检验结果的准确性, 进而为临床患者身体状况提供更准确的判断。
[1] 闰朝春, 安仲武, 薄维波.氯化钙对活化部分凝血活酶时间测定的影响.国际检验医学杂志, 2001, 32(16):1870-1872.
[2] 陈国, 梁荣伟.对比实验分析凝血四项检测的影响因素.国际检验医学杂志, 2012, 43(19):1033-1034.
[3] 林诚, 唐艳平, 刘汉欣, 等.凝血功能试验的全程质量控制.中国热带医学, 2010, 10(12):1470-1471.
[4] 崔海, 崔红花.血标本的分析前质量控制对检验结果的影响因素.中国医学创新, 2009, 6(34):413-414.
[5] 安翠, 王健.研究凝血检验项目的影响因素及对策.中国继续医学教育, 2013, 5(1):25-26.
10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.34.028
2015-06-18]
124221 盛京医院辽东湾分院