高畅 王莲萍 赵宝琴等
摘要[目的]比较保健食品中各辅料间多糖含量的差异以及不同条件对多糖含量的影响。[方法] 对7种稀释剂木糖醇、甘露醇、蔗糖、赤藓糖醇、淀粉、聚葡萄糖、麦芽糊精进行考察,比较各辅料间多糖含量的差异,以及不同的醇沉浓度、不同对照品和不同的冷水浴时间对多糖含量的影响。[结果]将原料提取醇沉,应用苯酚-硫酸比色法进行测定,冷水浴时间在5 min时即能使反应达到完全。分别以葡萄糖、葡聚糖为对照品时,各样品多糖含量影响不大,7种辅料中,木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤藓糖醇中基本不含有多糖,淀粉中含有一定量多糖,聚葡萄糖和麦芽糊精中含有较多的多糖。[结论]研究可为药品和保健品应用药用辅料提供选择的依据。
关键词辅料;多糖 ;保健食品
中图分类号S03文献标识码
A文章编号0517-6611(2015)16-274-03
Study on Polysaccharide Content in Excipients in Health Food
GAO Chang1, WANG Lianping1, ZHAO Baoqin1,2* et al (1. Jilin Modern Chinese Medicine Research Center Co. Ltd., Changchun, Jilin 130000; 2. Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun, Jilin 130000 )
Abstract [Objective] To compare the polysaccharide content among all kinds of excipients in health food, and the affect on polysaccharide content under different concentrations of alcohol precipitation. [Method] Xylitol, mannitol, sucrose, erythritol, starch, polydextrose, malt dextrin were investigated. The difference of polysaccharide content among all kinds of excipients were compared, as well as effects of different alcohol concentration, different CK, different cold bath time on polysaccharide content. [Result] The raw material was extracted and alcohol precipitated, the phenolsulfuric acid colorimetry was adopted for determination. When cold bath time was 5 min allows the reaction to reach full; with glucose, glucan as reference respectively, the polysaccharide content of each sample had little effect, among seven excipients, wherein xylitol, mannitol, sucrose and erythritol are substantially free of polysaccharide, starch contains a certain amount of polysaccharide, polydextrose and maltodextrin contain more polysaccharides than other excipients. [Conclusion] The study can provide reference for selecting excipients for drugs and health food.
Key words Excipients; Polysaccharide;Health food
輔料是指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂,除了活性成分,其安全性已进行了合理的评估,并且是包含在药物制剂中的物质,主要具有增溶、缓控释、助溶、赋形、充当载体、提高稳定性等重要的功能作用,是可能会对药品质量、有效性和安全性有影响的重要成分[1-2],广泛地应用于食品、药品和保健品等行业。
辅料根据来源、作用、给药途径可以分为不同的种类,根据来源分为天然物、半合成物、全合成物;根据作用及用途分为稀释剂、润滑剂、增溶剂、粘合剂等;根据给药途径分为口服、注射、经皮、鼻吸入、眼部给药等[3]。笔者针对7种稀释剂木糖醇、甘露醇、蔗糖、赤藓糖醇、淀粉、聚葡萄糖、麦芽糊精进行考察,比较各辅料间多糖含量的差异,以及不同的醇沉浓度、不同对照品和不同的冷水浴时间对多糖含量的影响。辅料应用较广,目前关于辅料中多糖含量的研究尚未见报道,该研究为药品和保健品应用药用辅料提供选择的依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1辅料。木糖醇,甘露醇,蔗糖,赤藓糖醇,淀粉,聚葡萄糖,麦芽糊精。
1.1.2主要仪器。 TDZ5WS台式低速多管自动平衡离心机,4 000 r/min,长沙维尔康湘鹰离心机有限公司;50 ml离心管;Ultra6100紫外分光光度计,北京普源精电科技有限公司;电热恒温水浴锅,天津市泰斯特仪器有限公司。
1.1.3主要试剂。无水乙醇,北京化工厂;D无水葡萄糖标准品,中国食品药品检定研究院;葡聚糖标准品,武汉百特纯大分子科技有限公司;苯酚,北京化工厂;浓硫酸(比重为1.84);沈阳市民联化工有限公司。
1.2样品的提取
样品量称取如表1所示。
表1各样品称样量
样品称样量∥g样品称样量∥g
木糖醇10.394 6蔗糖10.042 2
甘露醇10.006 9聚葡萄糖10.103 8
赤藓糖醇9.946 2麦芽糊精10.271 6
淀粉10.087 7
称取样品后,将各样品置于100 ml容量瓶中,加水80 ml左右,于沸水浴中加热1 h,冷却至室温后补加水至刻度,将此体积定为V1,混匀后过滤,弃去初滤液,收集余下滤液供沉淀粗多糖。
1.3沉淀粗多糖设定不同的醇沉浓度进行考察,分别为50%、60%、70%、80%、90%,按表2进行取样醇沉。
表2不同醇沉浓度的取样量及加醇量
醇沉浓度∥%取样量(V2)∥ml加醇量∥ml
5044.0
6046.0
7049.3
80416.0
90436.0
各样品按表2进行醇沉,于4 ℃冰箱静置过夜,以转速4 000 r/min离心5 min,弃上清液,残渣用相应的醇浓度10 ml进行洗涤,离心后去除上清液,反复操作3次,残渣用水溶解并定容到25 ml(V3)。
1.4标准曲线的绘制
准确吸取对照品使用液(葡萄糖95.5 μg/ml,葡聚糖112.1 μg/ml)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml,分別置于具塞比色管中,各加水补至1.0 ml,精密加入5%苯酚溶液1.0 ml,摇匀,再精密加入浓硫酸5.0 ml,摇匀,至沸水浴中加热20 min,取出,置冷水浴中分别冷却(5、10、20 min),考察冷水浴时间对标准品吸光度的影响,以相应试剂为空白,在488 nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,含量为横坐标,绘制标准曲线。
1.5样品的测定
样品吸样量(V4)按照吸光度进行调整,补加水到1 ml,以“1.4”的方法测定吸光度值,从标准曲线上得到样品的葡萄糖(葡聚糖)含量,计算样品中的粗多糖含量。
1.6计算公式 多糖含量计算公式如下:
X= (m1×V1×V3 )/(m2×V2×V4 )×100
式中,X为样品中粗多糖含量(以葡萄糖计)(%);
m1为样品测定液中葡萄糖的含量(mg);
m2为样品质量(g);
V1为样品提取液总体积(ml);
V2为沉淀粗多糖所用样品提取液体积(ml);
V3为粗多糖溶液体积(ml);
V4为测定用样品液体积。
2结果与分析
2.1冷水浴时间对吸光度的影响
由图1可以看出,在冷水浴时间为5、10、20 min时,葡萄糖标品和葡聚糖标品吸光度变化不大。
注:a.葡萄糖标品;b.葡聚糖标品。
图1不同冷水浴时间对葡萄糖和葡聚糖标品吸光度的影响
葡萄糖和葡聚糖的线性关系也直观地表明不同冷水浴时间对二者的吸光度影响不大,见表3。
表3不同冷水浴时间对葡萄糖、葡聚糖标品线性关系的影响
处理冷水浴时间∥min线性方程R2
葡萄糖5y=8.486 9x+0.207 50.995 8
10y=8.696 3x+0.197 70.997 4
20y=8.361 3x+0.227 90.998 2
葡聚糖5y=8.363 1x+0.230 00.999 9
10y=8.733 3x+0.209 40.999 6
20y=8.653 0x+0.212 00.999 5
2.2以葡萄糖为对照品各个样品的多糖含量
由图2标准曲线可以得到葡萄糖含量和吸光度的线性关系为y=9.937 2x+0.129 8,R2=0.999 5,结合公式计算出各样品的多糖含量。
图2葡萄糖标准曲线
由表4可以看出,木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤藓糖醇中多糖含量极低,可以忽略不计;聚葡萄糖在醇沉浓度为50%、60%、70%时,多糖含量较低,在醇沉浓度为80%和90%时,多糖含量分别为25.02%和39.05%;麦芽糊精在醇沉浓度50%~90%范围多糖的含量均较高,其中醇沉浓度在80%时,多糖含量最高,为61.16%。
2.3以葡聚糖为对照品各个样品的含量
由图3标准曲线可以得到葡聚糖含量和吸光度的线性关系为y=7.997 3x+0.233 7,R2=0.999 1,结合公式计算出各样品的多糖含量。
由表5可以看出,木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤藓糖醇中多糖含量同样极低,淀粉中的多糖含量在0.3%左右;聚葡萄糖在醇沉浓度为50%、60%、70%时,多糖含量较低,在醇沉浓度为80%和90%时,多糖含量分别为22.62%和47.91%;麦芽糊精在醇沉浓度50%~90%范围内多糖的含量均较高,其中醇沉浓度在80%时,多糖含量最高,为62.85%。
3讨论
药用辅料需要按照药性理论进行选择,以保证药物疗
表4以葡萄糖为对照品各个样品的多糖含量
样品醇沉浓度多糖含量%样品醇沉浓度多糖含量%
木糖醇60%0.017淀粉70%0.584
木糖醇80%0.013淀粉80%0.620
木糖醇90%0.008淀粉90%0.615
甘露醇60%0.033聚葡萄糖50%0.011
甘露醇80%0.021聚葡萄糖60%0.001
甘露醇90%0.005聚葡萄糖70%0.241
蔗糖60%-聚葡萄糖80%25.02
蔗糖80%-聚葡萄糖90%39.05
蔗糖90%-麦芽糊精50%24.41
赤藓糖醇60%0.007麦芽糊精60%34.85
赤藓糖醇80%0.009麦芽糊精70%41.12
赤藓糖醇90%0.010麦芽糊精80%61.16
淀粉50%0.575麦芽糊精90%47.75
淀粉60%0.578
图3葡聚糖标准曲线
效[4],合理地使用辅料,才能保证药物制剂发挥应有的疗效,药用辅料是药物制剂的基础原料和重要组成成分,能够加强药品的稳定性,提高生物利用度以及患者的顺应性,还对药品的识别、提高药物疗效、降低毒副作用有很大关系[5]。因此研究开发、合理应用新辅料,避免影响主料中的有效成分,提供专属性,是研究辅料利用的核心意义。
表5以葡聚糖为对照品各个样品的多糖含量
样品醇沉浓度多糖含量%样品醇沉浓度多糖含量%
木糖醇60%0.008淀粉70%0.328
木糖醇80%0.004淀粉80%0.347
木糖醇90%0.010淀粉90%0.344
甘露醇60%0.039聚葡萄糖50%0.034
甘露醇80%0.008聚葡萄糖60%0.002
甘露醇90%0.009聚葡萄糖70%0.275
蔗糖60%-聚葡萄糖80%22.62
蔗糖80%-聚葡萄糖90%47.91
蔗糖90%-麥芽糊精50%24.10
赤藓糖醇60%0.002麦芽糊精60%31.88
赤藓糖醇80%-麦芽糊精70%47.04
赤藓糖醇90%-麦芽糊精80%62.85
淀粉50%0.324麦芽糊精90%53.78
淀粉60%0.325
该研究结果表明,冷水浴时间在5 min时即能使反应达到完全,分别以葡萄糖和葡聚糖为对照品时,各样品的多糖含量差别不大,醇沉浓度对多糖的含量有一定影响。研究的这7种辅料中,其中木糖醇、甘露醇、蔗糖和赤藓糖醇中基本不含有多糖,淀粉中含有一定量多糖,聚葡萄糖和麦芽糊精中含有较多的多糖。
根据上述结果,可增加对辅料中成分的认识,目前关于辅料成分的研究很少,该研究为糖尿病人或需要摄入多糖的特殊人群服用的药品及保健品选择辅料提供依据,具有一定的意义。由于该研究仅限于7种常用的稀释剂,其他相关辅料在应用选择时,还需进一步研究。
参考文献
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