疫苗免疫操作规程

陈 峰 （乾元浩生物股份有限公司 北京 100070）

张日腾 （山东农业大学动物科技学院 山东泰安 271000）

免疫是减少特异性疫病感染鸡群的较好办法之一，只有鸡群产生足量的针对特异性病原的特异性抗体，才能保证鸡群不受这种病原的侵害。规模化鸡场一定要根据本场的疫情和生产实际，制订适合本场的免疫程序，并严格执行。免疫能否成功受多种因素的影响，如疫苗质量、免疫时间和免疫途径等。而实际生产过程中更加难以控制、变数更多的是免疫操作过程。免疫操作过程涉及到技术问题和人员管理问题。下面就免疫操作技术细节作一交流。

1 基本要求

（1）免疫接种人员必须经过培训达到技术要求。熟练、准确及责任心强。操作前进行人员消毒，并穿戴洁净的工作服。

（2）免疫前要了解鸡群的健康状况，凡有异常情况的不能免疫或延缓免疫（紧急免疫除外），紧急免疫时先健康后疑似再发病。要考虑分群、断喙和大风降温等应激因素，免疫前后加强饲养管理，稳定饲养环境。

（3）免疫前对疫苗进行检查，若有如下情形之一者应弃之不用：疫苗瓶破碎或瓶塞松动；瓶内有异物或发霉，沉淀分层的；没有标签或标识缺失的；过期失效的；品种与免疫程序不一致的；未按规定保存的。

（4）操作流程：

①器械消毒：疫苗免疫注射器、针头和滴瓶等要事先清洗，并用沸水煮15～30分钟消毒，切不可用消毒药消毒，洗衣粉洗涤剂要冲洗干净。

②油乳剂灭活苗要放到40℃温水中预温到25℃或提前放到鸡舍中4～8小时，切不可日晒回温。

③摇匀：将预温的疫苗上下摇动不少于30秒；免疫中要定时进行摇匀。

④调整注射器免疫剂量或滴瓶的免疫剂量，在免疫过程中定时校正。

⑤冻干苗先用2～4mL注射水或稀释液稀释疫苗，严禁直接打开瓶盖造成压力骤增病原失活，同时检测真空度（失空的疫苗不能使用，个别进口苗除外），饮水免疫时疫苗需在水面下打开瓶盖。按照免疫剂量和免疫数量稀释疫苗（活苗不超过30分钟），油苗连接注射器各部位和换气针，并排尽管线中所有空气，保持密闭无漏气现象。

⑥选定免疫部位进行免疫。

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（5）免疫剂量问题：抗体水平随免疫剂量的增大稍有升高，但差异不显著，而机体向外界散毒时间却延长了。

（6）做好免疫记录，完整记录疫苗品名、接种日期、疫苗批号、有效期、生产企业、异常记录和接种者签名。如多项免疫同时操作时，应明确清晰说明标识。

（7）接种后应留意观察鸡群2-3天，并记录鸡群异常反应。

（8）注意事项：

①免疫前后2～3天时间可用抗生素或多维，以减少应激反应（尤其ILT前后用呼吸道药）。

②免疫应在傍晚或晚上进行，减轻应激，饮水宜选择早上进行。

③免疫注射时（一要摇匀，二要预温），如颈部皮下注射，要注射在颈后方1/3处皮下，切不可注射到颈部肌肉内，如注射肌肉则引起鸡缩颈、精神不振、采食下降和消瘦等，如注射靠头部，则引起肿头。胸肌注射时采用7～9号短针头（1.27cm，8周前活苗选7号，8周前油苗和8周后选9号），将针头与注射部位形成15～30°角，朝背部方向刺入胸肌，切忌垂直刺入，以免刺破胸腔损伤内脏。腿部外侧浅层肌肉易伤血管、神经，慎用。

④冻干苗现用现配，苗不离冰，30分钟内用完。

⑤免疫时每栏更换1次针头，检查1次剂量是否准确。

⑥用过的疫苗瓶及时进行消毒，焚烧处理。

2 各种免疫方法的技术要求

2.1 注射

可分为：腿肌注射：小腿外侧肌肉，浅层胸肌注射，颈部皮下注射，腹股沟皮下注射（也可选翅内肌肉、尾部代替）。

颈部皮下：右手握注射器，左手拇指和食指将颈部下1/3处皮肤捏起，右手持注射器向颈后部平行扎入左手拇指和食指提起的皮肤中间，注射正确会感到疫苗充盈，如发现颈部羽毛变湿，说明打漏了，应重新补1针。

腹股沟皮下：一人保定鸡只，鸡头向下，腹部向上，另一人自然地把大腿和腹部皮肤捏起，注射在左手拇指和食指提起的皮肤中间。

浅层胸肌：首先掌握准确的注射部位，左手由后向前逆向拨开羽毛按在龙骨两端，龙骨两侧上三分之一处，即肌肉丰满的地方，针头应与胸骨呈15～30°或平行刺入（视肌肉丰满程度而定）。

注意事项：

①经常核对注射器刻度和实际容量的误差。

②经常晃动疫苗瓶力求疫苗均匀。同时防止有空气进入管道。

③注射时将针头推到位，打出疫苗后缓缓拔出，以免疫苗漏出。

④注射过程要准确，不宜过深；动作不要粗暴，速度要慢。

2.2 刺种（适用于脑炎鸡痘、鸡痘、传贫等）

将接种针充分插入疫苗溶液中（通常10mL专用稀释液和配套刺种针），待针槽充满液体后，将针轻靠内壁，除去附在针上多余液体。轻展鸡翅，将针插入鸡翅翼膜内侧，避开血管。刺种针勿接触鸡的羽毛（擦掉疫苗）和刺种针上带一些绒毛（浪费疫苗），每接种1瓶疫苗更换1枚刺种针，不要使用不合适的针接种疫苗，针槽勿向下，免后7天观察接种部位是否出现结痂。

注意事项：

①疫苗稀释后在30分钟内用完，使用中让疫苗处于冰浴水中，避免手握。

②保证刺种部位无羽毛，防止药液蘸在羽毛上，造成剂量不足，防止手柄进入疫苗造成污染。

③刺种后及时检查接种部位有无结痂情况，无结痂或结痂较差时及时补免。

④混合好疫苗分装于小瓶中液面不少于1cm以浸过刺种针细沟，每刺种1次，都将刺种针在瓶中蘸一下，并经常检查瓶中疫苗液面深度，随时添加疫苗。

2.3 点眼或滴鼻（适用于新城疫、传支、传喉等活苗）

将疫苗用专用稀释液（蒸馏水或生理盐水）稀释分开，通常稀释液中加着色剂（通常1000份疫苗使用30mL稀释液），用事先测定好的滴嘴，每滴约25～30μL。自1～2cm的高度滴入鸡的眼睛或鼻孔内，免疫时滴嘴不得接触眼球，以免损伤眼睛，不得接触手、鸡等，以免污染疫苗。滴鼻免疫时，用指头封住一侧鼻孔，以确保疫苗能更好地从另一侧鼻孔吸入。

注意事项：

①疫苗现配现用，在使用过程中保持冰浴，要求1小时内用完（含传支最好控制在30分钟内），稀释液要保存在低温室或冰箱中与疫苗基本无温差。避免高温（育雏）、全手紧握疫苗瓶或阳光直射疫苗。

②滴入时，把鸡头颈提起，呈水平位置，用手堵住另一侧鼻孔，然后将疫苗滴到眼和鼻内，稍等片刻，使疫苗完全吸入鼻或眼内，如疫苗液外溢，应补滴。滴种过程中，要始终保持滴嘴绝对垂直向下，确保每滴疫苗的接种剂量保持恒定(注意疫苗瓶角度)。

③对反应较重的疫苗，如ILT，使用时可在稀释液中加入1000～2000IU青霉素/mL，或饮水用抗生素，可明显缓解副反应。

④免疫后废弃物应焚烧处理，器具等接触物要消毒。注意疫苗排毒期的卫生消毒工作。

⑤为减小应激，建议在晚上或光线较弱的环境下进行。

2.4 喷雾免疫（适用于新城疫、传支等弱毒苗）

喷雾时将门窗关闭，停止使用风机，喷雾20～30分钟后，方可开窗通风，鸡体有略湿的感觉，1日龄雾滴要大，约80～120μm，喷头距鸡头高度20～30cm。1000只鸡疫苗液体量200～300mL。7日龄以上雾滴要小，约30～50μm，喷头距鸡头高80～100cm，1000羽疫苗液体量300～500mL（用水量取决于喷雾器类型和型号）。

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注意事项：

①喷雾免疫时，应在空气不流动下进行，要关闭通风换气设备一段时间后再免疫。开放鸡舍要防风，窗帘密闭。

②喷雾时，鸡舍内光线应该暗些，鸡群对应激小、活动弱。使鸡群相对集中，最好选择3：00～5：00（肾上腺素低，归肺经）。

③操作人员要保护好自己口鼻眼，以防造成伤害，免疫后，要彻底清洗喷雾设备，内外应用热水清洗。

④喷雾免疫的稀释液禁止使用生理盐水，应用蒸馏水、凉开水。加入6.2mL/L的甘油，雾滴黏附性会更好。

⑤注意鸡舍内环境：气雾免疫时较合适温度是15～25℃，一般不要在低于4℃情况下进行，如果温度高于25℃，雾滴会迅速蒸发而不能进入鸡的呼吸道，在高于25℃环境下，可以先在鸡舍内喷水加湿。天气炎热时气雾免疫应在早晚凉爽时进行，而且舍内RH在70%。

⑥气雾免疫使用剂量应加2～3倍，雾滴选择根据鸡日龄而定。背负式喷雾器选直径0.5～0.6mm的喷头片，雾滴约50μm。

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简单评鉴：两米外手臂汗毛上有1～2滴水滴为合理。涂有油脂的玻璃板在30cm处上下移动2次，看雾滴大小均匀情况。

⑦雾滴行为学：沉降、蒸发和漂流。

不同雾滴、不同湿度下蒸发时间（S）：

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2.5 饮水免疫（适用于新城疫、法氏囊等弱毒苗）

免疫前进行控水，应根据季节不同调整控水时间，天气较热时停水1～1.5h，其他季节2～3h，将冻干苗用稀释液稀释，免疫时水中加入0.2%脱脂粉以消除影响免疫因素，夏天饮水免疫应在早晨进行，这样疫苗不受高温的影响。其他季节可选中午，饮水器必须充足，应保证鸡群同时能饮到疫苗。

影响饮水免疫的3大因素：

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饮水量取决于鸡的日龄。重型鸡和天气炎热季节，饮水量取上限标准：

注：使用乳头饮水器，要排空水线计算水线容水量等。

注意事项：

①饮水免疫前必须将饮水器清洗干净，水线进行冲洗。

②免疫前后24小时内禁用一切消毒剂或抗病毒药。

③饮水器具应放阴凉处，避开阳光和热源。

④夏天选清早进行免疫。饮水温度以18～22℃为宜。

⑤免疫视天气情况控水，等70%～80%鸡只开始寻水时，现配疫苗供水，免疫后30分钟再喂料和正常供水。

⑥确保所有免疫鸡只应在2小时内饮下足够的疫苗剂量。

⑦先在水中加入0.2%～0.5%脱脂奶粉或2%～5%脱脂纯牛奶，20～30分钟后再加入疫苗。用清洁的棒搅拌均匀。应使用清洁且不含氯和铁的自来水或雨水。

⑧使用乳头饮水水线时要选择嗜肠道型毒株。

⑨可将疫苗分2/3、1/3分2次供水，防止过多鸡只漏免。

⑩饮水器具不能使用金属器具，塑料或搪瓷的且必须洁净，保证充足饮水位置和2～3cm的水位深度。

2.6 点口、喷料免疫（适用于法氏囊、球虫等免疫）

（1）原理：疫苗通过经口免疫方法将疫苗食入，在消化道内繁殖，起到免疫效果。球虫在消化道内繁殖，随粪便排出体外，再被小鸡采食，如此3～4个循环，就建立起坚强的免疫。

（2）方法：点口如点眼滴鼻一样，将疫苗滴入口中，待小鸡有吞咽动作后，将鸡放回原位。

喷料时，按每瓶疫苗用1200mL蒸馏水或凉开水比例稀释，每瓶稀释后1200mL疫苗液喷料8kg，将饲料平铺在地面上，把球虫疫苗均匀的喷洒在饲料上，来回多喷几次，搅拌均匀，让鸡在6～8小时内采食干净。

滴口法：将球虫疫苗用凉水稀释后倒入滴瓶中，并计算好每一滴中所含球虫疫苗恰好是1羽份。在滴口过程中要不断摇动滴瓶以使疫苗均匀，且应在较短时间内滴完。

喷料法：让鸡只自由采食2小时。该法操作简单，易掌握。自养场目前多使用此法，应注意喷雾及拌料均匀，如不均易造成副反应。具体操作方法是：①每瓶疫苗(1000头份／瓶)用1200mL的凉开水稀释；②稀释后的疫苗悬液倒入干净的农用喷雾器中或加压式喷雾器中；③每1200mL疫苗溶液喷料8kg，把球虫疫苗均匀地喷在饲料上，来回拌料，喷完后仍需来回拌料，最后用手搅拌饲料，使之均匀；④将拌有疫苗的料平均分配到每个料盘，让鸡采食。全部吃干净约4～5小时。注意加拌有疫苗料之前不要刻意断料，加料前只把料盘中的剩料倒干净即可，以免“抢食”造成每只鸡免疫剂量不均匀。饮水法，让鸡自由采食饮水2小时后实行控水2小时。将球虫疫苗稀释在够鸡1～2小时饮完的凉开水中，加入悬浮剂。将疫苗定量分装饮水器中供鸡只自由饮用。

喷雾法：该法常用于孵化室进行1日龄苗鸡喷雾免疫。

球虫活疫苗的免疫程序，应根据不同的疫苗厂家、不同的垫料及鸡群健康的不同而定。平养鸡舍：首次免疫应在1～10日龄，1羽份／只。若需转群则可根据鸡群状态在转群前作第二次免疫，剂量为首免的1/5羽份。并密切注意鸡群，防止免疫失败或免疫过度。

此外还有浸头、刷肛和涂毛囊等方法。

我们所用疫苗选择要合适，病毒毒株的亲嗜性和自然感染途径决定了免疫途径。毒力先弱后强，与周龄、季节有关，血清型、亚型选择要有针对性。免疫方法、剂量要符合免疫学原理。

免疫前后药物使用要注意不能使用影响免疫力产生的药物。

3 免疫操作辅助动作

免疫效果除了受免疫方法影响外，保定鸡只是免疫成功的前提条件。保定鸡只为了稳定鸡只，减少应激，保证注射部位准确。

4周前可以采用单人操作，左手保定，右手操作。颈部皮下注射时，左手拇指和食指将雏鸡颈后中部皮肤捏起，使皮肤和肌肉之间形成空窝，右手持注射器向尾部方向刺入皮肤，然后推入疫苗后拔出针头，手指会感到有疫苗注入的充实感。点眼滴鼻时，用左手将雏鸡握于手掌中，用拇指和食指固定鸡头平放，使一侧眼鼻向上，中指堵住下侧鼻孔，右手持点眼瓶将小拇指置于鸡头部定位。点口则鸡腹部向上用食指在鸡头后部固定，用拇指置于喙下咽喉部轻压结合处使口张开操作。

4周后，建议专人保定专人操作。保定人要求一手抓住双翅根部，一手抓住2条鸡腿跗关节以上部位，将鸡胸部展开朝向注射人员，注射人员左手从后向前推开羽毛裸露肌肉，并感知肌肉丰满度，将左手下拇指固定于锁骨处，右手持针注入胸肌最丰满处胸肌前三分之一的浅层肌肉中。腿肌注射时，保定人员同样保定鸡只将鸡腿部朝向免疫人员，操作者左手握住注射腿部，稍向内部扭转并打开羽毛，然后注射小腿上部后外侧肌肉内。笼养就简单一些，注射人员可以左手握住双腿跗关节处固定，右手持针注射。

免疫现场要求根据实际情况，避免混乱和漏免现象发生。笼养鸡群每笼超过4只情况下必须转笼，不允许原笼内操作，否则易漏免和重免。