公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水中军团菌污染的调查研究

季顺锋

公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水中军团菌污染的调查研究

季顺锋

目的调查研究苏州相城区公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水中军团菌污染情况。方法于2015年8～9月，采集苏州相城区22家宾馆、5家医疗机构及7家大型商场中央空调冷却水，采用GVPC及BCYE培养基，对其实施嗜肺军团菌分离培养操作，并采取血清分型及相应检定。结果经分析，在冷却塔冷却水当中，其嗜肺军团菌的污染率为26.47%（9/34），分离出军团菌公有11株。在血清分型中以LPI为主，所占比例为37.5%（6/16）。结论苏州相城区公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水存在高的的军团菌检出率，严重威胁市民的健康，特别是相关医疗机构，其军团菌污染率所占比重高于其他，需要对其实施严格控制。

公共场所；冷却塔水；冷凝水；军团菌；调查

上个世纪70年代首次发现军团菌，由于其所具有的普遍性及高病死率，引起人类社会的广泛关注。当前引起军团菌流行及扩散的主要原因为中央空调中的冷凝水及冷却水［1］。为了对公共场所集中空调通风系统冷却水中的军团菌污染情况进行详细了解，苏州相城区于近期实施相关调查工作，将本市相城区医疗机构、大型商场及宾馆饭店等34家单位作为本次调查对象，分析污染现状。

1 资料与方法

1.1 一般资料

针对本次调查，试剂选用主要包括军团菌诊断血清及BCYEQ、GVPL培养基；所采用设备为体视显微镜、滤膜滤器、培养箱及蠕动泵等。

1.2 方法

1.2.1 水样采集 自2015年8～9月，按照随机方式对苏州相城区22家宾馆、5家医疗机构及7家大型商场中央空调冷却水进行采集，采用450 ml无菌玻璃瓶予以密封，对军团菌实施检测。

1.2.2 水样预处理 针对每个冷却塔，均给与450 ml冷却水采集，并利用0.22 μm过滤膜及蠕动泵，对其实施富集操作；然后将滤膜剪碎，并对其实施酸处理，将0.01 mol/L盐酸1 ml加入其中，给与混合，然后实施10～15 min静置，采用0.02 mol/L氢氧化钾中和，将pH值控制在7.0左右［1］。

1.2.3 军团菌的分离培养 将经过酸处理后的混合液，在FVPC琼脂平板上予以接种，利用三角环推匀至干，然后将其放置于浓度为5% CO2培养箱，在37℃恒温下，孵育3～12 d，对乎板上菌落生长情况进行每天观察，对生长的菌落，应及时实施挑取转种操作［2］。

1.2.4 军团菌的培养鉴定 对在GVPC平板上生长的湿润光滑、圆形稍凸及灰白色等特征的可疑菌落进行挑选。并将其在无半胱氨酸BCYEa培养基、血平板及BCYEa培养基实施转种，放置于培养箱当中，在37℃恒温下，培养3 d后，对结果进行观察。如若仅在BCYEa培养基上生长，而在无半胱氨酸BCYEa培养基及血平板上则不生长，则可对其初步判定为军团菌。实施涂片染色镜检操作，进行触酶、胞内荧光、明胶液化及氧化酶试验，利用玻片凝集法，实施血清凝集鉴定分型，利用标准分型表，对结果进行判定［3］。

2 结果

2.1 军团菌检验结果

针对所选取的34家单位，对其中央空调系统冷却水及冷凝水实施军团菌检测。其中，所抽查的22家宾馆/饭店，有6家军团菌检测结果为阳性；在5家医疗结构当中，其中1家被检测出军团菌为阳性；而在7家大型商场当中，其中2家被检测出军团菌为阳性。34家抽选单位当中，有9家单位中央空调系统冷却塔当中被检测出军团菌，其嗜肺军团菌的污染率为26.47%。见表1。

表1 军团菌检验结果 ［n，%］

2.2 血清型检测

针对本次公共场所中央空调冷却塔水检测，其所检测的9家军团菌为阳性的单位中，在血清型分析主要包含有4种类型，分别为Lb、Lm、LP6及LP1。见表2。

3 讨论

军团菌在病死率方面高达20%，其所具有的高病死率及特征受到关注，国内外大量资料证实军团菌为非典型性肺炎的重要病原菌，当前已被WHO列入到相应传染病范畴。军团菌的气溶胶当中利用空气予以传播，当人吸入引起肺泡发病，这成为军团菌病症得以传播的最主要形式。对于气溶胶来讲，其产生途径多种，其中最为重要的则是空调冷却塔，且许多证据均证明其是造成军团菌爆发的主要原因。

表2 苏州相城区公共场所中央空调冷却塔分型结果［n（%）］

针对所选取的34家单位，其中，所抽查的22家宾馆/饭店，有6家军团菌检测结果为阳性；在5家医疗结构当中，其中1家被检测出军团菌为阳性；而在7家大型商场当中，其中2家被检测出军团菌为阳性。34家抽选单位当中，有9家单位中央空调系统冷却塔当中被检测出军团菌，其嗜肺军团菌的污染率为26.47%。此结论与国内外相应空调冷却水军团菌检出率（42%～49%）相比，结果偏低。造成此种状况的主要原因为：（1）军团菌在生长的过程中存在季节性，比如在夏季时，所采集的水样军团菌的阳性检测率为24%，而在秋季时，其所具有的阳性率低于夏季，甚至存在较小的菌株分离率，主要是因为军团局在寒冷的气候下，其生长缓慢。（2）人为因素影响。由于进行采样的季节为秋季，部分空调已经开始停用，因此冷却塔当中的水已经得到消毒，因此所采集的水样，存在难分离菌株的状况。针对军团菌的流行学调查及诊断，均需要对病原菌进行相应的确认工作。针对军团菌的培养来讲，其容易受到杂质及其它形式的微生物污染及抑制，因此，军团菌分离阳性率结果偏低［4］。针对军团菌的流行学调查及诊断来讲，均需要对病原菌进行相应的确认工作。针对军团菌的培养来讲，其容易受到杂质及其它形式的微生物的污染及抑制，因此，培养的军团菌分离出的阳性率比较低。

综上所述，苏州相城区公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水存在高的的军团菌检出率，严重威胁市民的健康，特别是相关医疗机构，其军团菌污染污染率所占比重高，需要对其实施严格控制。

［1］ 商晓春，朱水荣，张睿，等. 杭州市下城区公共场所中央空调冷却水冷凝水军团菌污染调查分析［J］. 中国卫生检验杂志，2008，18（10）：2103-2105.

［2］ 龙一兵，陈文革，陈智，等. 武汉市2007年公共场所中央空调冷却塔水军团菌污染调查［J］. 中国公共卫生管理，2009，25（1）：75-76.

［3］ 侯凤伶， 申志新， 李建国，等. 河北省中央空调冷却水及冷凝水军团菌污染调查［J］. 环境与健康杂志， 2008， 25（4）：984-986.

［4］ 龙彩云，廖国东，许铭清. 茂名市公共场所中央空调冷却水中军团菌污染状况调查［J］. 热带医学杂志，2008，2（2）：177-178.

Investigation on Legionella Contamination in Cooling Tower Water and Condensation Water in the Large Central Air Conditioning in Public Places

JI Shunfeng Centers for Disease Control of Xiangcheng District，Suzhou City，Suzhou 215131，China

Objective Investigation and study of suzhou city in public places large central air conditioning legionella in cooling tower water of condensed water pollution.MethodsFrom Augustto September 2015， acquisition of suzhou city 22 hotel，five medical institutions and seven malls. Central air conditioning cooling water use GVPC and BCYE medium， imposed heavy lung cultivation legionella in operation，and adopt serotyping and corresponding verification.ResultsThrough the analysis of the cooling tower water，its eosinophilic lung legionella pollution rate was 26.47%（9/34），legionella was isolated public 11 strains. In serotyping，its was mainly LPI，the percentage was 37.5%（6/16）.ConclusionPublic places of large central air-conditioning cooling tower water in Suzhou city has high rate of legionella bacteria. It is a serious threat to people's health，especially related to medical institutions，the pollution of legionella pollution rate proportion is higher than other， need strict control.

Public places，Cooling tower water，Condensate， Legionella， Investigation

R126.4

A

1674-9316（2015）30-0015-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2015.30.011

215131 苏州相城区疾控中心