无针正压密闭输液接头的微生物侵入试验研究

周静 徐玉茵 张娟丽 田林奇 李伟甲 河南省医疗器械检验所 （郑州 450003）

0.概述

无针正压密闭输液接头是先进的无针输注系统中的关键产品，可与静脉留置针、中心静脉导管等不同管路配合使用。该接头具有无针连接、自动密闭和正压提供的功能，因此，可以有效维护用药通路、避免穿刺落屑进入液路和血路系统，保护病人静脉血管，同时减轻医护人员劳动强度，减少艾滋病、肝炎等传染性疾病的交叉感染，降低操作人员针刺感染职业风险。蒋坤琼等[1]对63例艾滋病患者锁骨下静脉穿刺成功后应用无针正压密闭输液接头进行输液，在使用期间未发生感染及堵管现象，大大提高了护理工作效率，减少了医护人员职业暴露的风险。也正是因为具有如此多的优势，无针正压密闭输液接头在临床得到了广泛的应用。

然而，无针正压密闭输液接头在临床使用过程中，如果使用前未对接口进行有效消毒或者接头本身存在设计缺陷，接口处的微生物就可能会进入液路和血路系统，造成患者感染，甚至威胁到患者生命。王红梅等[2]对56 例住院患者的输液接头使用情况进行调查，检测一次性输液接头59 套，其中6套检出致病菌，阳性检出率10.17%。输液接头在使用过程中往往根据留置针等配套使用的医疗器械的更换周期而更换，BD公司建议输液接头使用时间为3～5d，多数学者也主张以7d 内为宜，邱英梅等[3]通过试验认为更换输液接头的时间<11d 是安全的。可见一个输液接头在临床的使用时间还是比较长的，这也在一定程度上增加了微生物通过接头进入患者血路的风险，因此，通过进行微生物侵入试验，对接头制造商提供的消毒程序以及接头设计进行综合评价是十分必要的。

我们依据新发布的YY/T0923-2014《液路、血路无针接口 微生物侵入试验方法》[4]对3 个品牌的无针正压密闭输液接头进行了微生物侵入试验。

1.材料与方法

1.1 试验仪器及材料

主要仪器：NU425-600E 生物安全柜（美国NUAIR）、GNP-9270 隔水式恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司）、HTY-IIIA 型集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司）及配套无菌薄膜过滤器、手动可调移液器（芬兰BIOHIT）等。

试验菌株及所用培养基：金黄色葡萄球菌（CMCC 26003）、 铜绿假单胞菌（CMCC 10104）；胰蛋白胨大豆琼脂（TSA,北京奥博星生物技术有限责任公司，批号：20130420），胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB,北京奥博星生物技术有限责任公司，批号：20130308）。

主要试剂：氯化钠注射液（辰欣药业股份有限公司，批号：1406022725）；碘伏消毒液（山东利尔康消毒科技股份有限公司，批号：20131011，有效碘含量4.5g/L～5.5g/L）；医用酒精（75%，郑州晟弘工贸有限公司，批号：20140901）

试验样品：3 个不同国产品牌的样品A、B、C（均为直型）

1.2 试验方法

1.2.1 接种

菌悬液浓度均大于5.0×105cfu/mL，以无菌操作的方式吸取0.01mL 菌悬液接种于样品接口，并自然晾干。

1.2.2 消毒

本试验分别采用两种消毒方式对接头接口进行消毒。

一种是按照《医疗机构消毒技术规范》[5]要求, 用无菌棉签蘸取碘伏原液直接在试样接口处从中心由内向外螺旋式外展涂抹消毒涂擦两遍,作用时间1～2min,待晾干后再进行后续操作。

另一种按照制造商提供的消毒方法：用酒精棉球轻压无针正压密闭输液接头插孔端面，滚动酒精棉球，由中心向外做圆周擦拭消毒，再取一酒精棉球重复以上操作。

1.2.3 注射

用无菌注射器吸取10mL 氯化钠注射液，连接试样接口并进行鲁尔锁定，然后通过接口注射10 mL 氯化钠注射液。

1.2.4 培养计数

收集每个试样的下游流出液，分别进行薄膜过滤，将滤膜菌面朝上贴于TSA 平板上，将平板置于30˚C～35˚C 恒温培养箱中培养3d～7d,逐日观察菌落生长情况，点计菌落数。

1.2.5 重复试验

对每一样品，再重复进行两次1.2.1～1.2.4 的操作，然后连续重复进行1.2.3 的操作，直至离产品标示的最大使用次数(本试验为50 次)还有3次时为止；最后再重复进行3 次1.2.1～1.2.4 的操作。

1.2.6 结果记录

记录每个试验样品每次进行1.2.1-1.2.4 操作的培养计数结果，同时记录仅重复进行1.2.3 操作的培养计数结果（每11 次重复操作的下游流出液合并后过滤培养计数）。

1.2.7 阳性对照与阴性对照

阳性对照：按照1.2.1 接种后不进行消毒，直接进行1.2.3～1.2.4 的操作。

阴性对照：不接种菌悬液，直接进行1.2.2 ～1.2.4 的操作。

1.2.8 对选用的两种试验菌株，分别取试验样品按照上法进行操作。

2.结果

按照上述试验方法分别对样品A、B、C 进行试验，结果见表1。

阴性对照均无菌生长，两种消毒方式下，试验结果相同。

表1.

3.讨论

YY/T 0923-2014 《液路、血路无针接口微生物侵入试验方法》中，阳性对照是直接取试验样品按照1.2.1 进行操作，然后立即以无菌操作的方式将其投入TSB 试管中，置于28˚C～32˚C 恒温培养箱中培养14d。阴性对照是取试样以无菌操作的方式直接投入TSB 试管中，置于28˚C～32˚C 恒温培养箱中培养14d。本试验中，阳性对照与阴性对照未采取该方法，而是更大程度上与试验样品的操作步骤保持一致，排除了人为操作等其他因素的影响。而且，阳性对照的样品未经消毒出现阳性结果也说明了微生物通过接头接口进入患者血路的可能性。

接头设计以及生产工艺的优劣直接影响着微生物侵入患者血路的几率大小，本试验中三种样品的接头接口处活塞与壳体之间的缝隙大小明显不同，缝隙过大势必增加微生物进入血路的风险。另外，不同接头其残余液体量也有明显差异，如美国可来福接头双腔残余液体量为0.33mL,国产输液接头双腔残余液体量为0.7 mL,三腔则为1.05 mL。如果在输注血制品、脂肪乳等营养液体后不及时充分冲管，这些残留液体就会成为最好的培养基，细菌很快大量繁殖，待下次输液时随液体进入血液循环，当患者抵抗力下降或细菌数达到一定浓度时便会引起感染[2]。

另外，有效的消毒过程以及医护人员严格遵循无菌操作规程也是减少微生物通过输液接头进入液路和血路系统，避免患者感染的重要保证。临床常用的消毒剂有0.5%碘伏液和75%酒精，本试验分别用这两种消毒剂对染菌的接头接口进行消毒，在严格执行消毒程序后，都能达到很好的消毒效果。蒋坤琼等[1]在为艾滋病患者输液前均用75%的酒精棉球消毒无针正压密闭输液接头3 遍，再接已排好气的输液器，并且在输液器与输液接头的连接处，用无菌酒精纱布及包布包裹，每日更换一次，在半年的使用时间内未发生感染及堵管现象。李娟等[6]则使用0. 5%的活力碘对接头进行消毒，在使用正压无针密闭输液接头对14 例造血干细胞移植病人输液过程中也未发生1例感染。Ye'benes[7]等通过分析大量临床数据报道无针密闭输液接头经75%酒精严格消毒后可在24 小时内安装24 次，6 天共使用144 次而未被污染。还有一点值得注意的是，保证0.5%碘伏液消毒效果的重要因素之一是消毒后待干，但碘伏液的待干时间比酒精长，尤其是接头的缝隙处待干时间更长，因此，临床上常用75%的酒精消毒无针接头[8]。

在按照YY/T 0923-2014 进行试验的过程中，我们还发现一个可能影响试验结果的因素。因接头与输液器连接的端面（染菌处）光洁度很高，在接种过程中，吸取0.01mL 菌悬液接种于接口，在表面张力的作用下，菌悬液很容易形成球形液滴，不能完全模拟正常使用情况下微生物通过接口缝隙进入接头的状态。

总之，无针正压密闭输液接头因其具备的优势在临床上被广泛应用的同时，制造商还是应该进一步提高接头设计与生产工艺，如使活塞端面与壳体更加密闭及尽量减小接头残留液体量等；而在接头使用过程中，医护人员则需严格遵循无菌操作规程及对接头实施有效的消毒，以减少甚至避免接头引发的感染。

[1] 蒋坤琼，黄荟，梁小薇.正压型无针密闭输液接头在艾滋病治疗中的应用及护理[J].内科，2011，6(4)：381-382.

[2] 王红梅，刘媛媛，王婉秋，刘芳菲.输液接头微生物检测结果分析及护理对策[J].护理学杂志，2014，29(12)：7-9.

[3] 邱英梅，邹国亮，叶虹.无针正压输液接头应用在静脉留置中更换时间的研究[J].中华医院感染学杂志，2011，21(23)：2740-2741.

[4] YY/T 0923-2014，液路、血路无针接口微生物侵入试验方法[S].国家食品药品监督管理总局.

[5] WS/T367-2012，医疗机构消毒技术规范[S].中华人民共和国卫生部.

[6] 李娟，高磊.正压型无针密闭输液接头在造血干细胞移植病人中的应用及护理[J].现代护理，2004 ，10(12)：1145-1146.

[7] Ye’ benes JC，Delgado M，Sauca G，etal.Efficacy of three different valve systems of needle-free closed connectors in avoiding access of microorganisms to endovascular catheters after incorrect handling[J].Crit Care Med，2008，36(9)：2558-2561.

[8] 黄小亮.改良无针接头维护方法预防导管相关性感染[D].吉林大学硕士学位论文，2011 年4 月.