饲料中的粗纤维、NDF、ADF和ADL含量的快速测定方法

张崇玉 王保哲 张桂国 （山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 271000）尹朋辉 路绪明 （泰安市新农方舟饲料有限公司 山东 泰安）

饲料中的粗纤维、NDF、ADF和ADL含量的快速测定方法

张崇玉 王保哲 张桂国 （山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 271000）尹朋辉 路绪明 （泰安市新农方舟饲料有限公司 山东 泰安）

本文介绍了用聚酯纤维滤网袋法测定饲料中的粗纤维、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和木质素(ADL)含量的快速测定方法。聚酯纤维滤网袋法具有简单、方便、快速和准确度的特点，可以进行纤维成分的批量快速测定。

饲料中的粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和木质素(ADL)是粗饲料、糠麸类、杂粕类等饲料中碳水化合物的主要成分，主要由半纤维素、纤维素、木质素等。到目前为止，国家颁布了国家标准饲料中粗纤维的含量测定(过滤法GB/T6434-2006/ISO6865: 2000)；国家标准饲料中中性洗涤纤维(NDF)的测定(GB/T20806-2006)；国家农业行业标准饲料中酸性洗涤纤维(ADF)(NY/T1459-2007)；国家标准饲料中酸性洗涤木质素(ADL)的测定(GB/T20805-2006)。国标法操作过程相当繁杂，过滤时间长，效率低。聚酯纤维滤网袋法不需要抽滤或过滤设备和步骤，可以进行纤维成分的大批量的快速测定[1][2]，也可用于粮油检验粮食中粗纤维素含量测定、植物类食品中粗纤维的测定、食品中不溶性膳食纤维的测定，为生产和科研的饲料纤维成分的测定提供了新的测定方法。

1 聚酯纤维滤网袋法测定饲料中的粗纤维含量的方法

1.1 适用范围

本方法适用于粗纤维含量大于10g/kg(1%)的饲料。

1.2 测定原理

饲料用一定浓度和量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用醚、丙酮除去脂肪，经高温灼烧扣除灰分的量，所余量称为粗纤维。其中包括全部的纤维素和大部分的木质素及少量的半纤维素。

1.3 试剂及材料

1.3.1 盐酸溶液 c(HCI)=0.5 mol/L，取41.7ml的浓盐酸稀释定容1000ml。

1.3.2 硫酸溶液 c(H2SO4)=0.13±0.005 mol/L，取6.9ml的浓硫酸稀释定容1000ml。

1.3.3 氢氧化钾溶液 c(KOH)=0.23±0.005 mol/L，取

12.5 g氢氧化钾溶解定容1000ml。

1.3.4 丙酮。

1.3.5 石油醚 沸点范围40～60℃

1.3.6 聚酯纤维滤网袋 用高质量的聚酯细丝(聚对苯二甲酸乙二醇酯，细丝的直径为34µm)织成孔径为20µm的均匀一致的聚酯超细网后，制成为5cm×6cm长方形的聚

酯网袋，三面塑封口，一面开口，用特殊记号笔编号，称重。

1.4 仪器和设备

1.4.1 粉碎设备 样品粉碎能完全通过筛孔为1mm(18目)筛。

1.4.2 分析天平 感量0.1mg。

1.4.3 干燥箱 可控温度在105±2℃。

1.4.4 干燥器 蓝色硅胶为干燥剂。

1.4.5 马福炉 温度可调控，在500±25℃。

1.5 测定步骤

1.5.1 样品称量 在已知质量(m1)的5cm×6cm聚酯纤维滤网袋(用特殊记号笔编号)中，准确称取1.000g左右的样品(m)，用塑封机封口。每个样品做2个平行样测定。(样品脂肪含量大于10%，须预先脱脂：将装有样品的滤网袋用石油醚或丙酮浸泡10分钟；碳酸盐含量超5%，需要预先除去碳酸盐：将装有样品的滤网袋用0.5mol/L盐酸溶液浸泡10min)。

1.5.2 酸处理 将20个样品滤网袋放入3L大烧杯中，加入2000ml配好的硫酸溶液(0.13±0.005mol/L)，煮沸30±1min。在煮沸期间要保持溶液浓度不变。煮沸完毕取出滤网袋，用水冲洗干净后把水挤压干。

1.5.3 碱处理 将滤网袋放入原来的大烧杯中，加入2000ml配好的氢氧化钾溶液(0.23±0.005mol/L)，继续微沸30±1min，煮沸完毕取出滤网袋，用水洗至中性，把水挤压干净。

1.5.4 丙酮处理 将滤网袋放烧杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出纤维滤网袋并在通风橱凉干。

1.5.5 烘干：将滤网袋放在烘箱内105℃烘干1h，取出立即称重m 2 。

1.5.6 测定灰分含量 (单一饲料经酸碱处理后的残渣中灰分一般小于1%，可忽略不计；若去除残渣中的灰分含量，则按以下步骤测定灰分含量)，将纤维滤网袋放入已知质量的坩埚中，把坩埚放在电炉上炭化至无烟，然后转移到马福炉中500℃灰化30min，取出在干燥器内冷却至室温，称重，测定灰分重(m3)。

滤网袋的质量，m3为

灰分质量。

2 聚酯纤维滤网袋法测定饲料中性洗涤纤维(NDF)含量的方法

2.1 适用范围

本方法适用于各种单一饲料和配合饲料。

2.2 测定原理

饲料经中性洗涤剂煮沸处理，可以洗涤分解大部分细胞内容物，如脂肪、蛋白质、淀粉和糖类等，而不溶解的残渣称为中性洗涤纤维(NDF)，包括半纤维素、纤维素、木质素和少量硅酸盐和少量蛋白质等。

2.3 试剂及材料

2.3.1 中性洗涤剂溶液(3%十二烷基硫酸钠溶液)：称取18.6g乙二胺四乙酸二钠)和6.8g四硼酸钠(放人1000ml烧杯中，加适量蒸馏

2.3.2 丙酮 又名二甲基酮，易燃，易挥发，分子量58.08。

2.3.3 聚酯纤维滤网袋 用高质量的聚酯细丝(聚对苯二甲酸乙二醇酯，细丝的直径为34µm)织成孔径为20µm的均匀一致的聚酯超细网后，制成为5cm×6cm长方形的聚酯网袋，三面塑封口，一面开口，用特殊记号笔编号、称重。

2.4 仪器和设备

同粗纤维的测定。

2.5 测定步骤

2.5.1 样品称量 在已知质量(m1)的5cm×6cm聚酯纤维滤网袋(用特殊记号笔编号)中，装入样品，准确称取样品0.5～1.0g左右(m)，准确至0.0001g，用塑封机封口。每个样品做2个平行样测定。(样品脂肪含量大于10%，须预先脱脂：将装有样品的滤网袋用丙酮浸泡10～20min)。

2.5.2 中性洗涤剂处理 将20个样品滤网袋放入3L大烧杯中，加入2000ml配好的中性洗涤剂2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期间要保持溶液浓度不变。煮沸完毕取出滤网袋，用水冲洗干净后把水挤压干。

2.5.3 丙酮处理 将滤网袋放烧杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出纤维滤网袋并在通风橱凉干。

2.5.4 烘干 将滤网袋放在烘箱内105℃烘干1h，取出立即称重m 2 。

2.5.5 灰分的测定 (如果NDF包含灰分，则此步骤不做；若NDF去除灰分，可按以下步骤测定残渣中的灰分含量)。将纤维滤网袋放入已知质量的坩埚中，把坩埚放在电炉上炭化至无烟，然后转移到马福炉中500℃灰化30min，取出在干燥器内冷却至室温，称重，测定灰分重(m 3 )。

2.5.6 测定结果的计算 中性洗涤纤维(NDF)(含灰分)的含量或者中性洗涤纤维(NDF)(不含灰分)的含量式中：m为试样质量，为中性洗涤纤维残渣和滤网袋的质量，m1为滤网袋的质量，m3为灰分质量。

3 聚酯纤维滤网袋法测定饲料酸性洗涤纤维(ADF)含量的方法

3.1 适用范围

本方法适用于各种单一饲料和配合饲料。

3.2 测定原理

饲料用酸性洗涤剂煮沸处理，可以洗涤分解大部分细胞内容物，如脂肪、蛋白质、淀粉和糖类和半纤维素等，而不溶解的残渣称为酸性洗涤纤维(ADF)，包括纤维素、木质素和少量硅酸盐等。

3.3 试剂及材料

3.3.1 0.5mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取27.9ml(约49g)浓硫酸，慢慢加入已装有500ml水的1000ml容量瓶中，冷却后定容。

3.3.2 酸性洗涤剂溶液(2%十六烷基三甲基溴化铵溶液)称取20g十六烷基三甲基溴化铵，溶于1000ml 0.5mol/L硫酸溶液。

3.3.3 聚酯纤维滤网袋 用高质量的聚酯细丝(聚对苯二甲酸乙二醇酯，细丝的直径为34µm)织成孔径为20µm的均匀一致的聚酯超细网后，制成为5cm×6cm长方形的聚酯网袋，三面塑封口，一面开口，用特殊记号笔编号、称重。

3.4 仪器和设备

同粗纤维的测定。

3.5 测定步骤

3.5.1 样品称量 在已知质量(m1)的5cm×6cm聚酯纤维滤网袋(用特殊记号笔编号)中，装入样品，准确称取样品1.000g左右(m)，用塑封机封口。每个样品做2个平行样测定。(样品脂肪含量大于10%，须预先脱脂：将装有样品的滤网袋用丙酮浸泡10～20min)。

3.5.2 酸性洗涤剂处理 将20个样品滤网袋放入3L大烧杯中，加入2000ml配好的酸性洗涤剂2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期间要保持溶液浓度不变。煮沸完毕取出滤网袋，用水冲洗干净后把水挤压干。

3.5.3 丙酮处理 将滤网袋放烧杯中用丙酮浸泡10min去除剩余脂肪，取出滤网袋并在通风橱凉干。

3.5.4 烘干 将滤网袋放在烘箱内105℃烘干1h，取出室内冷却1min，立即称重m2。

3.5.5 灰分的测定 (如果ADF包括灰分，则此步骤不需要做；如果ADF去除灰分，则按下列步骤残渣中的灰分含量)。将纤维滤网袋放入已知质量的坩埚中，把坩埚放在电炉上炭化至无烟，然后转移到马福炉中500℃灰化30min，取出在干燥器内冷却至室温，称重，测定灰分重

3.5.6 测定结果的计算 酸性洗涤纤维(ADF)(含灰分)的含量或者酸性洗涤纤维(ADF)(不含灰分)的含量式中：m为试样质量，为酸性洗涤纤维残渣和滤网袋的质量，为滤网袋的质量，m3为灰分质量。

4 聚酯纤维滤网袋法测定饲料酸性洗涤木质素(ADL)含量的方法

4.1 适用范围

本方法适用于各种单一饲料和配合饲料。

4.2 测定原理

饲料分别经酸性洗涤剂和浓硫酸处理，可以分解细胞内容物，如脂肪、蛋白质、淀粉、糖类、半纤维素、纤维素等，而不溶解的残渣称为酸性洗涤木质素。

4.3 试剂及材料

4.3.1 0.5mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取27.9ml(约49g)浓硫酸，慢慢加入已装有500ml水的1000ml容量瓶中，冷却后定容。

4.3.2 12mol/L硫酸(H2SO4)溶液 取666.0ml(约1235.5g)浓硫酸，慢慢加入已装有300ml水的烧杯中，搅拌冷却后定容1000ml容量瓶中。

4.3.3 酸性洗涤剂溶液(2%十六烷基三甲基溴化铵溶液)称取20g十六烷基三甲基溴化铵，溶于1000ml 0.5mol/L硫酸溶液。

4.3.4 聚酯纤维滤网袋 用高质量的聚酯细丝(聚对苯二甲酸乙二醇酯，细丝的直径为34µm)织成孔径为20µm的均匀一致的聚酯超细网后，制成为5cm×6cm长方形的聚酯网袋，三面塑封口，一面开口，用特殊记号笔编号、称重。

4.4 仪器和设备

同粗纤维的测定。

4.5 测定步骤

4.5.1 样品称量 在已知质量的聚酯纤维滤网袋(5cm×6cm)上，用特殊记号笔编号，装入样品，准确称量样品重(m)1.000g左右于袋中，封好口。每种样品做2个平行样。(样品脂肪含量大于10%，须预先脱脂：将装有样品的滤网袋用丙酮浸泡10～20min)。

4.5.2 酸性洗涤剂处理 将20个样品滤网袋放入3L大烧杯中，加入2000ml配好的酸性洗涤剂2000ml，煮沸60±1min。在煮沸期间要保持溶液浓度不变。煮沸完毕取出滤网袋，用水冲洗干净后把水挤压干。

4.5.3 浓硫酸处理 将滤网袋放在烘箱内105℃烘干30min，取出。将以上的滤网袋中的残渣揉碎后，放入烧杯中，加12.0mol/L的硫酸在20～25℃下浸泡3h(用玻璃棒打碎结块，每30min搅拌1次)，取出用水洗净至中性，挤干水分。

4.5.4 烘干 把滤网袋放入105℃烘箱中烘1h，取出立即称重(m 2 )。

4.5.5 灰分测定 (残渣灰分少可省略此步骤；若去除残渣中的灰分，则按以下步骤测定灰分)。将每个的滤网袋连同残渣放入已知质量坩埚中，先在电炉上炭化至无烟，后放入500℃马福炉中烧30min，取出放干燥器冷却至室温称重，计算灰分重(m3)。计算：ADL%=(m2-m3)/m ×100%。式中：m为试样质量，m2为浓硫酸处理后滤网袋及残渣的烘干质量，m3为灰分质量。

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1007-1733(2015)09-0020-03

2015–05–05）