史宝岩冷雪秋安红宇
(1.吉林省通榆县动物检疫站,吉林通榆 137200;2.吉林省通榆县动物疫病预防控制中心,吉林通榆 137200)
绵羊隐孢子虫病的病因、诊断和防制措施
史宝岩1冷雪秋1安红宇2
(1.吉林省通榆县动物检疫站,吉林通榆 137200;2.吉林省通榆县动物疫病预防控制中心,吉林通榆 137200)
隐孢子虫是一种球虫类原生寄生虫,属顶复亚门,兽医和医学领域的人们对其重要性的认识逐渐提高。目前在哺乳动物上至少发现并命名了7种:鼠隐孢子虫、猫隐孢子虫、犬隐孢子虫、豚鼠隐孢子虫、牛隐孢子虫、人隐孢子虫,以及反刍动物和人隐孢子虫(C.parvum),后者是引起新生羔羊和犊牛腹泻及动物源性传染病的原因。
绵羊;隐孢子虫病;病因
反刍动物和人隐孢子虫主要侵染小肠,通过可使大多数哺乳动物感染的孢子化卵囊(平均直径为4.5~5.5µm),经由粪-口途径在宿主间传播。厚壁卵囊被动物摄入后,紧接着发生脱囊并释放出可侵入肠上皮细胞和进入快速无性增殖(分裂繁殖)的子孢子。Ⅰ型分裂体通过释放出可侵入新的肠道上皮细胞的裂殖子而实现再循环。合子经有性繁殖(配子生殖)形成,后大多合子形成具有厚壁的可随粪便排出的孢子化卵囊。小部分合子(约20%)形成薄壁卵囊在小肠中破裂;释放的子孢子侵入其他的肠道上皮(自体传染)。当C.parvum被动物和人少量摄入时,这些增殖期(Ⅰ型分裂体和薄壁卵囊)及孢子的形成过程确保了其在宿主小肠上皮细胞的快速增殖。
新生羔羊(4~10d)感染C.parvum后会引起大量水泻。饲养较好的动物,症状通常持续5~7d后能够缓解恢复。腹泻会引起患畜脱水,食欲不振,腹腔扩张,倦怠。动物摄入卵囊后,卵囊在肠道中脱落分散入侵肠道的3~7d,会频繁发作腹泻,高峰期每克粪便中的卵囊数量范围105~107个。临床症状消退后,卵囊的排泄可能还要持续好几天。某些情况下,羔羊可能在腹泻症状发作的2~3d内死亡,在暴发的病例中,C.parvum通常与其他的肠道病原体的感染有关。临床感染中,总的寄生虫含量可能超过1010个卵囊,排泄期7~10d。成年羊可隐性感染,脱落少量的卵囊,特别是在分娩期前后,因此作为储藏宿主对易感的羔羊群具有感染力。
C.parvum寄生在羔羊远端的空肠和回肠,有时也会侵染盲肠、结肠和直肠。大体观察可见黄棕色、水样的肠内容物,肠道内气体扩张,伴随肠炎及结肠炎,有时黏膜表面可能看起来并无异常。
病理组织学检查显示短的、融合的肠绒毛,表面覆有内源性阶段的反刍动物和人隐孢子虫。正常上皮被柱状或立方上皮取代,导致肠绒毛萎缩,微绒毛变短。隐窝常伸长,固有层有单核细胞和中性粒细胞浸润。肠道吸收能力显著下降,导致营养不良和腹泻,但该寄生虫损伤肠道并引起临床症状的机制还不明确。
常通过显微镜检查染色后的粪涂片来进行诊断,普遍采用改良齐-尼染色法(MZN)、金胺荧光染色法(AF)或异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体(mAb)来显示卵囊。MZN技术中,卵囊染色呈淡粉红色,背景呈复染的蓝绿色。而AF和mAb法中分别可见黄绿色和苹果绿荧光,背景大部分呈黑色或蓝色。如果粪便中卵囊量很少的话,则有必要使用漂浮法或沉淀法(福尔马林-乙醚,福尔马林-乙酸乙酯)。之后应尽快检查卵囊,或将媒介溶液稀释以防卵囊在漂浮液中塌陷变形。
粪便中隐孢子虫抗原可通过酶联免疫吸附试验(ELISA)或免疫荧光试验(IFA)来进行检测,IFA技术与传统染色方法相比,有更好的特异性和敏感性。高敏感性的聚合酶链式反应(PCR)试验也已被开发利用于粪便中卵囊的检测,但是一些技术需要有纯化的卵囊,而且容易受环境污染物的影响。这些技术可以证明是否存在卵囊,但不能确定它们是否具有感染性。近期由于组织培养技术的发展,这个问题已经被解决了,来确定寄生虫感染细胞的能力,同时我们可以利用反转录PCR提高试验的敏感性,但是,必须要有纯化的卵囊。
基于实验环境下感染新生反刍动物,磺胺喹恶啉、卤夫酮、拉沙里菌素和巴龙霉素具有部分或已经证实的抗隐孢子虫活性,但关于羊的资料较少。乳酸卤夫酮已获证书用于治疗和防控犊牛隐孢子虫病,但不可用于小反当兽。治疗可以减轻临床症状,减少卵囊的排出,但不会净化感染。为按照推荐0.1mg/kg剂量给药,动物给药前要准确称重,因为该药已证明仅在2倍的治疗剂量就会产生毒性,且禁止用于极度脱水和食欲不振的动物。在羔羊控制性试验感染情况下,饮入超免羊初乳或牛初乳可以减轻临床症状和降低卵囊的排出。当有致病性细菌共同存在情况下,应给予合适的抗生素治疗。腹泻羔羊应被隔离,提供干净育床以减少感染的扩散,且如果可能,新生羔羊应与可能被感染的老龄羊分开饲养。利用氨类消毒剂或蒸汽清洁法对围栏和饲料消毒,可降低环境中卵囊的数量。
草地上控制卵囊是不可能的,但因反刍动物和人隐孢子虫非宿主特异,建议牛粪在用于草地之前对其进行充分发酵或堆肥处理,这样做一方面卵囊可在超过55~60℃被杀死,同时会增加氨的浓度。此外,卵囊同样也会因干裂而无法存活。
[1] 彭匡时.绵羊羔隐孢子虫病[J].中国动物检疫,1997,(2):33-34.