鸡马立克氏病的检疫和防制对策

梁彩云 王渝薇 王金升

(宁夏吴忠市红寺堡区农牧和科学技术局,宁夏吴忠751900)

鸡马立克氏病的检疫和防制对策

梁彩云 王渝薇 王金升

(宁夏吴忠市红寺堡区农牧和科学技术局,宁夏吴忠751900)

鸡马立克氏病是鸡常见的一种淋巴组织增生性疾病,以外周神经、性腺、虹膜、各种脏器、肌肉及皮肤的单核细胞浸润和肿瘤的形成为特征,因此它又有多发性神经炎、内脏型淋巴瘤及皮肤白血病等名称。它是由疱疹病毒科的B亚群疱疹病毒引起的,具有高度的传染性。病鸡常呈现消瘦和肢体麻痹等症状。本病具有高度的病死率,并造成机体高度的免疫抑制,对养鸡业的危害很大。

鸡马立克氏病;诊断;防制对策

1 现场诊断

（1）流行特点：鸡是本病的主要宿主，其他禽类很少发病。病鸡和带毒鸡是本病的主要传染源。带毒鸡能持续排毒76周；病鸡脱落的皮屑、羽毛是主要的传染物。易感鸡与传染源间主要通过气源、性途径传播病毒。本病在鸡群中广泛传播，鸡于性成熟时几乎都被感染，但发病率与鸡群的状况、感染病毒的毒力等因素有关。自然感染的病例通常爆发于3～4周龄，但大部分严重的病例则出现在2～5月龄。幼龄鸡比成年鸡易感，母鸡的易感性比公鸡高。本病的死亡率与发病率基本相当。

（2）临诊症状和病理变化：根据临诊症状和病变发生的主要部位不同，本病可分为四种类型：神经型（古典型）、内脏型（急性型）、眼型和皮肤型。但有时可以混合发生。

神经型：主要侵害外周神经，如坐骨神经、臂神经、迷走神经、颈部神经、腹神经等，一般都是单侧受害或一侧轻一侧重。由于侵害神经不同，临诊症状也各异，如侵害坐骨神经者，出现步态不稳及一肢前伸一肢后伸的特征性劈叉姿势；侵害臂神经者，则出现被侵害一侧翅下垂；侵害迷走神经者，则出现失声、嗉囊扩张和呼吸困难；侵害颈神经者，则出现头下垂或歪斜；侵害腹神经者，则出现腹泻。受害神经增粗，呈黄白色或灰白色，横纹消失，有时呈水肿样外观。组织学变化特点是肿瘤性质的淋巴样细胞（主要为T淋巴细胞）侵润。

内脏型：多呈爆发式发生，常见于幼龄鸡群，尤其是40～60日龄的鸡群。病初大批鸡精神委顿、食欲下降、体态消瘦，几天后部分鸡出现肢体麻痹、共济失调，多数病例表现为脱水。产蛋鸡有腹泻及腹部膨胀现象，病程可达1月左右。法氏囊萎缩，这一病变通常具有诊断意义。内脏器官中以卵巢的受害最为常见，其次是脾、肾、肝、心、肺、肠、肠系膜、腺胃和肌胃，在这些器官组织中长出大小不等的肿瘤块，呈灰白色，质地坚硬而致密，与原有组织的色彩相间存在，表现为大理石样的花纹。

眼型：由于眼神经受损，表现为视力障碍，虹膜呈灰白色，瞳孔边缘不整齐，常称“灰眼病”。

皮肤型：受害部位多在大腿，形成小结节或瘤状物，多不被察觉。

2 实验室检验

（1）病料的采集和处理：①病鸡的血液：一般用血液来分离病毒。血液中的病毒是与白细胞结合的，在采血时应加肝素抗凝。在实际工作中，可用全血或白细胞分离病毒。②肿瘤结节：无菌采取肿瘤结节，剪碎，用磷酸盐缓冲液冲洗，去红细胞，然后消化制成单细胞悬液，离心沉淀细胞，再以磷酸盐缓冲液或细胞培养液悬浮，调整细胞浓度为106个/0.2ml，立即进行病毒的检测。③羽囊和皮肤：感染鸡的羽囊和皮肤用于游离病毒的分离。其处理方法是用乙二胺四乙酸钠缓冲液（蔗糖7.462g，磷酸二氢钾0.052g，磷酸氢二钾0.125g，L-谷氨酰胺0.083g，牛血清白蛋白1.00g，乙二胺四乙酸钠0.200g，用蒸馏水配制成100ml）冲洗、溶解并稀释成1：5（质量体积比），超声波裂解2～3min，然后经650g离心至悬液清亮，再用经小牛血清处理的滤膜（0.45µm）过滤。

（2）病原分离鉴定：①雏鸡接种：将细胞结合性或游离性病毒材料经腹腔接种易感的1日龄雏鸡，2～10周后检查鸡的神经、脏器，如肉眼或镜检时见有马立克氏病毒引起的特异性病变，即可证实有马立克氏病毒的存在。②细胞培养：细胞结合性病毒常用鸡肾细胞（CK）和鸡胚成纤维细胞（CEF）分离。待细胞长成单层后，接种病料，24h后更换培养液，以后隔日更换一次，6～8d后计算空斑数。游离性病毒可用鸡肾细胞增殖。其方法是将培养24～48h的原代鸡肾细胞的培养液弃去，接种病料处理液，每瓶0.2ml，37℃培养30min，然后再加培养液，以后每隔48h更换一次液体。接种6～8d后计算病毒的蚀斑形成单位/ml。③鸡胚接种：将经处理的被检材料接种4日龄鸡胚卵黄囊或11～12日龄鸡胚的绒毛尿囊膜。接种后分别于12～14d或4～6d，在鸡胚的绒毛尿囊膜上产生痘斑。

（3）免疫琼脂扩散试验：A.试验准备。抗原；标准阴、阳性血清。琼脂板的制备：用含8%氯化钠的0.01mol/LpH7.4磷酸盐缓冲液配制1%的琼脂溶液，置于水浴中加热，使其充分溶化后制板备用。B.操作方法。用打孔器在琼脂平板上打7个孔，其中中央1个孔（孔径4mm），外周6孔（孔径3mm），孔间距为3mm。用已知抗原检查未知抗体时，中央孔加入已知抗原，周围孔分别加入待检血清和标准阴、阳性血清。用已知抗体检查未知抗原时，中央孔加入标准阳性血清，周围孔分别加入待检病料的处理液及标准抗原。C.结果判断。被检材料与标准抗原或抗体孔之间形成清晰的沉淀线，并与周边已知抗体或抗原孔的沉淀线相互融合者为抗体或抗原阳性，不出现沉淀线的则判为阴性。

3 防制对策

免疫接种是有效预防该病的重要手段，因此孵化场要及时对出壳24h以内的雏鸡进行免疫接种，马立克氏弱毒疫苗用稀释液稀释后每只雏鸡0.2ml颈部皮下注射，为确保疫苗价效稀释后的疫苗必须在1～2h内使用完毕，如稀释后的疫苗放置时间过久，其免疫价效严重下降。建议7日龄后再免疫一次。

强化日常观察与检测，如发现异常应及时进行处理或反映；为有效加强对该病的控制，在饲养过程中应随机采取血清进行抽样检疫，通过羽毛囊髓做琼脂扩散沉淀反应查看鸡群中是否包括阳性患者，如发现阳性鸡应对鸡群进行净化处理，严防该病传播与流行。

孵化种蛋用0.1%的新洁尔灭溶液或0.2%的福尔马林溶液对鸡蛋外壳进行消毒；并且对孵化室和孵化设备进行定期消毒，以熏蒸消毒为最佳，孵化室环境消毒可采用10%生石灰水或1-2%氢氧化钠进行消毒。对引入鸡苗时应坚持全进全出的原则，对不同日龄、不同的来源的雏鸡要进行分批分群饲养。

动物卫生监督部门要加大相关知识的宣传，提高养殖户对雏鸡免疫接种重要性的认识，增强防范意识，不购买无免疫证明的雏鸡。还要加强育雏点和销售环节监管，要求育雏点办证经营、持证销售，对达不到防疫要求的无证育雏点和未经免疫销售雏鸡的行为要果断取缔、严厉打击，确保养殖户的根本利益。同时，要定期不定期的对鸡场、散养户综合性防疫制度及防疫措施落实情况进行检查，有效预防鸡马立克氏病的发生。

[1]冯元璋，周碧君，古飞霞.鸡马立克氏病的流行特点与防制对策[J].中国家禽，2006，28（23）：43-45.