嘧菌酯对马铃薯早疫病菌Alternaria solani的毒力及防效

肖春芳，田恒林，沈艳芬，高剑华，张远学，陈家吉

（中国南方马铃薯研究中心，恩施土家族苗族自治州农业科学院，湖北 恩施 445000）

嘧菌酯对马铃薯早疫病菌Alternaria solani的毒力及防效

肖春芳，田恒林，沈艳芬，高剑华，张远学，陈家吉

（中国南方马铃薯研究中心，恩施土家族苗族自治州农业科学院，湖北 恩施 445000）

采用组织分离法从西南北部马铃薯主产区的马铃薯罹病叶片分离得到63株早疫病菌，并通过分生孢子萌发法测定了其中30株早疫病菌对嘧菌酯的敏感性。结果显示，测试的30株马铃薯早疫病均对嘧菌酯保持高度敏感，陕西安康、湖北恩施和四川西昌马铃薯早疫病菌对嘧菌酯的平均EC50值分别为0.024 4、0.025 6和0.037 6 mg/L，3地总菌株的平均EC50值为0.029 0 mg/L。在田间药效试验中，25%嘧菌酯悬浮剂用量为450 g/hm2，对马铃薯早疫病的防效为84.71%，与43%戊哇醇悬浮剂300 g /hm2的防效之间差异不显著，但显著高于50%多菌灵可湿性粉剂1 500 g/hm2和80%代森锰锌可湿性粉剂3 000 g/hm2的防效，且增产效果显著。以上结果表明，嘧菌酯可作为该区域内生产上防治马铃薯早疫病的优选药剂。

嘧菌酯；马铃薯早疫病；毒力；防治效果

马铃薯早疫病是由茄链格孢（Alternaria solani Sorauer）侵染引起的真菌性病害，主要危害叶片和薯块。该病发生范围广，被认为是仅次于马铃薯晚疫病的第二大病害，一般可造成20%～30%产量损失[1-3]。西南北部地区是我国马铃薯主产区，近年来马铃薯早疫病的发生呈上升趋势。目前，在马铃薯生产中抗早疫病的品种较少，防治早疫病的主要措施是依赖化学药剂[4]。为了寻找本区域内防治马铃薯早疫病的有效药剂，研究试用了25%嘧菌酯悬浮剂。

嘧菌酯是一种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，通过抑制病原菌线粒体的呼吸作用来阻止其能量合成，是一种较新作用机理的杀菌剂，兼具保护和治疗双重功效。该药剂不仅能抑制菌丝生长和孢子萌发，还能显著抑制真菌分生孢子，具有杀菌谱广、杀菌活性高、对非靶标作物和环境安全等特点[5-7]。嘧菌酯对大部分真菌都具有很好的控制作用，目前已在80余种作物的多种病害防治上获得登记，已成为全球作物病害综合防控的重要药剂。该药剂在马铃薯病害化学防控中具有重要的作用，既可防治由致病疫霉引起的晚疫病，又能防控由链格孢菌引起的早疫病[8-9]。通过测定嘧菌酯对本区域内马铃薯早疫病菌毒力效果，并对比其他常规药剂的田间防效，旨在进一步明确嘧菌酯对马铃薯早疫病的防效。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试马铃薯品种：米拉。

供试药剂：25%嘧菌酯悬浮剂（瑞士先正达作物保护有限公司），43%戊哇醇悬浮剂（德国拜耳作物科学公司），50%多菌灵可湿性粉剂（江苏镇江建苏农药化工有限公司），80%代森锰锌可湿性粉剂（北京燕化永乐农药有限公司）。

供试培养基：PCA培养基：马铃薯100 g/L，胡萝卜100 g/L，蔗糖10 g/L，琼脂15 g/L。

1.2 试验方法

1.2.1 病原菌的分离、纯化与鉴定 在发病季节采集具有典型早疫病症状的马铃薯叶片，采用单病斑组织分离方法，对所得菌株进行形态学鉴定，并采用科赫氏法则进行回接验证，最终得到试验所需菌株[9]。

1.2.2 病原菌对嘧菌酯的敏感性测定 采用分生孢子萌发法测定嘧菌酯敏感性[9]。嘧菌酯浓度分别为0、0.001、0.01、0.10、1.00和10.00 mg/L，每个浓度3次重复。利用软件DPS 7.05计算EC50值。嘧菌酯的敏感性用相对抑制分生孢子萌发率50%的有效浓度（EC50）表示。

1.2.3 嘧菌酯对马铃薯早疫病的田间防治试验 试验地设在恩施市三岔乡，其海拔1 000 m，肥力中等，所有试验小区的栽培条件基本一致。试验播种时间为2014年2月27日，第1次施药于5月28日，第2次施药于6月4日，第3次施药于6月11日，6月30日收获测产。试验设5个处理，分别是25%嘧菌酯悬浮剂450 g/hm2，43%戊哇醇悬浮剂300 g/hm2，50%多菌灵可湿性粉剂1 500 g/ hm2，80%代森锰锌可湿性粉剂3 000 g/hm2，清水处理作对照。每处理4次重复，采用随机区组排列，共计20个小区，小区面积13.34 m2，每小区设5行，共80株，走道0.4 m。在马铃薯早疫病发病初期进行施药，施药方法为常规喷雾，每个小区用药液量为1.2 kg。施药器械为“金原野”3WBD-20背负式电动喷雾器。

调查各试验小区马铃薯早疫病发病情况，药前调查病情级别，并于第1次药后7 d、第2次药后7 d、第3次药后7 d和14 d，共调查5次。采用每个小区5点取样法，每个点调查10株，计算病情指数和防治效果，对防效进行显著性分析（新复极差法）。收获时各小区计产，并进行产量比较。病害分级标准采用《田间药效试验准则》[10]。

病情指数=[∑（各级病叶数×相对级数值）（/调查总叶数×9）]×100；

防治效果（%）=[1-（对照区药前病情指数×处理区药后病情指数）/（对照区药后病情指数×处理区药前病情指数）]×100。

2 结果与分析

2.1 病原菌的分离与鉴定

从西南北部3个调查地区共采集样品经分离纯化后最终得到63株分离物，其中陕西安康地区16株、湖北恩施地区20株，四川西昌地区27株。所有分离物经25℃光照培养10 d后，显微镜下观察均能发现分生孢子。观察发现分生孢子形态及大小，与《中国真菌志》[11]所记载特征相吻合。分生孢子梗单生或簇生，分生孢子单生，暗褐色，倒棍棒形至长椭圆形，大小为85～180 µm×15～19 µm，有多个纵横隔膜，有长喙。采用科赫氏法则进行回接验证，均能使叶片发病，初呈深褐色或黑色小斑点，逐渐扩大，7～10 d后能观察到典型的同心轮纹状病斑，且能从发病叶片上再次分离到早疫病菌。

2.2 嘧菌酯对马铃薯早疫病菌的毒力测定

测定了嘧菌酯对陕西安康10株、湖北恩施10株和四川西昌10株马铃薯早疫病菌的毒力（图1），结果显示：所有测试菌株对嘧菌酯均表现高度敏感，没有抗性菌株出现。在测定陕西安康菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.007 6～0.049 8 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.6倍；在湖北恩施菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.009 3～0.056 3 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的6.1倍；在四川西昌菌株毒力测定中，嘧菌酯EC50介于0.011 9～0.062 6 mg/L之间，最不敏感菌株的EC50值是最敏感菌株的5.3倍。

来源于3个地点的马铃薯早疫病菌对嘧菌酯的敏感性水平基本相同，均没有检测到抗性菌株。陕西安康、湖北恩施和四川西昌马铃薯早疫病菌对嘧菌酯的平均EC50值分别为0.024 4、0.025 6和0.037 6 mg/L，3地总菌株的平均EC50值为0.029 0 mg/L。其中，EC50在平均值以下的菌株有18株，占总数的60%。嘧菌酯对不同地区马铃薯早疫病菌各10株敏感性测定EC50值的分布依次按＜0.02 mg/L、（0.02～0.04）mg/L、＞0.04 mg/L 3个区域划分，陕西安康和湖北恩施早疫病菌株的比例均为50%、30%和20%，四川西昌早疫病菌株的比例分别是40%、20%和40%（表1）。

2.3 嘧菌酯对马铃薯早疫病的防治效果

田间药效试验结果表明，在喷施25%嘧菌酯悬浮剂后对马铃薯早疫病具有良好的防治效果，增产效果明显。末次调查，25%嘧菌酯悬浮剂对早疫病的防效为84.61%，与药剂43%戊哇醇悬浮剂防效间差异不显著，但与80%代森锰锌可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂防效间差异都达到显著水平。测产结果（表2）表明，在施用25%嘧菌酯悬浮剂防治马铃薯早疫病后，马铃薯产量达到31 087.5 kg/hm2，增产效果显著，比清水对照增产9.84%，但与其他药剂处理后对马铃薯的增产效果相互之间无显著性差异。

3 讨 论

研究结果表明，嘧菌酯表现出对马铃薯早疫病较好的室内抑菌效果和田间防效。试验中选择陕西安康、湖北恩施、四川西昌等西南北部马铃薯主产区的30株马铃薯早疫病菌菌株，未出现对嘧菌酯产生抗性的菌株，嘧菌酯对该区域内早疫病菌群体的毒力EC50为0.007 6～0.062 6 mg/L，与周园、Pasche等报道的早疫病菌对嘧菌酯的敏感性基线EC50范围（0.01～0.13 mg/L）接近[8,12]。从田间防效来看，25%嘧菌酯悬浮剂对马铃薯早疫病的防治效果显著，能有效地控制马铃薯早疫病的发生与危害，除了与43%戊哇醇悬浮剂的防效之间差异不显著以外，与其他两种药剂50%多菌灵可湿性粉剂、80%代森锰锌可湿性粉剂防效间差异均达到显著水平。与清水对照相比，25%嘧菌酯悬浮剂增产效果显著，其增产率也高于其他常规杀菌剂，这与嘧菌酯对早疫病菌表现出较高的室内毒力测定结果一致。因此，嘧菌酯可作为该区域内防治马铃薯早疫病的优选药剂。

嘧菌酯作为一种防治马铃薯早疫病的新型杀菌剂，虽然具有杀菌范围广、对非靶标作物和环境安全、促进植物生长等优点，但也属于高抗性风险药剂，且单一药剂的频繁使用会导致病菌抗药性的产生，如番茄叶霉病菌、小麦白粉病、黄瓜霜霉病和瓜类灰霉病等都发现了抗药性菌株[6-7,13-15]。为了减少抗药性的产生，建议将嘧菌酯与其他作用机制不同的杀菌剂轮换或混合使用。受采样地点、样本数量的限制，选择的马铃薯早疫病菌数量基数较小，田间药效试验为一年一点试验，嘧菌酯对西南北部地区马铃薯早疫病的长期防效有待进一步研究。

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（责任编辑：夏亚男）

Toxicity and Control Efficacy of Azoxystrobin against Potato Early Blight Alternaria solani

XIAO Chun-fang，SHEN Yan-fen，TIAN Heng-lin，GAO Jian-hua，ZHANG Yuan-xue，CHEN Jia-ji

（Enshi South-China Potato Research Center, Enshi Academy of Agricultural Sciences, Enshi 445000, PRC）

Sixty-three strains of Alternaria solani, a causal agent of potato early blight, were isolated from leaves of potato plants growing in major regions of potato production in northern southwest China with tissue isolation method. The sensitivity of thirty isolates among them to azoxystrobin was detected by conidial germination method. The results showed that all of them were highly sensitive to azoxystrobin, mean EC50values of A. solani strains from Ankang in Shaanxi, Enshi in Hubei, Xichang in Sichuan to azoxystrobin were 0.024 4, 0.025 6 and 0.037 6 mg/L respectively, and the average EC50value of all these strains was 0.029 0mg/L. In the feld trial, the control effcacy of azoxystrobin 25% SC applied at the rate of 450 g/hm2against potato early blight was 84.71% and compared with that of tebuconazole 43% SC applied at the rate of 300g/hm2, the difference was not signifcant; however, its control effcacy was signifcantly higher than those of the fungicides carbendazim 50% WP applied at the rate of 1500 g /hm2and mancozeb 80% WP applied at the rate of 3000 g /hm2. Moreover, its application increased the yield markedly. So azoxystrobin could be used as a preferred pharmaceutical for controlling potato early blight in the region.

azoxystrobin; potato early blight; toxicity; control effcacy

S435.32

A

1006-060X（2015）08-0046-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2015.08.015

2015-07-03

现代农业产业技术体系专项资金资助（CARS-10）

肖春芳（1986-），女，湖南岳阳市人，农艺师，主要从事马铃薯遗传育种及病虫害综合防控工作。

田恒林