山栀茶化学成分的研究*

乔 里， 汪石丽， 李勇军， 刘俊宏， 王永林， 刘丽娜**

(1.贵阳医学院 药学院 贵州省药物制剂重点实验室， 贵州 贵阳 550004；2.贵阳医学院附院 临床医学研究中心, 贵州 贵阳 550004；3.贵阳医学院 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心， 贵州 贵阳 550004；4.贵州省骨科医院 药剂科， 贵州 贵阳 550004)



山栀茶化学成分的研究*

乔 里1,2， 汪石丽3，4， 李勇军3， 刘俊宏3， 王永林1， 刘丽娜1**

(1.贵阳医学院 药学院 贵州省药物制剂重点实验室， 贵州 贵阳 550004；2.贵阳医学院附院 临床医学研究中心, 贵州 贵阳 550004；3.贵阳医学院 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心， 贵州 贵阳 550004；4.贵州省骨科医院 药剂科， 贵州 贵阳 550004)

目的： 对山栀茶的化学成分进行研究。方法： 应用正、反相硅胶和Sephadex LH-20等柱层析方法分离纯化山栀茶，根据化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果： 从山栀茶中分离得到7个化合物，分别鉴定为(1)丁香脂素-4,4′-双-O-β-D-葡萄糖苷、(2)紫丁香苷、(3)3, 4, 5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、(4)丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(5)异落叶松树脂醇-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(6)南烛木树脂酚-9′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、(7)芥子醛葡萄糖苷。结论： 化合物(2), (4),(5), (7)为首次从该植物中分离得到，为山栀茶质量控制指标性成分的选择提供了依据。

化学成分；结构鉴定；海桐花科；山栀茶

山栀茶为海桐花科海桐花属植物光叶海桐(PittosporumglabratumLindl.)的干燥根，收载于2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中，具有镇静、散瘀、止痛等作用，常用于神经衰弱，风湿性关节炎等症的治疗[1-2]。山栀茶主产地为贵州、广东、广西、湖南等，另外香港的大帽山和嘉道理农场暨植物园也有少量分布[3]。文献报道山栀茶以三萜、木脂素、环烯醚萜及其苷类为主要成分，其醇提取物具有镇痛和降压作用[4-7]。为了开发我国的植物资源，寻找新的有效药物，对山栀茶不同极性部位进行了镇痛活性筛选，结果显示在大孔树脂柱层析水洗脱、70%乙醇洗脱和95%乙醇洗脱3个部位中，70%乙醇洗脱部位对醋酸引起的疼痛和热板引起的疼痛抑制作用较为明显，为山栀茶镇痛有效组分，但其化学成分未知。本文对该镇痛有效组分进行类化学成分研究，从中分离得到了7个化合物，发现了一个镇痛作用较为突出的化合物，其中有4种化合物为首次从该植物中分离得到，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

RUDOLPH型自动旋光测定仪(A201102)，JEOL ECX 500MHz核磁共振波谱仪(日本电子株式会社)，ACQUITY-TQD串联质谱仪，ACQUITY UPLC 超高液相色谱仪(美国沃特世公司)。D101大孔树脂(青岛海洋化工厂)，色谱用硅胶(200～300目)及硅胶GF254预制板为青岛海洋化工厂产品，MCI 75～150 (m为日本三菱化学公司产品；Sephadex LH-20为瑞士Pharmacia Biotech公司产品；其他化学试剂均为分析纯。山栀茶药材采收于贵州省，经贵阳中医学院生药学教研室王世清教授鉴定为海桐花科海桐花属植物光叶海桐的根。

1.2 提取与分离

取山栀茶药材粗粉11 kg，用70%乙醇回流提取3次，合并提取液，减压回收溶剂，浓缩至浸膏，浸膏用水混悬，上D101大孔树脂层析柱，依次用水、70%乙醇、95%乙醇洗脱，分别用水洗脱、70%乙醇洗脱、95%乙醇洗脱3个部位。取70%乙醇洗脱部位400 g，经硅胶柱层析以乙酸乙酯-甲醇(10∶0→6∶4，加0.1%醋酸)进行梯度洗脱，得组分S1～S3。组分S3经RP-18、Sephadex LH-20、正相硅胶等反复柱层析分离纯化后，得到化合物1(87 mg)、2(20 mg)、3(60 mg)、4(85 mg)、5(7 mg)及6(15 mg)。S1依次经MCI、Sephadex LH-20、硅胶等柱层析分离纯化得到化合物7 (30 mg)。

2 结构鉴定

化合物(1) 白色粉末, ESI-MSm/z：741.3[M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ6.92 (4H, s, H-2, 6, 2′, 6′), 4.88 (2H, d,J= 3.0 Hz, H-7, 7′), 3.12 (2H, m, H-8, 8′), 4.00 (2H, dd,J= 9.0, 3.0 Hz, H-9a, 9′a), 4.15 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.76 (12H, s, 3, 3′, OCH3-5,5′), 5.78 (2H, d,J= 6.6 Hz, Glc-H-1, 1′), 4.30-4.39 (12H, m, 葡萄糖2～6位质子信号)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD) δ 153.8 (C-3,5,3′,5′), 139.1 (C-4,4′), 134.7 (C-1,1′), 105.0 (C-2,2′), 105.0 (Glc-C-1,1′), 104.4 (C-6,6′), 86.7 (C-7,7′), 77.5 (Glc-C-5,5′) ,77.0 (Glc-C-3,3′), 74.9 (Glc-C-2,2′), 72.7 (C-9,9′),70.5 (Glc-C-4,4′), 61.7 (Glc-C-6,6′), 57.4 (OCH3-3,3′,5,5′), 54.7 (C-8,8′)。所得数据与文献[8]报道的丁香脂素-4,4′-双-O-β-D-葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为丁香脂素-4,4′-双-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(2) 白色粉末, ESI-MSm/z: 417.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (600 MHz，CD3OD) δ 6.75 (2H, s, H-3, 5) , 6.55 (1H, d,J= 15.9 Hz,H-7) , 6.33 (1H, d, t,J= 15.9, 5.5 Hz, H-8), 4.23 (2H, d,J= 5.5 Hz, H-2,9), 3.86 (6H, s, OCH3-2), 3.35～3.70 (6H, m, 葡萄糖2～6位质子信号)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.1 (C-2), 154.1 (C-6), 135.7 (C-1), 135.1 (C-4), 131.1 (C-8), 129.8 (C-7), 105.2 (C-3), 105.2 (C-5), 63.4 (C-9), 56.8 (2-OCH3) , 105.1 (Glc-1), 78.2 (Glc-5), 77.6 (Glc-3), 75.5 (Glc-2), 71.4 (Glc-4), 62.4 (Glc-6)。所得数据与文献[9]报道的紫丁香苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为紫丁香苷。

化合物(3) 无色粉末, ESI-MSm/z: 477.2 [M-H]-.1H-NMR (600 MHz, CD3OD) δ 6.46 (2H, s, H-2, H-6), 4.96 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-1″) , 4.79 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-10), 4.02 (2H, d,J= 9.2 Hz, H-6′), 3.94 (1H, d,J= 9.6 Hz, H-4″), 3.87 (1H, d,J= 2.6 Hz, H-2″), 3.81 (6H, s, OCH3-3, 5), 3.75 (1H, d,J= 9.5 Hz, H-4″), 3.70 (3H, s, OCH3-4), 3.63～3.53 (4H, m, 葡萄糖2～6位质子信号), 3.42 (2H, s, H-5″)。13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ156.0 (C-1),154.8 (C-3, C-5), 134.5 (C-4), 110.8 (C-1″), 103.1 (C-1′), 96.2 (C-2, C-6), 80.5 (C-3″), 77.9 (C-3′), 77.8 (C-2″), 77.0 (C-4″), 74.9 (C-2′, C-5′), 71.6 (C-4′), 68.8 (C-6′), 65.3 (C-5″), 61.2 (OCH3-4), 56.7 (OCH3-3, 5)。 所得数据与文献[10]报道的3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-呋喃芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(4) 无色粉末, ESI-MSm/z: 579.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.69 (2H, d, H = 2, 6), 6.63 (2H, d, H-2′, 6′) , 4.86 (1H, d,J= 7.2 Hz, Glc-H-1″), 4.74 (1H, m, H-7), 4.69 (1H, m, H-7′), 4.25 (2H, m, H-9a, 9′a), 3.88 (2H, m, H-9b, 9′b), 3.81～3.83 (12H, m, OCH3-3, 5, 3′, 5′), 3.75 (1H, m, Glc-H-6″a), 3.64 (1H, m, Glc-H-6″b), 3.44 (1H, m, Glc-H-2″), 3.38 (2H, m, Glc-H-3″, 4″), 3.33 (1H, m, Glc-H-5″, 3.28 (2H, m, H-8, 8′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 154.4 (C-3, 5), 149.3 (C-3′, 5′), 139.5 (C-1), 136.1 (C-4′), 135.5 (C-4), 133.0 (C-1′), 105.3 (Glc-C-1″), 104.8 (C-2, 6), 104.5 (C-2′, 6′), 87.6 (C-7′), 87.1 (C-7), 78.3 (Glc-C-5″), 77.8 (Glc-C-3″),75.7 (Glc-C-2″), 72.9 (C-9, 9′), 71.3 (Glc-C-4″), 62.5 (Glc-C-6″), 57.0 (OCH3-3′, 5′), 56.8 (OCH3-3, 5), 55.7 (C-8′), 55.5 (C-8)。所得数据与文献[11]报道的丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为丁香脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物(5) 无色粉末, ESI-MSm/z: 521.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.77 (1H, d,J= 1.5Hz, H-2′), 6.72 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.62 (1H, s, H-2), 6.61 (1H, d,J= 1.5 Hz, H-6′), 6.15 (1H, s, H-5), 4.09 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.82 (1H, m, H-8′), 3.78 (6H, s, OCH3-3, 3′), 3.63 (2H, m, H-9), 3.33 (2H, m, H-9′), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位质子信号), 2.80 (2H, m, H-7), 2.04 (1H, m, H-8), 1.77 (1H, m, H-7′)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3), 147.1 (C-3′), 145.8 (C-4), 145.1 (C-4′), 138.7 (C-1′), 134.4 (C-6), 129.1 (C-1), 123.1 (C-6′), 117.4 (C-5), 116.1 (C-5′), 114.3 (C-2′), 112.3 (C-2), 105.2 (C-1″), 78.1 (C-5″), 77.9 (C-3″), 75.2 (C-2″), 71.6 (C-4″), 69.5 (C-9′), 65.2 (C-9), 62.8 (C-6″), 56.4 (OCH3-3, 3′), 47.9 (C-8′), 45.9 (C-7′), 39.5 (C-8), 33.9 (C-7)。所得数据与文献[12]报道的异落叶松树脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为异落叶松树脂醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(6) 无色粉末， ESI-MSm/z:587.2 [M-H]-.1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.56 (1H, brs, H-8), 6.41 (2H, brs, H-2,6), 4.41 (1H, d,J= 5.9 Hz, H-4), 4.22 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-1″), 3.83 (1H, m, H-3′a), 3.79 (3H, s, OCH3-7), 3.82 (1H, m, Glc-H-6a), 3.72 (6H, s, OCH3-3′,5′), 3.63 (2H, Glc-H-6b, H-2′a), 3.54 (1H, dd,J= 7.7, 14.7 Hz, H-2′b), 3.43 (1H, d,J= 6Hz, H-3′b), 3.33 (3H, s, OCH3-5), 3.30～3.20 (6H，葡萄糖2 ～6位质子信号), 2.70 (1H, dd,J= 4.0, 15.1 Hz, H-1a), 2.60 (1H, dd,J= 11.8, 14.5 Hz, H-1b), 2.05 (1H, brs, H-3), 1.69 (1H, brs, H-2)。13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ 148.9 (C-3′, 5′), 148.6 (C-7),147.5 (C-5), 139.4 (C-6), 138.9 (C-1′), 134.4 (C-4′), 130.1 (C-9), 126.4 (C-10), 107.8 (C-8) , 106.8 (C-2′, 6′), 104.8 (Glc-C-1), 78.2 (Glc-C-5), 77.9 (Glc-C-3), 75.2 (Glc-C-2), 71.6 (C-3′), 71.3 (Glc-C-4), 66.1 (C-2′), 62.8 (Glc-C-6), 60.1 (OCH3-5), 56.8 (OCH3-3′,5′), 56.5 (OCH3-3), 46.7 (C-3), 42.8 (C-4), 40.5 (C-2), 33.9 (C-1)。所得数据与文献[13]报道的南烛木树脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为南烛木树脂酚-9′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物(7) 无色粉末， ESI-MSm/z: 415.1 [M+HCOO]-.1H-NMR (400 MHz, C5D5N) δ 9.86 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-9), 7.49 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 7.04 (2H, s, H-2, 6) , 6.95 (1H, dd,J= 7.8, 15.8 Hz, H-8), 4.54～4.21 (6H, m, 葡萄糖2～6位质子信号), 4.02 (1H, m, 糖上OH), 3.81 (6H, OCH3-2), 糖上的端基质子信号被吡啶溶剂峰覆盖。13C-NMR (100 MHz, C5D5N) δ 193.7 (C-9), 153.9 (C-7), 153.2 (C-3, 5), 138.5 (C-4), 130.2 (C-1), 128.4 (C-8), 107.4 (C-2, 6), 104.2 (C-1′), 79.1 (C-3′), 78.5 (C-5′), 76.1 (C-2′), 71.6 (C-4′), 62.6 (C-6′), 56.6 (OCH3-2)。 所得数据与文献[14]报道的芥子醛葡萄糖苷波谱数据基本一致，故鉴定该化合物为芥子醛葡萄糖苷。

3 讨论

通过对山栀茶镇痛有效组分进行了化学成分研究，从中分离鉴定得到7个化合物。其中，据Jung等[15]报道，以5、10 mg/kg口服给药后，丁香脂素-4,4′-双-O-β-D-葡萄糖苷(1)在醋酸扭体法和热板法两个模型中均显示出较强的镇痛活性。故认为山栀茶镇痛有效组分的镇痛作用与丁香脂素-4,4′-双-O-β-D-葡萄糖苷(1)的存在有关。由于未见相关报道，其余化合物是否具有镇痛活性尚待进一步研究。本论文为寻找山栀茶的镇痛活性成分、确定山栀茶及其相关制剂的质量控制方法奠定了实验基础。

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(2015-02-09收稿，2015-03-14修回)

中文编辑： 周 凌；英文编辑： 刘 华

Research On the Chemical Constituents ofPittosporumglabratum

QIAO Li1,2, WANG Shili3,4, LI Yongjun3, LIU Junhong3, WANG Yonglin1, LIU Lina1

(1.GuizhouProvincialKeyLaboratoryofPharmaceutics,SchoolofPharmacy,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.ClinicalResearchCenter,theAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 3.EngineeringResearchCenterofMinistryofEducationforDevelopmentandApplicationofEthnicMedicineandTCM,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 4.PharmaceuticalPreparationSection,OsteologicalHospitalofGuizhouProvince,Guiyang550004,Guizhou,China)

Objective: To study the chemical constituents of the root ofPittosporumglabratum. Methods: Various column chromatographic techniques including silica gel column chromatography (CC), reversed phase C18 CC and Sephadex LH-20 CC were used to isolate the constituents ofP.Glabratum, whose structures were determined by physicochemical property and spectroscopic analysis. Results: Seven compounds were isolated fromP.glabratumand their structures were identified as (1)syringaresinol-4,4'-bis -O-β-D-glucopyranoside, (2)syringin, (3)3,4,5-trimethoxyphenol-1-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside, (4)syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside, (5)isolariciresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside, (6)lyoniresinol 9′-O-β-D-glucopyranoside and (7)sinapaldehyde glucoside. Conclusions: Compounds (2), (4), (5), and (7) are isolated fromP.glabratumfor the first time and can be regarded as the chemical markers forP.Glabratumt'squality control．

chemical constituents; structural determination;Pittosporaceae;Pittosporumglabratum

国家科技支撑计划课题(2013BAI11B01); 贵州省科学技术基金项目(20102217); 贵州省中药现代化科技产业研究开发专项基金黔科合重G字(2013) 4001); 贵阳医学院院基金(2012021号)

时间：2015-05-21

http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150521.1251.017.html

R284.1

A

1000-2707(2015)05-0447-03

**通信作者 E-mail:yylln815@126.com