联合检测尿中IL-18与Cys C在危重患者急性肾损伤中的早期诊断价值*

陆金帅，李 楠，李 思，黄佳星(.新疆维吾尔自治区人民医院重症医学一科，乌鲁木齐 8000；.中山大学附属第一医院重症医学科，广州 50080；.广东省东莞市清溪医院重症医学科 5660)



·论 著·

联合检测尿中IL-18与Cys C在危重患者急性肾损伤中的早期诊断价值*

陆金帅1，李 楠1，李 思2，黄佳星3(1.新疆维吾尔自治区人民医院重症医学一科，乌鲁木齐 830001；2.中山大学附属第一医院重症医学科，广州 510080；3.广东省东莞市清溪医院重症医学科 523660)

目的 探讨尿中白细胞介素-18(IL-18)和尿中胱抑素C(Cys C)对危重患者急性肾损伤(AKI)临床上早期诊断的价值。方法 选取中山大学附属第一医院重症医学科2012年1月至2013年12月收治的危重患者为研究对象，每天收集尿标本，持续7 d，应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测尿液标本中的IL-18和颗粒增强免疫比浊法测定尿液标本中的Cys C。根据测量结果分为3组：A组(IL-18>95 pg/mL)、B组(Cys C>1.3 g/mL)，C组(IL-18>95 pg/mL和Cys C>1.3 g/mL)。另选同期健康体检者作为D组(IL-18≤95 pg/mL和Cys C≤1.3 g/mL)。结果 按α′=0.006 8检验标准，A、B、C 3组与D组AKI患病率不同，A、B、C 3组的AKI患病率远远高于D组，但A、B、C 3组之间AKI患病率几乎没有差别，差异无统计学意义。进一步两两比较采用χ2分割法，α′=0.006 8。结论 IL-18和Cys C在危重患者急性肾损伤的临床研究有早期诊断价值。

急性肾损伤； 白细胞介素-18； 胱抑素C； 危重患者

急性肾损伤(AKI)是指48 h内血清肌酐(Scr)绝对值增加不低于0.3 mg/dL(26.5 mmol/L)或较原先水平增高不低于50%的一组临床综合征，是一种常见的急、危重病，病死率较高。传统通常以检测血清肌酐来诊断AKI，然而，在肾功能急性变化期间血清肌酐的变化并不是一个可靠的指标[1]。血清肌酐的特异性和敏感性都比较低，而且易受多种因素影响[2]。危重患者的肌肉组织少，不易接受外源性肾小球滤过率(GFR)标志物，而肌酐清除率测定受肌肉量、体表面积等多种因素影响[3]。血肌酐与肌肉量呈正比，对于危重症患者来说，肌酐很难准确地检测到GFR轻微的变化[4-6]。为降低AKI发病率，寻找能更有效地早期诊断AKI的方法成为目前热门的研究方向。有研究发现，AKI时尿白细胞介素18(IL-18)和尿胱抑素C(Cys C)可以作为AKI的新型早期诊断标志物[7-8]。本研究旨在观察重症监护室收治的危重患者中AKI患者的IL-18和Cys C水平的变化，探讨二者在诊断危重患者AKI的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年1月至2013年12月中山大学附属第一医院重症医学科收治的危重患者，根据首次尿中IL-18和Cys C测量的结果，将研究对象分为3组：A组55例(IL-18>95 pg/mL)，B组57例(Cys C>1.3 g/mL)，C组52例(IL-18>95 pg/mL和Cys C>1.3 g/mL)。D组为同期健康体检者60例(IL-18≤95 pg/mL和Cys C≤1.3 g/mL)。各组人群一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。AKI诊断标准：参照2005年9月AKI专家组修订的RIFLE分级标准，AKI定义为在48 h内由肾功能或结构方面异常引起的肾功能突然下降，表现为Scr上升不低于0.3 mg/dL(26.5 μmol/L)，或者不低于危重患者入院后最低值的1.5倍。标本检测：应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测尿IL-18，试剂由美国Rapid Biolab公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作。应用颗粒增强免疫透射比浊法测定Cys C浓度，试剂盒由利德曼公司提供。

1.2 方法 对入选的研究对象每天收集尿标本，持续7 d，应用ELISA法检测尿液标本中的IL-18，应用颗粒增强免疫比浊法测定Cys C。

2 结 果

2.1 4组人群一般资料比较 入选人群的基础肌酐等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。以首次测得的尿中IL-18和Cys C浓度为标准分为A、B、C、D 4组，见表1。

表1 4组人群一般资料比较±s)

2.2 4组人群发生AKI情况比较 从入组开始观察7 d内各组发生AKI患者数，用R×C表整体χ2检验(χ2=68.259，v=3，P<0.05)，统计学分析表明，4组人群的AKI患病率不全相同。见表2。

表2 4组发生AKI患者数(n)

从表2可以看出，按α′=0.006 8检验标准，A、B、C 3组与D组AKI患病率不同，A、B、C 3组的AKI患病率远远高于D组，但A、B、C 3组之间AKI患病率几乎没有差别，差异无统计学意义(P>0.05)。进一步采用χ2分割法进行两两比较，α′=0.006 8。见表3。

表3 χ2 分割法检验结果

3 讨 论

危重患者病程中存在着各种足以影响肾脏功能的危险因素，如心脏疾病、肺栓塞、肺动脉高压等导致心排出量降低，全身性疾病如严重脓毒症、肝肾综合征等引起有效血容量减少，以及肾血管病变如挤压综合征、创伤、烧伤等引起的肾缺血及产生肾毒素等，这些因素均可导致肾血流量的低灌注状态，发生AKI，其病死率高，若不及时处理，肾血流量进行性减少，发展成为急性肾衰竭，并转变为慢性肾衰竭，会带来很大的社会负担和经济负担[9]。因此，迫切需要寻找特异性和灵敏性均高的指标对急性肾衰竭进行早期诊断，及时地进行干预，对改善预后、降低病死率有很大的意义[10]。目前临床研究认为IL-18和Cys C可作为判断急性肾损伤患者病情严重程度及预后的指标。

IL-18是近端小管诱导产生的一个促炎细胞因子，属于IL-1家族，以分裂的形式进入尿液，在多种炎性反应、肿瘤、自身免疫性疾病相关的免疫事件中均起到了一定作用，其前体广泛表达于单核-巨噬细胞、未成熟树突状细胞、T细胞、B细胞等表面，它的活化继发于细胞凋亡蛋白酶-1和其他酶的作用[11]。对危重患者而言，尿中IL-18比Scr更能早期发现AKI。Parikh等[12]发现确诊为AKI的患者尿IL-18明显升高，而在尿路感染、慢性肾脏疾病、肾病综合征等患者中升高不明显，认为IL-18可以作为AKI早期诊断的一个生物标志物。本研究观察发现AKI组与非AKI组相比，其尿IL-18的浓度明显升高,Scr也有明显升高,表明检测尿IL-18的浓度对于AKI有很好的相关性,与文献[13]报道一致。

Cys C是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，非糖基化的碱性蛋白，相对分子质量为13.3×103，由122个氨基酸残基组成，可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定，只能通过肾小球滤过排泄，不受肾外许多因素的干扰，如性别、年龄、饮食、炎性反应等的影响，是一个反映GFR较Scr有更高敏感性的指标[14]。有研究表明，尿Cys C浓度由GFR决定，循环中的Cys C仅经肾小球滤过而被清除，且与各种放射性核素标志物的清除率相关性良好，是一种反映GFR变化的理想指标[15]。

本研究发现，IL-18和Cys C水平是反映肾小球滤过功能的敏感指标，能敏感地及早发现AKI，结果优于Scr，以IL-18和Cys C浓度作为早期诊断AKI的生物标志物，在危重患者AKI中均能及时准确地检测。由于IL-18的高特异性，加上Cys C比较稳定，因此联合IL-18和Cys C作为早期诊断AKI的指标，能更好、更准确灵敏地对AKI进行诊断。此外，以IL-18和Cys C作为标志物具有价廉易操作等特点，易于临床推广。由于本研究样本量少，还需要更多探索与突破，需要大样本研究来验证其实用性。同时，还可以进一步研究这些标志物在肾损伤过程中的病理生理机制，找出针对性的治疗方法，以便早期干预治疗，早期逆转肾损伤。

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Early dianostic value of combined detection of urine interleukin-18 and urine cystatin C in acute kidney injury in critically ill patients*

LUJin-shuai1,LINan1,LISi2,HUANGJia-xing3

(1.FirstDepartmentofCriticalCareMedicine,People′sHospitalofXinjiangUygurAutonomousRegion,Wulumuqi,Xinjiang830001,China;2.DepartmentofCriticalCareMedicine,FirstAffiliatedHospitalofZhongshanUniversity,Guangzhou,Guangdong510080,China;3.DepartmentofCriticalCareMedicine,QingxiHospital,Dongguan,Guangdong523660,China)

Objective To explore the value of urinary interleukin-18 (IL-18) and urine cystatin C (Cys C) in early clinical diagnosis of acute kidney injury (AKI) in critically ill patients.Methods The critically ill patients in ICU from January 2012 to December 2013 were selected as the research subjects.The daily urine samples were collected for consecutive 7 d.IL-18 was detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and Cys C was detected by the particle-enhanced turbidimetric immunoassay.The measurement results were divided into three groups:A (IL-18>95 pg/mL),B (Cys C>1.3 g/mL),C (IL-18>95 pg/mL and Cys C>1.3 g/mL) and D as the normal group (IL-18≤95 pg/mL and Cys C≤1.3 g/mL).Results According to α′=0.006 8 test standard,the morbidity rate of AKI had difference between the group A,B and C with the group D,the morbidity rate of AKI in the group A,B and C was much higher than that in the group D,but which had no statistically significant difference among the group A,B and C.The further pairwise comparisons adopted χ2segmentation method,α′=0.006 8.Conclusion IL-18 and Cys C has a early diagnostic value for AKI in critically ill patients.

acute kidney injury; interleukin-18; cystatin C; critically ill patient

国家自然科学基金资助项目(81160015)。

陆金帅，男，主治医师，硕士，主要从事急诊、危重症医学方面的研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.16.001

A

1672-9455(2015)16-2299-02

2015-02-22

2015-04-21)