血管紧张素转换酶对于乙肝患者肝纤维化水平的临床评价

柴云飞(湖北省荆门市康复医院检验科 448000)



血管紧张素转换酶对于乙肝患者肝纤维化水平的临床评价

柴云飞(湖北省荆门市康复医院检验科 448000)

目的 研究血清血管紧张素转换酶对乙肝患者肝纤维化水平的诊断价值。方法 选取2013～2014年于荆门市康复医院就诊并被确诊为慢性乙型肝炎的患者62例和40例健康人，进行实验室和肝脏活组织检查。分析并评价相关指标对乙肝患者肝纤维化的诊断价值。结果 乙肝组患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血管紧张素转换酶(ACE)水平均高于健康人组，差异均有统计学意义(PALT=0.023，PAST=0.042，PACE=0.004)。乙肝患者纤维化早期(S1～2期)患者ALT、AST和血小板与中、晚期(S3～4期)患者差异无统计学意义(P>0.05)，血小板比值指数(APRI)和ACE水平均低于纤维化中、晚期(S3～4期)患者，差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示，ACE水平与APRI呈正相关(r=0.48，P<0.05)。ACE对肝纤维化患者的诊断曲线下面积(AUC)为0.801(95%CI:0.706～0.896，P<0.05)，高于APRI对肝纤维化(AUC：0.676，95%CI:0.563～0.789，P<0.05)。当ACE为48 U/L时，诊断灵敏度为68%，特异性为71%。结论 血清ACE升高能够反映乙肝患者纤维化的发生和发展，有望成为乙肝肝纤维化血清学辅助诊断指标。

乙型肝炎； 肝纤维化； 血管紧张素转化酶

乙型肝炎为世界慢性感染性疾病，影响人口超过3亿。乙型肝炎感染后发展为急性或慢性肝炎，肝组织反复受损修复后逐渐发展为肝纤维化，进一步发展为肝硬化和肝癌。尽管多数研究认为，性别、病毒的基因型和病毒载量等因素成为乙型肝炎恶化的潜在风险因子，但是仍有其他因素影响疾病的进展。肝脏活组织检查是肝纤维化诊断的金标准，但其为有创性检查，临床应用受到局限[1]。因此，研究者更着重于寻找其他能够反映肝纤维化的无创血清学诊断指标。尽管有研究试图通过多项血清指标联合建立无创诊断模型来评价肝纤维化的程度，以期早期发现肝纤维化，但是此类无创诊断模型的临床价值仍不十分肯定。肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS)调节人类的血压、体液和电解质平衡。近几年，RAS系统在许多疾病的发病机制中被阐述，其中血管紧张素转换酶(ACE)作为RAS系统重要的参与分子，在肝脏疾病的发病机制中起重要作用。因此，本研究旨在检测乙肝患者血清ACE水平，通过比较不同程度肝纤维化的乙肝患者血清中ACE水平，并与常见无创诊断模型血小板比值指数(APRI)进行比较，探讨血清ACE对乙肝患者肝纤维化的诊断价值，现将有关情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013～2014年于本院就诊并被确诊为慢性乙型肝炎的患者62例，其中男36例，女26例，平均年龄(32.6±7.2)岁。患者均根据2010年中华医学会制定的慢性乙型肝炎防治指南的诊断标准进行确诊[2]。排除合并其他病毒性或自身免疫性肝炎、脂肪肝、恶性消耗性疾病的患者，妊娠或哺乳期的妇女。同期纳入40例健康人作为健康对照组，健康对照组排除病毒性或自身免疫性肝炎、脂肪肝、肝硬化、急性肝损伤和肝癌等肝脏损伤性疾病，其中男26例，女14例，平均年龄(32.7±5.8)岁。研究对象全部签署知情同意书，经本院伦理委员会批准通过。

1.2 方法 所有研究对象禁食8 h后抽取清晨空腹静脉血5 mL后，立即分离血清，-80 ℃保存待测。常规检查包括：(1)体质量指数(BMI);(2)丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)；(3)HBV-DNA；(4)血小板(PLT)。血清ACE水平经FAPGG连续监测法检测，试剂盒购自罗氏公司，操作严格遵循说明书。对乙肝患者进行肝纤维化血清学评价，计算APRI，APRI=AST/PLT×100[3]。乙肝患者另行肝脏活组织检查，纤维化程度根据活组织检查结果确诊。

1.3 诊断标准 肝活组织检查后，收集的肝组织标本经10%的中性甲醛固定后石蜡包埋，连续切片后经HE和网状纤维染色，由本院2位工龄大于10年的病理医师分别读片并根据肝病病理学标准评价肝纤维化程度。肝纤维化分期(S0～4期)：S0期为肝脏无纤维化；S1期为肝汇管区纤维化，或仅有窦周纤维化，或仅有小叶内纤维化；S2期为肝汇管区和窦周纤维化，纤维间隔已形成，小叶结构大致正常；S3期为间隔形成，小叶结构紊乱；S4期为确诊肝硬化。将S1～2期患者评定为肝纤维化早期患者，S3～4期患者评定为肝纤维化中、晚期患者。

1.4 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件对数据进行分析,计数资料比较采用χ2检验，计量资料比较采用t检验。变量间相关性分析采用Spearman相关性分析。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线，计算诊断的曲线下面积，确定最佳阈值，并计算敏感性和特异度，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 乙肝组和健康对照组临床病理特征和实验室检查比较 见表1。两组年龄、性别和体质量差异无统计学意义。在肝纤维化分期上，乙肝患者中S0期患者18例，S1～2期27例，S3～4期17例。乙肝组患者ALT、AST和ACE水平均高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 肝纤维化不同分期患者相关指标比较 乙肝患者纤维化早期(S1～2期)患者ALT、AST和PLT与中、晚期(S3～4期)患者差异无统计学意义(P>0.05)，APRI和ACE水平均低于纤维化中、晚期(S3～4期)患者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。相关性分析显示，ACE水平与APRI呈正相关(r=0.48，P<0.05)。

2.3 APRI评分和ACE水平对乙肝肝纤维化的诊断价值 绘制ROC曲线，ACE对肝纤维化患者诊断的曲线下面积(AUC)为0.801(95%CI:0.706～0.896，P<0.05)，高于APRI对肝纤维化的(AUC：0.676，95%CI:0.563～0.789，P<0.05。当ACE为48 U/L时，诊断灵敏度为68%，特异性为71%，见图1。

表1 两组临床病理特征和实验室检查比较

续表1 两组临床病理特征和实验室检查比较

注：-表示无数据。

表2 肝纤维化不同分期患者相关指标比较±s)

图1 APRI与ACE对肝纤维化患者的诊断价值

3 讨 论

每年约100万人死于乙肝病毒(HBV)感染导致的肝硬化和肝癌，由于肝脏中乙肝病毒的长期存在，高达40%的HBV感染患者被确诊为肝硬化[4]。肝纤维化是肝硬化发展的前期病理基础，也是肝硬化继续恶化的主要原因之一。不仅如此，研究发现肝纤维化同时也是肝癌的主要危险因素之一。目前纤维化的诊断仍然依赖肝脏活组织检查，但是此项检查具有创伤性大、可能发生严重并发症、局限性高等缺点，导致一部分乙肝患者因无法施行此项检查而丧失早期发现纤维化的可能性。但大量研究表明，目前仍少有明确的血清学指标能够代替肝脏活组织检查，寻找可用的肝纤维化相关血清学指标仍受到研究者的高度关注[5]。

APRI是近年来西方国家用于诊断丙肝患者肝纤维化的无创诊断模型，研究发现其在乙肝肝纤维化患者中同样具有诊断价值，但是确切的诊断应用仍具有争议[6]。APRI计算方法简单，仅包括2项临床常见血清学指标的数值，可行性高，临床使用范围广。但是，蒋忠胜等[7]发现，尽管APRI能够用于肝纤维化的诊断，其对不同分期纤维化的诊断效果并不佳。

肝纤维化病理改变的基础主要是肝内纤维组织过度增生，降解减少，肝实质结构大量破坏，最终引起广泛纤维化[8]。新近研究认为，肝纤维化属于可逆的病理改变，而肝硬化却无法逆转，如果对肝纤维化使用药物干预，是有可能逆转患者的纤维化程度，从而降低肝硬化的发生率。那么早期发现肝纤维化并评估患者肝纤维化程度显得尤为重要。RAS系统是体内内分泌的重要调节轴，主要参与水和电解质代谢、血压调节等正常生理过程。研究发现多数器官和组织也能合成RAS系统的组成分子，称为局部RAS。局部RAS与内分泌系统中的RAS功能不同，主要参与组织结构的纤维化和重塑。研究发现，局部RAS在肝纤维化的发展中起调控作用，尤其是血管紧张素Ⅱ作为RAS系统中的关键分子，其通过旁分泌或自分泌的方式作用于成纤维细胞，促进成纤维细胞增生[9]。ACE可以促进血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ，研究发现损伤的肝脏中RAS系统的成分包括血管紧张素Ⅰ和Ⅱ、ACE、醛固酮等均表达上调，可见局部RAS确实参与了肝纤维化的发展。此外，肝纤维化发展过程中肝星状细胞被过度激活，表现出成纤维细胞的活性，产生大量的胶原纤维，这一过程受到血管紧张素Ⅱ的调控。研究发现阻断肝内的血管紧张素Ⅱ产生似乎可以缓解肝纤维化的程度[10]。事实上，Corey等[11]发现，ACE抑制剂对于轻微纤维化的丙肝患者具有保护作用。因此，ACE不仅参与肝纤维化的发生和发展，同时也是治疗的一个潜在靶点。本研究检测了乙肝患者血清中ALT、AST、GGT、ALP、PLT和ACE水平，发现乙肝组患者ALT、AST和ACE水平均高于健康对照组，由此说明ACE确实在乙肝患者血in solid organ transplantation[J].Front Immunol,2012,3(2):184-189.

[18]Wing K,Yamaguchi T，Sakaguchi S.Cell-autonomous and-non-autonomous roles of CTLA-4 in immune regulation[J].Trends Immunol,2011,32(9):428-433.

[19]Sayo Y,Chikako T,Oya H,et al.Regulatory T-cell activation among patients who displayed operational tolerance following intra-portal administration of Donor-Specific antigens in living donor liver transplantation[J].Transplant Proc,2012,44(2):560-564.

[20]Zhang Y,Zhao H,Bo L,et al.Total body irradiation of donors can alter the course of tolerance and induce acute rejection in a spontaneous tolerance rat liver transplantation model[J].Sci China Life Sci,2012,55(9):774-781.

[21]Iyama S,Muease K,Sato T,et al.Narrowband ultraviolet B phototherapy ameliorates acute graft-versus-host disease by a mechanism involving in vivo expansion of CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells[J].Int J Hematol,2014,99(4):471-476.

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.09.046

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1672-9455(2015)09-1294-02

2014-11-19

2015-01-26)