仙人掌多糖对高血脂小鼠血脂的影响

2015-03-14 03:02林爱琴何爱明
关键词:丙二醛甘油三酯

林爱琴,何爱明

(福建师范大学福清分校 海洋与生化工程学院,福建 福清 350300)

仙人掌多糖对高血脂小鼠血脂的影响

林爱琴,何爱明

(福建师范大学福清分校海洋与生化工程学院,福建福清350300)

摘要:目的研究仙人掌多糖对高血脂小鼠体内血脂的影响。方法随机选用雄性SPF级小鼠28只,分为4组,建立高血脂小鼠模型,取血清对TC、TG、MDA含量及全血的SOD活性测定。结果给药15 d后,仙人掌多糖组小鼠的TC、TG与MDA含量均小于模型组,SOD含量大于模型组。结论仙人掌多糖具有降低小鼠体内血脂的作用。

关键词:仙人掌多糖;高血脂小鼠;总胆固醇;甘油三酯;丙二醛;超氧化物岐化酶

目前,在我国心血管各类疾病中,高脂血症已经成为主要的死亡原因之一。临床上能够有效控制和治疗高脂血症的药物主要包括他汀类和贝特类药物。但这两类药物在临床应用上经常会出现胃肠道反应如恶心、腹痛、腹泻,并伴有头痛或皮疹,少数患者可出现过敏等各种各样的副反应[1-3]。在中成药领域,能够有效治疗高脂血症的成熟药物并不是很多,而且有些中成药作用环节单一,长期服用还会导致药物的耐药性,不利于后期进一步的治疗。因此,在治疗高脂血症疾病方面需要开发出一种疗效显著、毒性较低的药物。

仙人掌为仙人掌科仙人掌属植物,在我国作为药用植物已有悠久的历史。《本草纲目拾遗》记载:仙人掌味淡性寒、行气活血、清热解毒、消肿止痛、健脾止泻、安神利尿,可内外服用治疗多种疾病。随着进一步研究的深入,仙人掌的有效药物成分已将越来越多地被发现。其中仙人掌多糖是从仙人掌茎或果实中提取出来的极性大分子化合物。近年来的研究表明,仙人掌多糖具有抑制癌症、降低血糖和血脂、抗氧化等作用[4-8]。本试验主要是从仙人掌多糖对高血脂小鼠血脂的影响方面来进行研究。

1 材料与方法

1.1材料与试剂

仙人掌粉末制备:仙人掌新鲜茎块采摘自福建省永泰县,先剔除表面的刺、泥土等杂质后切条,于80℃烘干,粉碎密封保存。健康雄性昆明种SPF级小鼠:购自福建医科大学。

葡萄糖标准溶液(1.0 mg/mL):精密称取无水葡萄糖(葡萄糖置于烘箱中105℃烘干至恒重后用电子分析天枰称量)1 g,置于1000 mL容量瓶中,加蒸馏水定容。摇匀备用。

苯酚溶液(5%)的制备:称取5 g苯酚置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并定容,摇匀后置于棕色瓶中备用。

75%蛋黄乳剂:75%的蛋黄(市售鸡蛋)加25%的生理盐水,混合搅拌,4℃储藏备用。

0.9%生理盐水:取0.9 g的NaCl置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并定容,摇匀后置于试剂瓶中备用。

乙酸(冰醋酸):国药集团化学试剂有限公司,产品批号:T20110106;总胆固醇(TC)测定试剂盒:浙江东瓯诊断产品有限公司,产品批号:2012040037;甘油三酯(TG)测定试剂盒:浙江东瓯诊断产品有限公司,产品批号:2012050048;丙二醛(MDA)试剂盒和超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒:南京建成生物工程研究所,产品批号:20120703;辛伐他汀胶囊:山东鲁抗医药股份有限公司,产品批号:110301。

1.2仙人掌多糖提取与浓度的测定

仙人掌多糖的提取和含量的测定步骤参照文献[9-10],测得仙人掌多糖溶液浓度为29.5 mg/mL。

1.3实验动物分组给药

1.3.1高脂血症小鼠模型的建立随机选用健康雄性昆明种SPF级小鼠7只,并进行标记。每日上午对模型组小鼠腹腔注射75%蛋黄乳剂0.5 mL /只,下午灌胃给予蒸馏水,连续14 d。随后称体重。末次给药前小鼠禁食不禁水12 h,末次给药后1 h小鼠断尾取血(即实验第15天),3 000 r /min离心5 min,分离血清,按照试剂盒说明进行血清TC、TG、MDA测定及全血的SOD活性测定。

1.3.2实验动物的分组与给药随机选用健康雄性昆明种SPF级小鼠28只,按体重随机分为4组,分组及剂量见表1。各组动物连续灌胃给药15 d。除空白组每日上午腹腔注射生理盐水0.5 mL /只,下午灌胃给予蒸馏水外,其余各组上午腹腔注射75%蛋黄乳剂0.5 mL/只,下午灌胃给药(模型组下午灌胃给予蒸馏水),连续14 d。随后称体重。末次给药前小鼠禁食不禁水12 h,末次给药后1 h小鼠断尾取血(即实验第15天),3 000 r/min离心5 min,分离血清,按照试剂盒说明进行血清TC、TG、MDA测定及全血的SOD活性测定。在第15天解剖小鼠,分离出小鼠睾丸处脂肪组织进行称重,脂肪含量指的是脂肪重量占小鼠体重的百分比。以辛伐他汀作为阳性组,用以对比仙人掌多糖与辛伐他汀药物的使用效果。

1.4统计学分析

2 结果与分析

2.1各组小鼠体重与睾丸处脂肪含量的比较分析

各组小鼠体重与睾丸处脂肪含量的情况见表2。由表2可知,当模型组与空白组、阳性组比较时,模型组小鼠的体重与脂肪含量均较空白组和阳性组高,并表现出极显著差异(P < 0.01),显示了模型组造模成功。而仙人掌多糖组小鼠体重及脂肪含量与模型组比较出现显著性下降(P < 0.01),表明仙人掌多糖能够降低小鼠体内的脂肪含量。但仙人掌多糖组与阳性组比较时,体重无显著性差异,脂肪含量显著增加,表明仙人掌多糖在降低小鼠体内脂肪含量的效果上不如辛伐他汀。

表2 各组小鼠体重与睾丸处脂肪含量的比较Tab.2 Comparison of the weight and testicular fat of each group of mice  (n =7,±s)

表2 各组小鼠体重与睾丸处脂肪含量的比较Tab.2 Comparison of the weight and testicular fat of each group of mice  (n =7,±s)

注:a:P < 0.01,与模型组比较;b:P < 0.01,与空白组比较;c:P < 0.01,与阳性组比较。

组别空白组模型组仙人掌多糖组阳性组剂量/(mg·g-1)00 0.200 0.125体重/g 26.29±4.13a34.77±5.42bc24.97±3.98a24.55±1.33a脂肪含量/% 0.397±0.046a0.939±0.036bc0.562±0.114bac0.444±0.072a

2.2仙人掌多糖对高脂血症小鼠血清中TC和TG含量的影响分析

动物体内脂质代谢的失调是由动物血清中TC和TG含量的增多而引起的。各组小鼠血清中TC和TG水平情况见表3。由表3可知,造模后,当模型组与空白组、阳性组比较时,小鼠体内血清中的TC和TG均出现极显著性差异(P < 0.01),并且模型组的TC和TG均较其他3组明显增高,进一步说明了模型组造模成功。当仙人掌多糖组小鼠的TC和TG含量与模型组比较时,出现极显著性降低(P < 0.01)。阳性组小鼠的TC和TG含量与模型组比较均出现极显著性差异(P < 0.01),并且小鼠体内血清TC和TG含量均小于模型组。结果表明仙人掌多糖具有和辛伐他汀一样的效果,均能降低小鼠体内血清中的TC 和TG水平。

表3 各组小鼠血清中TC和TG水平Tab.3 Level of TC and TG in mice blood  (n =7,±s)

表3 各组小鼠血清中TC和TG水平Tab.3 Level of TC and TG in mice blood  (n =7,±s)

注:a:P < 0.01,与模型组比较;b:P < 0.01,与空白组比较;c:P < 0.01,与阳性组比较。

组别空白组模型组仙人掌多糖组阳性组剂量/(mg·g-1)00 0.200 0.125 TC/(mmol·L-1)2.60±0.19a3.54±0.23bc2.78±0.88ac2.42±0.14aTG/(mmol·L-1)0.62±0.06a1.14±0.07bc0.69±0.97a0.64±0.06a

2.3仙人掌多糖对高脂血症小鼠血清中MDA含量和总SOD活性的影响分析

脂质过氧化以后的主要产物是MDA,而在动物体内的主要抗氧化酶之一则是总SOD活性水平。如果动物血清的总SOD活性下降,而MDA含量升高,则会使动物体内血清中的自由基含量升高,从而对动物细胞造成一定损伤。由表4可知,模型组小鼠体内血清中的总SOD活性和MDA含量相对空白组和模型组均出现极显著差异(P < 0.01),并且模型组的总SOD活性均较其他3组低,而MDA的含量均较其他3组高,说明模型组小鼠体内血清中的自由基含量比较高。当仙人掌多糖组小鼠的MDA含量与模型组和空白组比较时,均出现极显著性差异(P < 0.01),并且MDA含量小于模型组大于空白组。但当仙人掌多糖组小鼠的SOD活性与模型组比较时,出现显著性差异(P < 0.05),并且SOD活性大于模型组。说明仙人掌多糖能够降低小鼠体内血清中MDA含量,并能够提高小鼠体内血清中总SOD活性。

表4 各组小鼠血清中MDA和SOD水平Tab.4 Level of MDA and SOD in mice blood  (n =7,±s)

表4 各组小鼠血清中MDA和SOD水平Tab.4 Level of MDA and SOD in mice blood  (n =7,±s)

注:a:P < 0.01;b:P < 0.05,与模型组比较;c:P < 0.01,与空白组比较;d:P < 0.01,与阳性组比较。

组别空白组模型组仙人掌多糖组阳性组剂量/(mg·g-1)00 0.200 0.125 MDA /(nmol·mL-1)4.00±1.13a9.70±1.34cd6.38±1.36cad2.76±1.21aSOD /(U·mL-1)108.77±45.65ad55.18±11.43cd84.19±14.68bd527.36±8.00ca

3 讨论

血脂是血浆或血清中所含脂类的总称,包括TC、TG和游离脂肪酸(FFA)等,其中TC和TG是影响高脂血症的重要因素。近年来,大量的实验和临床试验证明血清TC和TG水平增高可以导致动脉粥样硬化。动脉粥样硬化能够进一步诱发产生冠心病、脂肪肝、胆结石和高尿酸血症等一系列危害人类身体健康的疾病。而动脉粥样硬化与脂质的过氧化损害有一定的关系。在生物体细胞中,SOD是主要的抗氧化酶,能够维持生物体自由基的产生与过氧化物的清除,并能够使两者之间达到平衡。其主要作用就是延缓生物体的衰老和防止生物大分子的损伤。而血脂升高时很容易导致脂质过氧化作用增强,进一步使MDA含量增多与SOD活性降低。MDA、SOD二者是检测机体氧自由基水平的常用配对指标。SOD活性的高低间接反映机体清除氧自由基的能力,而MDA含量的高低又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度[1]。所以,为了更好地测量高血脂小鼠体内的血脂含量情况,本试验测量的指标采用了测定血清中的TC、TG、MDA和SOD的水平。

通过实验得出仙人掌多糖能够降低小鼠体内血清中的总胆固醇、甘油三酯和MDA的含量,并能够提高小鼠体内血清中总SOD活性。

参考文献(References)

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[4]南京中医学院.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版社,1997.

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[8]杨贝,庄延,邵雪玲.仙人掌多糖清除活性氧作用初探[J].武汉植物学研究,2004,21(2):183-185.

[9]林爱琴,方幼兰,林曦.仙人掌多糖提取工艺的研究[J].福建师范大学学报:自然科学版,2005,49(2):67-71.

[10]林爱琴.落葵多糖的提取及抗氧化活性的研究[J].应用化工,2010,38(7):990-992.

(责任编辑:胡燕梅)

Effect of Polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.on Hyperlipidemic Mice

LIN Aiqin,HE Aiming
(School of Ocean Science and Biochemistry Engineering,Fuqing Branch of Fujian Normal University,Fuqing 350300,Fujian,China)

Abstract:Objective To study the effect of polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.on hyperlipidemic mice.Methods 28 mice were randomly divided into four groups.The hyperlipidemic mice models were established.Then the content of TC、TG、MDA and the activities of SOD in mice blood were determined.Results After 15 d treatment, the TC,TG and MDA content in Opuntia dillenii Haw.group were lower than those in model group,and SOD content was higher than that in model group.Conclusion Polysaccharides from Opuntia dillenii Haw.has the funtion of reducing the blood lipid in mice.

Keywords:Opuntia dillenii Haw.polysaccharides;hyperlipidemia mice;TC;TG;MDA;SOD

作者简介:林爱琴(1975—),女,副教授,硕士,研究方向:生物大分子。

基金项目:福建省教育厅科技项目(JB11259);福州市包装工程行业技术创新中心项目(2014-PT-92)

收稿日期:2015 - 03 - 06

DOI:10.16389/j.cnki.cn42-1737/n.2015.03.011

中图分类号:R285.5

文献标志码:A

文章编号:1673-0143(2015)03-0253-04

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