激素治疗前后ITP患者血清CXCL10与MBL表达水平的变化研究＊

张兴利，吴鹏飞，孔 荣，邱宏春

（江苏省昆山市第三人民医院血液肿瘤科 215300）

原发免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia，ITP）是一种获得性自身免疫性出血性疾病，临床以皮肤黏膜出血为主，严重者可有内脏甚至颅内出血，出血风险随年龄而增加［1］。近年来，有关IL－10、IL－17、IL－23等细胞因子在ITP中的表达情况研究较多［2－3］。但是在多种疾病中发挥重要作用的CXC趋化因子配体10（CXC chemo－kine ligand－10，CXCL10）、甘露糖结合凝集素（mannose binding lectin，MBL）在ITP患者血清中的表达水平方面的研究却很少。为此，作者检测了45例ITP患者的血清CXCL10、MBL在激素治疗前后表达水平的变化，现报道如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料 收集本科2012年1月至2014年6月新诊断的ITP患者45例作为试验组，其中男11例，女34例，年龄12～91岁，中位年龄58岁。所有患者按照《成人原发免疫性血小板减少症诊断与治疗中国专家共识（2011版）》标准入组。选取20例健康体检者作为对照组。本研究经本院伦理委员会批准，并签署知情同意书。

1．2 方法

1．2．1 标本采集及检测 抽取对照组和试验组（激素治疗前及激素治疗至血小板正常或治疗2周后）空腹静脉血3～5 mL，标本静置2h后，3 000r／min离心15min，分离血清，于－80℃冻存待测。CXCL10、MBL ELISA试剂盒购自上海蓝基生物公司。严格按照说明书进行检测每份血清中CX－CL10、MBL的水平，避免检验误差。

1．2．2 治疗方法 对入组的45例ITP患者均采用地塞米松静滴（剂量按泼尼松1mg·kg－1·d－1，以泼尼松∶地塞米松为5mg∶0．75mg换算），至血小板达正常水平后改等效剂量泼尼松口服，稳定后剂量逐渐减少［1］；治疗过程中予以运用止血药物防治出血，联合注射用重组人IL－11升血小板治疗。40例患者在运用激素治疗后血小板水平在1周内升至正常（平均6．18d），为激素治疗有效；另5例患者在运用激素治疗2周后血小板仍小于30×109／L或者血小板计数增加不到基础值的两倍，视为激素治疗无效。

1．3 统计学处理 采用SPSS 13．0软件包分析，计量资料采用x±s表示，两组均数间比较采用t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析行SNK－q检验。以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结 果

2．1 ITP患者激素治疗前、后血清CXCL10、MBL表达水平

ITP患者激素治疗前血清CXCL10水平明显高于对照组（t＝6．576，P＜0．05），治疗后其与治疗前比较差异有统计学意义（t＝7．399，P＜0．05）；激素治疗前血清 MBL水平明显低于对照组（t＝4．196，P＜0．05），治疗后其与治疗前比较差异有统计学意义（t＝7．714，P＜0．05），见表1。

2．2 ITP患者激素治疗后不同疗效组血清CXCL10、MBL表达水平 激素治疗有效组患者血清CXCL10水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．871，P＞0．05），无效组患者血清CXCL10水平均明显高于对照组和有效组（q＝8．933、7．642，P＜0．05）。激素治疗有效组患者血清MBL水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．966，P＞0．05），无效组患者血清MBL水平均明显低于对照组和有效组（q＝3．342、2．965，P＜0．05），见表2。

表1 各组血清CXCL10、MBL表达水平（x±s，ng／mL）

表2 ITP患者激素治疗后不同疗效组血清CXCL10、MBL表达水平（x±s，ng／mL）

3 讨 论

ITP具有显著的异质性，发病机制非常复杂。虽然B细胞免疫介导产生血小板自身抗体引起血小板破坏增加是ITP发病的直接原因，但有研究表明T细胞异常导致B细胞激活可能才是ITP真正的发病机制，Th1／Th2细胞的平衡失调可能与ITP的发生、发展有关［4］。在活动期ITP患者中，与Th1优势有关的TNF、IFN－γ等细胞因子水平显著升高［5］，这类细胞因子能促进T细胞分化、成熟和增殖，介导细胞免疫应答。本研究发现，ITP患者激素治疗前血清CXCL10的表达水平明显高于对照组，而血清MBL的表达水平明显低于对照组。这提示CXCL10、MBL在ITP患者的疾病发生过程中可能起到一定的作用。

CXCL10又称为干扰素γ诱导蛋白10，能趋化招募活化的T细胞和炎性细胞迁移，主要介导Th1型炎症反应，参与多种疾病的免疫调控，发挥重要的生物学功能。曾凤彦等［6］检测50例1型糖尿病患者血清CXCL10的水平，分析比较糖尿病病程对CXCL10水平的影响，结果显示随着糖尿病病程的延长患者血清CXCL10水平依次降低，这提示CXCL10水平可以作为反映1型糖尿病免疫活性的指标。黄海涛等［7］运用ELISA法检测35例寻常型银屑病患者和健康对照组血清CXCL10的表达情况，研究发现患者组血清CXCL10的表达水平显著升高。本研究结果显示，在初发ITP患者中血清CXCL10高表达，这与国外报道的研究结果一致［8］。在经过激素治疗后有效组的表达水平显著降低，而无效组的表达水平无明显下降，这提示CXCL10在ITP的发生和发展过程中可能发挥一定的作用。

MBL也称为甘露糖结合蛋白，是一种钙离子依赖性糖结合蛋白，在肝细胞合成后分泌到血液中，为非酶非抗体的天然第一线抗感染免疫分子。MBL能够激活补体、影响单核巨噬细胞释放细胞因子，在机体免疫防御和免疫复合物形成中发挥重要作用。李胜光等［9］检测了40例系统性红斑狼疮（SLE）患者和30例健康志愿者血清MBL的水平，发现SLE患者血清MBL水平明显降低，提示血清MBL水平可能是SLE潜在的生物学标记。苏英等［10］检测了67例银屑病患者和69例健康志愿者血清MBL的水平，发现银屑病组显著低于健康对照组，推测可能因MBL基因突变导致血清MBL水平降低，MBL血清水平降低也可能通过增加其他促炎细胞因子的合成，直接和间接影响天然免疫功能［11］。本研究结果显示，未经激素治疗的ITP患者MBL的表达水平明显低于对照组，提示ITP患者自身存在免疫调节功能紊乱；经激素治疗后有效组患者的MBL水平可恢复到正常水平，而无效组的MBL水平却仍显著低于对照组。这表明，MBL的表达水平在一定程度上可反映出ITP患者的免疫调节功能状态，但其具体调节机制有待进一步研究。

因此，上述结果提示，CXCL10、MBL可能在ITP的发病及治疗过程中发挥一定的作用，随着对CXCL10、MBL表达状态及生物学效应的深入研究，相信其在ITP的诊断、病情检测、预后判断及治疗方案的选择等方面将为临床提供更可靠的依据。

［1］ 中华医学会血液学分会血栓与止血学组．成人原发免疫性血小板减少症诊断与治疗的中国专家共识（2012年版）［J］．中华血液学杂志，2012，33（11）：975－977．

［2］ 郭宁红，石庆之，华建媛．29例免疫性血小板减少性紫癜中调节性T细胞／Th17细胞的改变［J］．重庆医学，2011，40（12）：1150－1152，1155．

［3］ 黄颖，李永志，魏彩霞，等．IL－23及其相关细胞因子在慢性特发性血小板减少性紫癜中的表达与作用探讨［J］．中国实验血液学杂志，2011，19（2）：455－458．

［4］ Cines DB，McMillan R．Pathogenesis of chronic immune thrombocytopenic purpura［J］．Curr Opin Hematol，2007，14（5）：511－514．

［5］ Olsson B，Andersson PO，Jernas M，et al．T－cel－mediated cytotoxicity toward platelets in chronic idiopathic thrombocytopenic purpura［J］．Nat Med，2003，9（9）：1123－1124．

［6］ 曾凤彦，宋文惠，陈晓娟，等．CXC趋化因子配体10及其受体在1型糖尿病患者血中水平的变化［J］．中华内分泌代谢杂志，2013，29（1）：35－36．

［7］ 黄海涛，施和建，朱宝．寻常型银屑病患者血清 MMP－2、Npt、IL－18和IP－10测定的临床意义［J］．放射免疫学杂志，2010，23（5）：548－550．

［8］ Gu D，Chen Z，Zhao H，et al．Th1 （CXCL10）and Th2（CCL2）chemokine expression in patients with immune thrombocytopenia［J］．Hum Immunol，2010，71（6）：586－591．

［9］ 李胜光，黄烽，刘湘源，等．甘露糖结合凝集素在系统性红斑狼疮发病机制中的初步研究［J］．中华医学杂志，2006，86（7）：463－467．

［10］苏英，郭淑兰，于晓静，等．银屑病患者甘露糖结合凝集素基因多态性基血清水平的研究［J］．中华皮肤科杂志，2014，47（3）：157－159．

［11］Turan H，Karkucak M，Yakut T，et al．Does MBL2codon 54polymorphism play a role in the pathogenesis of psoriasis［J］．Int J Dermatol，2014，53（1）：34－38．