鼻炎清颗粒治疗变应性鼻炎的免疫机制研究

胡红芳

[摘要] 目的 观察鼻炎清颗粒对大鼠变应性鼻炎免疫系统的影响。 方法 用卵清蛋白、氢氧化铝致敏大鼠建立变应性鼻炎动物模型，鼻炎清颗粒灌胃给药14 d后，观察大鼠的行为学表现，检测大鼠血清IL-4、IgE的水平，并进行比较。 结果 药物治疗后，鼻炎清颗粒组的行为学评分、血清IL-4、IgE的水平与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 鼻炎清颗粒通过调节大鼠的免疫系统，改善大鼠的体质，从而达到治疗变应性鼻炎的目的。

[关键词] 鼻炎清颗粒；变应性鼻炎；IL-4；IgE

[中图分类号] R392.11 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2015）04-0017-03

[Abstract] Objetive To observe effect of Biyanqing granules on immune system of rats with allergic rhinitis. Methods Rats were sensitized by ovalbumin and aluminum hydroxide，Allergic rhinitis animal model had been successfully established. Rat stomachs were pumped into the Biyanqing granules， after 14 days， observed the behavior of rats. IL-4， IgE in the serum of rats were detected and compared. Results After treatment， behavior scores， IL-4， IgE levels of Biyanqing granules group were significantly improved （P<0.05）. Conclusion Biyanqing granules can regulates the rat's immune system， improve the health of them. So as to achieve the purpose of the treatment of allergie rhinitis.

[Key words] Biyanqing granules；Allergie Rhinitis；Interleukin-4；Immunoglobulin E

变应性鼻炎是临床常见病和多发病，尤其是耳鼻喉科，其发病率更逐年上升，是全球患病率较高的疾病，约全球15%～20%人群均患有此病，空气质量差的地区发病率更高。随着我国大气污染的加重，患病人数已超过0.5亿[1-2]。变应性鼻炎的病变首先为个体接触某种物质，然后发生以IgE为主介导的变态反应，局部黏膜组织中细胞因子、炎性介质及嗜酸性细胞的浸润和肥大细胞增多等[1-2]，该病严重影响患者的生活质量，甚者能诱发或加重支气管哮喘等疾病的病情，目前，全球都十分重视此病。中药对此病的治疗有着良好的疗效，本研究分析自组方鼻炎清颗粒对变应性鼻炎大鼠的血浆中IL-4 和IgE影响，探讨鼻炎清颗粒治疗变应性鼻炎的免疫机制。

1 资料与方法

1.1 动物及分组

选择2014年1～2月饲养的SPF级SD45只大鼠，雄性，体质量（150±20）g（由辽宁中医药实验动物中心提供），随机分为3组，每组15只。正常对照组（简称正常组）15只，变应性鼻炎模型组（简称模型组）15只，鼻炎清颗粒治疗组（简称治疗组）15只。动物饲养在空调房内，饲养房内保持清洁，避免变应原存在。

1.2 药物及试剂

鼻炎清颗粒由我院制剂室加工。氢氧化铝粉（济南金盈泰试剂厂生产，批号：80321）；卵清蛋白（Sigma公司生产，A5253）；IL-4试剂盒及IgE试剂盒为美国bender公司生产（批号为BMS542和BMS614）。

1.3造模方法

根据文献建立大鼠实验模型，除正常对照组外的大鼠，每只大鼠均采用腹腔注射卵清蛋白混悬液1 mL方式造模，卵清蛋白液需新鲜配制的，卵清蛋白混悬液组成为：卵清蛋白0.3 mg+氢氧化铝32 mg+生理盐水1 mL，注射频率为隔日1次，造模时间为14 d。再用2%卵清蛋白悬浊液滴鼻，剂量为每次50 μL，每日1次，共需滴鼻7次。检测造模是否成功，成功后仍维持滴鼻至实验结束[4]。

1.4给药方法与剂量

自实验开始卵清蛋白滴鼻起，正常组和模型组大鼠每天口饲生理盐水3 mL；治疗组大鼠每天口饲生理盐水稀释后的药物溶液3 mL。给药时间为每次滴鼻前，每日1次，共给药14 d。治疗组给药浓度为5 g/（kg·d），模型组为5 g/（kg·d）。

1.5标本采集及指标检测

末次给药24 h后，用20%乌拉坦腹腔注射（5 mL/kg）麻醉大鼠，取各组大鼠颈静脉血4 mL，室温下静置1 h，3000 r/min离心，离心10 min后，分离血清，按试剂盒说明书，采用酶联试验检测每组大鼠血清IL-4、IgE含量，于酶标仪450 nm波长处读取OD值，绘制曲线计算血清IL-4、IgE浓度值。

1.6 评价标准

每次滴鼻后30 min观察动物喷嚏、搔鼻、流涕症状，打分标准如下：搔鼻：仅轻搔鼻几次，为轻度，计1分；到处擦磨，抓搔鼻甚至面部不止为重度，计2分。喷嚏：1～3个计1分，4～10个计2分，10个以上计3分。流涕：以流液位置计算，流液最远达前鼻孔计1分；流液最远超过前鼻孔计2分；涕液遍布满面计3分。

1.7 统计学方法

数据以SPSS13.0统计软件分析处理，计量资料以（x±s）表示，多组间计量资料比较采用差分析，两两比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后行为学评分比较

给药前，正常组的行为学评分为（1.28±0.81）分，模型组的行为学评分（7.42±1.85）分，两组比较t=5.78，P<0.05，说明造模成功。正常组与模型组治疗前、后行为学评分比较无差异（P>0.05）；治疗组的治疗后评分明显较治疗前改善（P<0.05）。模型组与治疗组的治疗前评分无差异（P>0.05）；治疗组的治疗后评分较模型组明显改善（P<0.05），说明鼻炎清颗粒在治疗大鼠变应性鼻炎方面显示了较好的疗效。

3讨论

现代研究已经证实，变应性鼻炎患者主要是Th细胞反应，Th细胞由Th1和Th2二个亚群组成，Th1、Th2分别参与细胞免疫、体液免疫，它们之间的不同的免疫调节功能相互制约，处于动态平衡状态[5]。当由于某些因素的作用，导致Th2细胞因子呈优势发展状态时，就打破了Th1/Th2平衡系统，导致变应性鼻炎的发生，也就是变应性鼻炎发作时T辅助细胞亚群功能是失衡的，T辅助细胞亚群释放细胞因子，IgE的合成与分泌增加，炎性细胞的湿润也增加[6]，可见Th1/Th2之间的失衡是变应性鼻炎发病的中心病理机制。在发病过程中释放的细胞因子有IL-4、IL-5、IL-13、IL-10等多种，促进Eos生长、迁移和活化，同时促进MC分化和IgE产生[7]，其中起关键作用的是IL-4，其通过促进B细胞分化和增殖来增加合成IgE，同时促进嗜碱细胞活化，释放组胺、白三烯等化学介质，引起变态反应的发生[8]。IL-4还可抑制Th1细胞因子IL-2、IFN-Y的表达，并诱导Th细胞以向Th2分化为主，因此，IL-4经常被作为检测Th2细胞因子水平的指标[9]。

变应性鼻炎是多种免疫活性细胞和细胞因子参与的，由IgE介导的I型变态反应性疾病。血清总IgE水平的增高既是变应性鼻炎的重要识别标志，又是变应性鼻炎的主要特点[10]，在血清中的含量高低也反应了变态反应的严重程度，因此检测血清中IgE的含量是诊断、治疗变应性鼻炎的一个参考指标[11]。

变应性鼻炎属于祖国医学“鼻鼽”之范畴，又有“鼽鼻”、“鼽水”等称。古人早就认识到鼽嚏与气候的变化有密切关系，并提出了当四时季节的变化时，肺气被郁而咳嗽、鼻流清涕。尽管众多医家认为变应性鼻炎以肺、脾、肾之虚损为主，大致分为肺虚、脾虚、肾阳虚三型，但目前却没有权威的、统一的辨证分型。而笔者据临床实践观察，认为东北地区风寒之邪入侵为其最主要邪气，邪气引起肺失宣发，肺开窍于鼻，鼻窍不利是病机特点，治疗当以宣肺、散寒、祛风、通窍为治则，鼻炎清颗粒正是基于此组方用药的，方中麻黄性温，味辛，可宣发肺气；防风性辛微温，祛风止痒，与麻黄配伍可祛邪外出；辛夷、苍耳性温味辛，散风寒、通鼻窍。

本实验证实，鼻炎清颗粒可抑制Th2细胞的细胞因子IL-4的产生，抑制Th细胞向Th2细胞极化，促使Th1/Th2之间的动态平衡，抑制变应性鼻炎的启动机制，从而抑制变应性鼻炎的发生。鼻炎清颗粒可明显降低血清中总IgE含量，减轻变应性鼻炎的免疫反应程度，缓解变应性鼻炎的症状，改善患者的生活质量。实验证明，鼻炎清颗粒通过调节患者免疫系统，改善患者体质，从而达到治疗变应性鼻炎的目的。

[参考文献]

[1] Jing Chen，Lin Weirong，Zhang Jiajia，et，al. Clinical Observations on the intervention effect of natural-moxibustion on allergic rhinitis symptoms[J]. International Journal of Clinical Acupuncture，2011，20（3）：187-189.

[2] 江满杰，李泽卿，吴晋蓉，等. 抗原长期刺激致变应性鼻炎豚鼠模型鼻黏膜重塑的研究[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2012，26（5）：218-222.

[3] 张蓝方. Thn/Treg平衡调节与疾病的关系研究进展[J]. 济宁医学院学报，2011，34（1）：68-70.

[4] 锡林，张罗. 变应性鼻炎动物模型若干问题[J]. 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志，2008，32（2）：87-89.

[5] 张成，洪苏玲，胡国华. 变应性鼻炎患者Treg/Thl7细胞相关转录因子及细胞因子的失衡表达[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2012，26（5）：209-211.

[6] Bayry J，Sibe ril S，Triebel F，et al. Rescuing CD4+ CD25+ regulatory T-cell functions in rheumatoid arthritis by cytokine-targeted monoclonal antibody therapy[J]. Drug Discov Today， 2007，12（13-14）：548-552.

[7] Evans HG，Suddason T，Jackson I，et al. Optimal induction of T helper 17 cells in humans requires T cell receptor ligation in the context of Toll-like receptor activated monocytes[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2007，104（43）： 17034-17039.

[8] Giorgio Ciprandi，Gilberto Filad，et al. Peripheral Th-17 cells in allergic rhinitis： New evidence[J]. International Immunopharmacology，2010，36（10）：226-229.

[9] Jing Chen，Junqi Chen，Weixin Huang，et al. Observation of allergic rhinitis signed improvement upon San-Jiu days natural moxibustion treatment[J]. International Journal of Clinical Acupuncture，2011，20（3）：212-214.

[10] Bousquet J，Khaltaev N，Cruz AA，et al. Allergic rhinitis and its impact on asthma（ARIA）2008 update（in collaboration with the Word Health Organization）[J]. J Rev Alerg，2009，56（2）：56-63.

[11] Ciprandi G，De Amici M，Murdaca Q，et al. Serum interleukin-17 levels arerelated to clinical severity in allergic rhinitis[J]. Allergy，2009，64（9）：1375-1378.

（收稿日期：2014-07-21）