张倩 孟新源 张明君 耿文宁 王晓梅
维吾尔药材胡荽子的体外抑菌作用研究
张倩 孟新源 张明君 耿文宁 王晓梅
目的考察维吾尔药材胡荽子不同提取物的体外抑菌效果。方法分别制备胡荽子水提取物和95%乙醇提取物, 采用试管2倍稀释与琼脂平板法, 对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌进行体外抑菌作用的研究, 测定其最低抑菌浓度与最低杀菌浓度。结果胡荽子水提取物对大肠埃希菌和白色念珠菌均无抑菌作用, 仅对金黄色葡萄球菌有抑菌作用;胡荽子95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌有抑菌作用。结论胡荽子95%乙醇提取物比水提取物抑菌作用强。
胡荽子;抑菌作用;金黄色葡萄球菌;白色念珠菌;大肠埃希菌
胡荽(Coriandrun sativum L)是伞形科植物, 又名芫荽, 俗称香菜等, 是一种烹饪常用的调味蔬菜。其果实胡荽子也是常用的香辛料, 可药食两用。中医学中有驱风、透疹、健胃、祛痰之效[1], 还能增进胃肠腺分泌, 促进胆汁分泌、有镇咳、平喘作用, 其挥发油还对某些真菌有抑制作用[2]。胡荽子油还可用于化脓性消炎, 促进肉芽生成等外伤治疗[3], 但对其在抑菌实验方面的报道却很少, 为进一步开发和利用这一资源, 本实验对胡荽子的抑菌效果作了初步的研究为该药的开发和临床应用提供实验依据。
1.1 材料 胡荽子500 g, 购自新疆自治区维吾尔医院, 药材经新疆医科大学药学院鉴定。95%乙醇、甲醇、水为纯化水,其他试剂均为分析纯。菌株和培养基:金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠埃希菌, 均购自新疆维吾尔自治区食品药品检验所;肉汤培养基、琼脂培养基、改良马丁培养基、玫瑰红纳琼脂培养基。主要仪器:旋转蒸发仪、电热恒温培养箱、生化培养箱、生物安全柜等。
1.2 方法
1.2.1 药液的制备 胡荽子500 g加3倍量的95% 乙醇回流提取在65~75℃ 的条件下提取3次(2 h、2 h、1 h), 合并回收乙醇制得醇提浸膏。再将剩余药渣经水煎煮, 合并浓缩后
制得醇后水提浸膏。分别将胡荽子醇提浸膏和醇后水提浸膏再加入蒸馏水20 ml搅拌至浸膏溶解, 滤膜过滤除菌, 配成0.75 g/ml的胡荽子醇提物和醇后水提物药液备用。
1.2.2 菌液的制备 将冻存于-80℃的实验用菌株取出, 活化后根据试验的需要配制成含菌数为103~105cfu/ml的菌悬液, 备用。
1.2.3 液体培养基连续稀释法 分别取10支灭菌试管, 取胡荽子提取浓缩液1 ml采用试管2倍稀释法, 以营养肉汤或改良马丁液体培养基倍比稀释后, 分别加入含菌数为103~105cfu/ml的菌悬液0.1 ml。另在营养肉汤或改良马丁液体培养基接种相同菌种的菌悬液作为阳性对照;以0.5 ml营养肉汤或改良马丁液体培养基与0.5 ml蒸馏水或20%甲醇溶液作为稀释剂对照, 以有药液不加试验菌液的为空白对照。
1.2.4 最低抑菌浓度的测定 将上述试管用橡皮塞封口,放入37℃恒温培养箱中培养24 h。因药材提取液颜色较深并且澄明度差, 影响试验结果的观察, 肉眼不易辨明其生长情况, 从各管取一环转接于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平板上, 观察有无菌落生长。以无菌落生长的药液浓度为该药材的最低抑菌浓度(MIC)。
1.2.5 最低杀菌浓度的测定 从每个试管中各取0.1 ml培养液接种于营养琼脂平板或玫瑰红钠琼脂平板上, 放人37℃恒温培养箱中培养24 h, 观察各琼脂平板上菌落生长情况,以平板上计数少于5个菌落的药液浓度作为该药材的最低杀菌浓度(MBC)。
胡荽子不同提取物对各供试菌的影响 胡荽子95%乙醇提取物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用, 其中对大肠埃希菌的MIC和MBC为187.5 mg/ml;对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC为46.87 mg/ml;对白色念珠菌的MIC375 mg/ml。胡荽子的醇后水提物对大肠埃希菌和白色念珠菌均无抑菌作用, 而对金黄色葡萄球菌有抑菌作用, 即MIC和 MBC为46.87 mg/ml。见表1。
表1 胡荽子不同提取物对受试菌的MIC和MBC测定结果
本试验结果表明, 胡荽子95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌等菌株均有抑制作用, 并且对金黄色葡萄球菌的抑制作用优于大肠埃希菌和白色念珠菌。醇后水提物对金黄色葡萄球菌有抑制作用, 对其他菌株均无抑制作用。95%乙醇提物抑菌效果明显强于醇后水提物。对其体外抑菌效果的研究, 有利于促进该植物的合理开发,但是对其抑菌成分、抑菌机理等方面还有待于进一步研究。
[1]中国科学院中国植物志编委会.中国植物志(第五十五卷第一分册).北京:科学出版社,1979:89-91.
[2]刘勇民.维吾尔药志(上册).乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999:215-217.
[3]李良松, 刘懿, 杨丽萍.香药本草.北京:中国医药科技出版社,2000:23-29.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.195
2015-01-26]
新疆医科大学科研创新基金项目(项目编号:XJC2013104)
830011 新疆医科大学附属肿瘤医院药学部(张倩孟新源 王晓梅);新疆维吾尔自治区食品药品检验所(张明君耿文宁)
张倩 王晓梅