糖尿病肾病患者血清血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子水平变化

肖艳新 王 翯 李立琴 董越华 辛欢欢 程晓东 张云良 王 君

糖尿病肾病患者血清血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子水平变化

肖艳新 王 翯 李立琴 董越华 辛欢欢 程晓东 张云良 王 君*

目的：探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平变化及其在DN发生发展中的意义。方法：将175例研究对象分为正常对照组(NC组，n=35)、单纯糖尿病组(T2DM组，n=35)、DN Ⅲ期组 (Ⅲ组，n=40)、DN Ⅳ期组(Ⅳ组，n=35)、DN Ⅴ期组(Ⅴ组，n=30)。采用酶联免疫法检测各组血清VEGF及PEDF水平并分析二者相关性，同时测定全血糖化血红蛋白(HbA1c)、血浆纤维蛋白原(Fib)、血肌酐(Cr)及24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)，并行UAER危险因素的多元回归分析。结果：五组血清PEDF、VEGF水平差异有统计学意义(P<0.01)，各病例组水平均高于NC组，且Ⅴ组>Ⅳ组>Ⅲ组，差异均有统计学意义(P<0.01)，T2DM组与Ⅲ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。研究对象血清VEGF与PEDF水平呈直线相关(r=0.847，P<0.01)。血清VEGF、 HbA1c是UAER的独立危险因素(R2=0.430)。结论：VEGF和PEDF可能参与了DN的发生发展。

糖尿病肾病；血管内皮生长因子；色素上皮衍生因子

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)微血管病变之一，是引起慢性肾功能不全导致血液透析的主要原因。血管内皮生长因子(VEGF)可通过促进内皮细胞增生、改变细胞外基质及增加血管通透性而促进血管新生；色素上皮衍生因子(PEDF)可通过抑制炎症及氧化应激反应、促进内皮细胞凋亡等抑制新生血管形成，两者的动态化改变在DN微循环改变中可能起到重要作用。为了解VEGF与PEDF水平在DN发生发展中的变化，本文检测DN患者血清VEGF与PEDF水平及相关指标变化，分析两者对DN发生发展的作用。

1 资料与方法

1.1 对象和分组

2011-05-2014-05本院门诊及住院的2型糖尿病(T2DM)患者140例，其中男73例，女67例，年龄21-81岁，平均54.8岁。T2DM诊断符合世界卫生组织制定的糖尿病诊断标准[1]。按照Mogensen提出的分期标准，将患者分为单纯T2DM组[T2DM组，尿微量白蛋白排泄率(UAER)<20μg/min]、DN Ⅲ期组 (Ⅲ组，20μg/min200 μg/min)、DN Ⅴ期组[Ⅴ组，血肌酐(Cr)>137μmol/L]。排除DM急性并发症(如DM酮症酸中毒、 高渗非酮症昏迷)、泌尿系感染、严重心、肺、肝脏疾患以及恶性肿瘤、原发性肾病、风湿性疾病等系统性疾病。所有患者均接受常规降糖治疗。另选同期门诊体检健康者35例作为正常对照组(NC组)。本研究遵循赫尔辛基宣言并经本院伦理委员会通过；所有受检者均知情并签署知情同意书。各组受检者性别构成比差异无统计学意义(χ2=0.098,P>0.05)。5组年龄差异有统计学意义(F=16.13,P<0.01)，Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组大于NC组(t=4.82、6.04、6.02,均P<0.01)和T2DM组(t=3.59、4.86、4.87,P<0.01)；其余组间两两差异均无统计学意义(P>0.05)。5组收缩压(SBP)比较差异有统计学意义(F=8.78，P<0.01)，T2DM组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组均高于NC组(t= 3.86-5.34,P<0.01)，其余组间两两差异无统计学意义(P>0.05)。舒张压(DBP)和体重指数(BMI)各组比较，差异无统计学意义(F=1.20、1.59，P>0.05)。见表1。

表1 各组一般资料

注：与NC组和T2DM组比较，1)P<0.01；与NC组比较，2)P<0.01

1.2 检测指标和方法

所有受检者行实验室VEGF、PEDF以及Cr、糖化血红蛋白(HbA1c)、纤维蛋白原(Fib)、24h UAER测定。

抽取受检者过夜空腹肘静脉血，离心分离血浆或血清。采用酶联免疫吸附试验测定血清VEGF及PEDF水平，试剂盒购自美国Chemicon公司(批号140213，140122)，批内差异<5.1%，批间差异<10.6%；采用SysmexCA-7000；凝固法测定血浆Fib；采用D-10糖化血红蛋白仪，高效液相色谱分析法测定HbA1c；收集24h尿液，采用免疫比浊法检测UAER。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 各组VEGF、PEDF水平比较及两者相关性

5组血清VEGF水平差异有统计学意义(F=58.56，P<0.01)；T2DM组与Ⅲ组比较差异无统计学意义(t=1.31，P>0.05)，其余组间两两比较差异均有统计学意义(t=2.83-12.50，P<0.01)。5组血清PEDF水平差异亦有统计学意义(F=27.53，P<0.01)；T2DM组与Ⅲ组比较差异无统计学意义(t=0.23，P<0.05)，其余组间两两比较差异均有统计学意义(t=2.08-9.40，P<0.01)。见表2。

相关分析显示，血清VEGF与PEDF水平呈正相关关系(r=0.847，P<0.01)。

表2 各组VEGF和PEDF血清水平比较

注：与NC组比较，1)P<0.01；与T2DM组比较，2)P<0.05；与Ⅲ组比较，3)P<0.01；与Ⅳ组比较，4)P<0.01

2.2 各组HbA1c、Fib和肾功能指标比较

5组HbA1c水平差异均有统计学意义(F=11.07，P<0.01)；T2DM组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组较NC组均显著升高(t=6.59-10.75，P<0.01)，Ⅲ组、Ⅴ组与T2DM组比较明显降低(t=3.18、3.75，P<0.05)。5组Fib水平比较差异有统计学意义(F=13.68，P<0.01)；除Ⅲ组与T2DM组比较差异无统计学意义(t=1.57,P>0.05)外，Ⅳ组、Ⅴ组较T2DM组升高，差异有统计学意义(t=2.22、6.55，P<0.05)。5组血Cr水平比较差异有统计学意义(F=161.7,P<0.01)，Ⅴ组较其它4组显著升高，差异有统计学意义(t=20.3-20.8，P<0.01)，其它4组组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。5组UAER比较差异有统计学意义(F=61.17，P<0.01)；Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组明显高于NC组和T2DM组，差异均有统计学意义(t=2.07-13.2，P<0.05或P<0.01)。T2DM组与NC组、Ⅳ组与Ⅴ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 各组HbA1c、Fib和肾功能指标比较

注：与NC组比较，1)P<0.01；与T2DM组比较，2)P<0.05，3)P<0.01；与Ⅲ组比较，4)P<0.01；与Ⅳ组比较，5)P<0.01

2.3 UAER危险因素分析

先行单变量相关分析，结果显示，UAER与血清VEGF、PEDF、血浆Fib、全血HbA1c水平显著正相关(r值=0.631、0.483、0.278、0.357，P均<0.01)。

再行逐步多元回归分析，结果表明，只有血清VEGF、全血HbA1c是UAER的独立危险因素(R2=0.430)。见表4。

表4 逐步多元回归分析结果

3 讨 论

DN的基本病理改变为肾小球、肾小管肥大和肾小球、肾小管基膜增厚、肾动脉硬化及肾间质纤维化。VEGF是作用于内皮细胞的细胞因子，可促进血管生成及内皮细胞增殖和迁移，并增强肾小球毛细血管通透性，促进细胞外基质(ECM)合成。VEGF的表达受多种因素调控，缺氧是目前所发现的最强调节因素，缺氧状态下进行细胞培养，数小时后即可见VEGF mRNA表达明显增加[2,3]。早期研究发现，PEDF能抑制糖尿病视网膜病变(DR)和新生血管形成，对抗VEGF的促血管生成作用[4,5]。Wang等[6，7]先后报道，PEDF水平在肾脏局部组织中下降与 DN的发病机制密切相关；高糖培养的肾小球系膜细胞中，高表达的VEGF可以被PEDF抑制。还有研究[8,9]认为PEDF保护肾脏作用与其能抑制肾脏炎症反应有关。临床研究发现，DN患者血清及尿PEDF水平随着尿蛋白水平升高而升高，合并有DR的患者升高更明显[10]；低水平PEDF患者全因死亡率及心血管发病率风险升高[11]。

本研究结果显示，DN患者VEGF和PEDF水平不仅高于NC组，也高于T2DM组，而且血清VEGF、PEDF水平随着DN病情加重呈逐渐升高趋势，与相关文献[10]报道一致。肝脏、脂肪组织是 PEDF的主要来源[12]，当DN患者因为抗炎以及与VEGF对抗消耗致PEDF水平降低时，肝脏、脂肪组织代偿性合成PEDF增多使血清水平增高[13]，且与VEGF水平呈正相关，这种机制有利于延缓DN的发展。本研究结果还表明，DN患者HbA1c和VEGF不仅高于NC组和/或T2DM组，而且是肾功能指标UAER的独立危险因素。提示糖代谢紊乱可加重氧化应激，导致肾脏病理性改变[14]。

近年研究发现，代谢综合征及胰岛素抵抗患者血清PEDF水平增高[15，16]。本研究结果显示T2DM组PEDF水平较NC组升高，提示PEDF可能与代谢综合征有着密切关系。对于PEDF在DM发病中的更多作用以及能否作为DN预测因子还有待进一步研究。

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本文第一作者简介：

肖艳新(1982—)，女，汉族，硕士研究生，主治医师

1 叶任高，陆再英．内科学[M]．北京：人民卫生出版社，2004：787-809．

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Change and Significance of Serum Vascular Endothelial Growth Factor and Pigment Epithelium-derived Factor in Type 2 Diabetic Nephropathy

XIAO Yan-xin， WANG He， Li Li-qin， DONG Yue-hua, XIN Huan-huan, CHENG Xiao-dong, ZHANG Yun-liang, WANG Jun*

Baoding NO.1 Central Hospital，Baoding 071000，China;*

Objective:To investigate the change of vascular endothelial growth factor (VEGF) and pigment epithelium-derived factor (PEDF) in the development of diabetic nephropathy. Method:175 subjects were divided into control group(n=35)，T2DM group(n=35)，DN Ⅲ stage group(Ⅲ group,n=40)，Ⅳstage group(Ⅳ group,n=35) and stage group(Ⅴ group,n=30). ELISA was used to detect the serum VEGF and PEDF. Blood lipid，fasting plasma glucose，insulin，HBA1c，blood creatinine and fibrinogen were simultaneously determined. Results:The serum level of PEDF，VEGF and Fib increased gradually in the five groups and there were significant difference. Except T2DM group with Ⅲ group, there were significant difference between other groups. VEGF and PEDF showed linear correlation(r=0.847,P<0.01). VEGF，HbA1c were significant independent determinants of UAER(R2=0.430).Conclusion:VEGF and PEDF may involve in the development of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy；Vascular endothelial growth factor；Pigment epithelium-derived factor

河北省保定市第一中心医院，保定 071000；*

，E-mail：Sunday47@163.com

本文2015-03-27收到，2015-05-15修回

R587.2

A

1005-1740(2015)03-0030-04