红景天总皂苷测定的方法研究

文 / 朱永红，李 燕，曹小改，段亚楠（兰州奇正生态健康品有限公司）

红景天总皂苷测定的方法研究

文 / 朱永红，李 燕，曹小改，段亚楠（兰州奇正生态健康品有限公司）

红景天系景天科红景天属多年生草本植物，多分布在北半球的高寒地带，是珍稀药用植物，藏族人民使用该药的历史已有千年。红景天中的皂苷在抗应激、耐缺氧和增强机体免疫力方面有着显著作用［1］。在医药工业和食品工业具有很大的开发前景，为此，笔者将红景天中总皂苷测定方法进行研究，以利于红景天药材的深度研究和开发利用。

红景天；红景天皂苷；含量测定；正丁醇石油醚法

一、仪器与材料

DHG-9246A电热恒温鼓风干燥机（上海精宏）。正丁醇（AR）、石油醚(60～90℃)（AR）等(天津市科密欧化学试剂有限公司)。红景天药材由兰州奇正集团购买，共1批，为西藏大花红景天。

二、方法与结果

1、总皂苷的测定

方法试验原理：利用皂苷易溶于正丁醇，不溶于石油醚(60～90℃)的原理，用重量法测定样品中总皂苷的含量。

1.1 方法一

1.1.1 水饱和的正丁醇提取物百分含量测定

取供试品细粉2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇25ml，称定重量，摇匀，超声30min，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，计算水饱和的正丁醇提取物百分含量。

1.1.2 石油醚提取物百分含量测定

另取供试品细粉2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入石油醚（60～90℃）25ml，称定重量，摇匀，超声30min，放冷，再称定重量，用石油醚补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，计算石油醚提取物百分含量。

1.1.3 总皂甙含量测定

以水饱和的正丁醇提取物百分含量减去石油醚提取物百分含量，得总皂甙含量。

1.1.4 精密度试验

精密量取供试品溶液10ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，，分别按“2.1.1” 和“2.1.2”项下，自“在水浴上蒸干后”起连续称定（RSD=1.45%,n=6）,实验结果显示仪器精密度良好。

1.1.5 重复性试验

取同一批药材，分别按“2.1.1 和2.1.2”项下提取6份，总皂苷含量，RSD=6.14%（n=6）。

1.2 方法二

1.2.1 正丁醇提取物百分含量测定

取供试品细粉2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入正丁醇25ml，称定重量，摇匀，超声30min，放冷，再称定重量，用正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，计算正丁醇提取物百分含量。

1.2.2 石油醚提取物百分含量测定

另取供试品细粉2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入石油醚（60～90℃）25ml，称定重量，摇匀，超声30min，放冷，再称定重量，用石油醚补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量，计算石油醚提取物百分含量。

1.2.3 总皂甙含量测定

以的正丁醇提取物百分含量减去石油醚提取物百分含量，得总皂甙含量。

1.2.4 精密度试验

精密量取供试品溶液10ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，分别按“2.2.1” 和“2.2.2”项下，自“在水浴上蒸干后”起连续称定（RSD=1.62%,n=6）,实验结果显示仪器精密度良好。

1.2.5 重复性试验

取同一批药材，分别按“2.2.1 和2.2.2”项下提取6份，总皂苷含量，RSD=4.07%（n=6）。

1.3 方法三

1.3.1 样品处理及测定

取经80℃干燥2小时后的粉末约2g（m）作为供试品,精密称定，置锥形瓶中，加入石油醚(60～90℃) 约25ml，超声处理30min(250W，40kh)，过滤，再分别加入石油醚15ml、10ml、10ml分次洗涤三次，弃去滤液，滤纸连同滤渣挥干石油醚后置于具塞锥形瓶中，精密加入正丁醇25ml，称定重量，摇匀，超声处理(功率250W，频率40kHz)30min，冷却至室温，称定重量，用正丁醇补足减失的重量，过滤，精密量取续滤液10ml，置于已干燥至恒重的蒸发皿中(w1)，置水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移至干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量(w2)，计算总皂苷的含量（E）。

1.3.2 精密度试验

精密量取供试品溶液10ml置已干燥至恒重的蒸发皿中，，按“2.3.1”项下，自“在水浴上蒸干后”起连续称定（RSD=1.42%,n=6）,实验结果显示仪器精密度良好。

1.3.3 重复性试验

取同一批药材，按“2.3.1”项下提取6份，分别精密量取供试品溶液10ml，，总皂苷含量，RSD=1.82%（n=6）。

1.4 总皂苷测定结果

总皂苷测定结果见表1。

表1.不同方法红景天总皂苷含量测定结果

三、讨论

测定总皂苷实验采用重量法，利用皂苷易溶于正丁醇，不溶于石油醚(60～90℃)的原理，用重量法测定样品中总皂苷的含量。“2.3方法三” 较“2.1方法一”减少其他的成分的干扰；较“2.2方法二”减少操作误差，总的来说“2.3方法三”操作简便，实验数据稳定性、精密度、重复性良好，表明该方法能够有效地检测红景天中的总皂苷含量。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010年版一部）

［M］.北京：中国医药科技出版社，2010,144.

［2］中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范（2003年版）［S］.2003,306-307.