半枝莲黄酮类有效部位体内抗肿瘤实验研究

窦锦明，荆汉卫山东潍坊市中医院，潍坊 604；山东潍坊市食品药品检验所，潍坊 605

半枝莲黄酮类有效部位体内抗肿瘤实验研究

窦锦明1，荆汉卫2
1山东潍坊市中医院，潍坊 261041；2山东潍坊市食品药品检验所，潍坊 261205

目的：探讨半枝莲黄酮类有效部位（HSB-FEP）体内抗肿瘤活性。方法：先制备HSB-FEP；以S180、U14、EAC、HepA实体瘤小鼠模型进行体内实验，评价HSB-FEP的200、50 mg·kg-1对各实体瘤的生长抑制作用及对体重、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数等的影响。结果与结论：体内试验表明，与模型组比较，高剂量组能明显抑制S180、U14、EAC、HepA实体瘤生长，平均抑制率分别为33.87%、39.89%、37.60%、46.29%，胸腺、脾指数显著升高。

半枝莲；黄酮类；抗肿瘤；S180；U14；EAC；HepA

半枝莲为唇形科多年生草本植物半枝莲（Scutellaria barbata D.Don）的干燥全草。具有抗肿瘤等活性[1]。本实验以半枝莲黄酮类（HSB-FEP）对肿瘤细胞株增殖抑制作用研究，具有一定的科研意义。

1 材 料

1.1 药材

半枝莲购于山东潍坊海王中药饮片有限公司（批号：20120825），经潍坊市药检所鉴定确认。

1.2 实验动物和瘤株

昆明种小鼠♂，体重（20±2）g，200只，山东中医药大学实验动物中心 〔SCXK（鲁）20090002〕提供。S180、U14、EAC、HepA瘤株，山东省医学科学院药物所肿瘤室提供。

1.3 仪器和试剂

FA1204B型电子天平（上海精密科学仪器厂）。环磷酰胺（CTX，批号：13112021，江苏恒瑞制药厂）。

2 方 法

2.1 HSB-FEP的制备[2]

取半枝莲10 kg，粗碎，80%乙醇回流提取3次，200目药筛过滤，合并滤液，减压浓缩至2.0 g·mL-1。选用聚酰胺柱，用水洗脱，20%乙醇洗脱，70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，浓缩，干燥即得HSBFEP 0.453 kg，得率4.53%，4℃保存备用。

2.2 对小鼠移植性肿瘤的实验研究

2.2.1 S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠模型建立[3]

分别取传代7天S180、U14、EAC、HepA瘤源小鼠，抽无菌腹水（活细胞数大于95%），稀释成2×107/mL细胞悬液，右前腋皮下接种0.2 mL悬液，制备S180、U14、EAC、HepA实体瘤模型。

2.2.2 实验动物分组及给药 分别取S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠各40只，称重，随机分4组：模型组（ig等体积水）、CTX组（ip 20 mg·kg-1，隔日1次）、HSB-FEP高、低剂量组（ig 200、50 mg·kg-1，每日1次）。用水配制悬浊液CTX 1.0 mg·mL-1、HSBFEP 10 mg·mL-1（相当于原药材220.8 mg·mL-1），连续给药10 d。末次给药后处死动物，剥离瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。同时分离胸腺和脾脏，精密称重，计算胸腺指数、脾脏指数，计算公式：

抑瘤率（%）=（模型组平均瘤重－给药组平均瘤重）/模型组平均瘤重×100%

脏器指数（mg·g-1）=脏器重量（mg）/体重（g）

2.3 统计学方法

实验数据经SPSS11.0软件处理，进行组间t检验，以均数±标准差（±s）表示。

3 结 果

3.1 HSB-FEP对各组荷瘤小鼠瘤重及体重影响

各组荷瘤小鼠接种6天后，观察到模型组实体瘤，荷瘤小鼠逐渐出现运动减少、毛发枯燥、消瘦。CTX组实体瘤生长不明显。HSB-FEP高剂量组实体瘤比模型组小。结果如表1所示。与模型组瘤重比较CTX组、HSB-FEP高剂量组（S180 P＜0.05，U14、EAC、HepA P＜0.01）能明显抑制实体瘤生长；与CTX组瘤重比较，HSB-FEP高剂量组（S180、EAC、HepA P＜0.05，U14 P＜0.01）抑瘤效果较好。

表1 HSB-FEP对各组荷瘤小鼠的抑制作用

3.2 HSB-FEP对各组荷瘤小鼠脏器指数影响

表2所示，与模型组比较，CTX组胸腺、脾脏指数显著降低（P<0.01），各给药组无差异；与CTX组比较，HSB-FEP高剂量、低剂量组均能显著提高胸腺、脾脏指数（S180、U14、EAC、HepA均P<0.01），表明它能调节机体免疫功能。

4 讨 论

本实验选用S180、U14、EAC、HepA实体瘤模型研究HSB-FEP体内抗肿瘤活性，发现HSB-FEP高剂量组抑瘤率 S180为 33.87%、U14为 39.89%、 EAC为37.60%、HepA为46.29%，均达到中药疗效评价中规定的指标[4]，表明有抗肿瘤活性。HSB-FEP高剂量组胸腺、脾脏指数增加，有良好的调节机体免疫作用，通过改善荷瘤机体的免疫功能低下状态而发挥抑瘤活性；但其抑瘤作用机理，有待深入研究。

表2 HSB-FEP对各组荷瘤小鼠脏器指数的影响结果

[1] 蔡震峰，任风莲，申定珠．中草药半枝莲的研究进展[J]．广州化学，2006，31（4）：55．

[2] 姚新生.天然药物化学[M].4版.北京：人民卫生出版社，2003：150-2.

[3] 徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学[M].3版.北京：人民卫生出版社，2002：1786.

[4] 韩 锐.抗癌药物研究与实验技术[M].北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1997：271-2.

Study on In-vivo Antitumor Activity of the Flavonoids Effective Parts from Scutellaria barbata D.Don

DOU Jin-ming1,JIN Han-wei2
1Weifang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Weifang 261041;2Weifang Institute for Food and Drug Control,Weifang 261205

Objective:To study the in-vivo antitumor effect of the flavonoids effective parts from Scutellaria barbata D.Don(HSB-FEP).Methods:HSB-FEP were prepared.In in-vivo mice models of S180,U14,EAC and HepA solid tumors were established.HSB-FEP at 200 and 50mg·kg-1were given in tumor-bearing mice to evaluate the effects on solid tumor growth,body weight,spleen index,thymus index,tumor mass weight and the rates of tumor inhibition.Results and Conclusion:The results of in-vivo experiments showed that tumor growth(S180,U14,EAC and HepA)were apparently inhibited by HSB-FEP at 200mg·kg-1with inhibitory rates of 33.87%,39.89%,37.60%and 46.29%;spleen index and thymus index were significantly increased by HSB-FEP.

Scutellaria barbataD.Don;Flavonoids;Antitumor;S180;U14;EAC;HepA

R965.1

A

1673-7806（2015）01-021-02

窦锦明，男，专业方向：中药制剂、抗肿瘤药理研究E-mail:doujinming83@163.com

2014-08-18

2014-08-29