蛋白酶、IL-8与未足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎及妊娠结局的关系

王妙英，焦朋增，赵媛媛

(1.河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸 056001；2.河北省邯郸市第一医院，河北 邯郸 056001)

蛋白酶、IL-8与未足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎及妊娠结局的关系

王妙英1，焦朋增2，赵媛媛1

(1.河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸 056001；2.河北省邯郸市第一医院，河北 邯郸 056001)

目的 探讨蛋白酶、白细胞介素-8(IL-8)与未足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎及妊娠结局的关系。方法 选择住院分娩的未足月胎膜早破孕妇53例，根据有无发生绒毛膜羊膜炎(HCA)分为HCA组22例和无HCA组31例。比较2组孕妇血清及其新生儿脐带血中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及IL-8、C反应蛋白(CRP)、WBC水平,比较HCA组不同严重程度HCA时新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8、CRP、WBC水平。记录2组妊娠结局情况。结果 2组孕妇血清、新生儿脐带血中WBC、CRP水平比较差异均无统计学意义，HCA组NE、Ox-AT、IL-8水平均明显高于无HCA组(P均<0.05)。重度HCA孕妇的新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明显高于轻中度者(P均<0.05)。孕妇血清NE、Ox-AT、IL-8水平与新生儿脐带血NE、Ox-AT、IL-8水平呈显著正相关性(P均<0.01)。新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8水平与WBC、CRP水平呈弱相关性(P均<0.05)。新生儿脐带血中NE水平与Ox-AT、IL-8水平呈正相关性(P均<0.05)，Ox-AT水平与IL-8水平呈正相关性(P均<0.05)。HCA组剖宫产率、产褥病率、新生儿窒息率、肺炎率明显高于无HCA组(P<0.05或P<0.05)，HCA组母体并发症及新生儿并发症发生率均明显高于无HCA组(P均<0.05)。结论 动态监测孕妇血清NE、Ox-AT、IL-8水平变化，有利于尽早预测未足月胎膜早破合并HCA的发生及妊娠结局，以尽早采取干预措施，降低母儿并发症的发生风险。

蛋白酶; 白细胞介素-8;未足月胎膜早破;绒毛膜羊膜炎

未足月胎膜早破(pPROM)是指妊娠<37周胎膜在临产前发生破裂。其与感染互为因果，常表现为组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)[1]，而HCA多无典型临床症状，产前诊断困难。pPROM合并HCA可致产妇胎盘早剥、产后出血及新生儿肺炎、脑白质损伤等[2]。可见，尽早预测HCA的发生对改善母儿结局有着积极意义。蛋白酶如中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、氧化型α1-抗胰蛋白酶(Ox-AT)及细胞因子中白细胞介素-8(IL-8)与HCA的发生有着密切的关系，它们在炎症级联反应过程中起着重要作用。本研究对pPROM孕妇血清及其新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8含量进行了检测，并探讨了各指标与pPROM合并HCA的相关性及与妊娠结局的关系，现将结果报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2012年5月—2013年12月在邯郸市中心医院妇产科住院分娩的pPROM孕妇53例，均为单胎妊娠。pPROM诊断符合《妇产科学》[3]中相关标准，排除合并有临床感染症状、肝炎、肾炎、上呼吸道感染疾病者。根据有无发生HCA分为2组：HCA组22例，年龄18～40(27.1±3.1)岁；孕周30+6～37(32.4±0.8)周；孕次0～3(1.3±0.2)次;破膜至胎儿娩出时间46～112(78.5±19.7) h。无HCA组31例，年龄19～41(27.4±3.2)岁；孕周30+4～37(32.1±0.7)周；孕次0～3(1.2±0.3)次;破膜至胎儿娩出时间48～110 (78.0±19.2)h。HCA诊断参考相关资料[4]:胎膜病理切片镜检中性粒细胞中重度浸润，根据高倍镜视野下中性粒细胞个数分为轻度(5～10个)、中度(11～30个)、重度(>30个)。

1.2 方法 采集孕妇产前肘部静脉血3 mL,3 500 r/min离心10～15 min,取上层血清置于-20 ℃冰箱内保存待测。胎儿娩出后、胎盘娩出前采集脐带静脉血3 mL，离心取上层血清置于-20 ℃冰箱内待测。孕妇血清、新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8水平采用ELISA法测定，试剂盒购自上海凯博生化试剂有限公司,同时采用血球计数分析仪测定白细胞计数(WBC)，采用酶标免疫法测定C反应蛋白(CRP)水平。

1.3 妊娠结局观察 记录2组孕妇分娩方式、产后出血产褥病情况及新生儿窒息、呼吸窘迫(NRDS)、缺氧缺血性脑病(HIE)发生情况。

2 结 果

2.1 2组孕妇血清、新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比较 2组孕妇血清、新生儿脐带血中WBC、CRP水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，NE、Ox-AT、IL-8水平均明显高于无HCA组(P均<0.01)。见表1及表2。

表1 2组孕妇血清NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比较

表2 2组新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平比较

2.2 不同严重程度HCA孕妇的新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比较 HCA组中病情轻中度10例，重度12例。病情重度者新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平明显高于病情轻中度者(P均<0.01)。见表3。

表3 不同严重程度HCA孕妇的新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8、WBC、CRP水平比较

2.3 孕妇血清及新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8 、WBC、CRP水平相关性分析 孕妇血清NE、Ox-AT、IL-8水平与新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8水平呈正相关性(rNE=0.902，P<0.01；rOx-AT=0.921，P<0.01；rIL-8=0.916，P<0.01)。新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8水平与WBC、CRP水平呈弱的相关性(r=0.125～0.206,P<0.05)。新生儿脐带血NE与Ox-AT、IL-8呈正相关性(r=0.972,0.946,P<0.05)，Ox-AT与IL-8呈正相关性(r=0.892,P<0.05)。

2.4 妊娠结局情况 HCA组剖宫产率、产褥病率、新生儿窒息率、肺炎率均明显高于无HCA组(P<0.05或P<0.01)，见表4。HCA组母体并发症(包括胎盘早剥、产后出血、产褥病)、新生儿并发症(包括新生儿窒息、肺炎、HIE) 发生率分别为36%(8/22)、86%(19/22)，无HCA组为3%(1/31)、36%(11/31),2组母体并发症及新生儿并发症发生率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。

3 讨 论

pPROM是产科常见的并发症，其病因病机尚不明确。有研究报道，pPROM与感染相关，pPROM可致阴道内细菌上行，诱发或加重宫内感染[5]。HCA是一种宫内感染，也是pPROM的并发症之一，其可增加母儿并发症的发生风险。因此，在pPROM进行期待治疗过程中，如何尽早预测HCA并采取防治措施，对降低母儿并发症的发生率，改善妊娠结局有着重要意义。

表4 2组妊娠结局情况比较 例(%)

NE是一种丝氨酸中性蛋白水解酶，主要由中性粒细胞分泌。正常机体内NE表达极低，且能与-AT和-MG等抗蛋白酶结合而被中性粒细胞清除[6]。当感染如HCA发生时，中性粒细胞会在感染病灶局部聚集、活化、脱颗粒并释放NE，NE是一种炎症损伤因子，可降解细胞外基质，释放IL-6、IL-8等炎性因子，进一步促进中性粒细胞的趋化、迁移，加重组织的损伤[7]。因此，组织或体液中NE含量能较好地反映该组织损伤程度，可作为组织损伤及预后的评估指标。

周琴等[8]研究表明，pPROM孕妇胎盘组织中NE表达水平较无pPROM孕妇明显增加，而合并HCA孕妇其表达值进一步升高，同时发现孕妇血清中的NE水平也存在这种现象。Tsiartas等[9]研究亦发现，当pPROM孕妇羊水存在细菌感染时，羊水中NE含量明显增加。本研究结果显示，HCA组孕妇血清及其新生儿脐带血中NE水平明显高于无HCA组，且随着HCA严重程度加重而升高，说明NE对pPROM合并HCA的发生具有一定的预测作用。

α1-AT是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，主要在肝脏中合成，其对弹性蛋白酶、胰蛋白酶、胶原酶等具有竞争抑制作用，同时具有抗炎、抗感染等作用[10]。正常生理条件下，α1-AT与NE处于相对平衡状态，可防止组织被降解损伤。局部炎症可促使α1-AT被氧化为无活性的Ox-AT，而失去了对NE和炎症反应的抑制作用。α1-AT在胎盘组织中高表达可抑制胎盘组织中弹性蛋白酶的活性，保护胎盘组织不受弹性蛋白酶的酶解损伤[11]。α1-AT减少，Ox-AT增加可能是pPROM产生的原因。据研究证实，pPROM孕妇血清中Ox-AT含量明显高于无pPROM孕妇，且伴宫内感染者Ox-AT含量更高，说明Ox-AT表达增加可能会导致HCA发生或加重[12]。另有研究表明，pPROM孕妇羊膜组织高表达Ox-AT与羊膜腔感染密切相关[13]。本研究发现，pPROM合并HCA孕妇血清及其新生儿脐带血中Ox-AT水平明显高于无合并HCA孕妇，同时与HCA的严重程度呈正相关，这可能是由于胎膜早破过程中，HCA致使大量炎性因子释放，这些因子的氧化物质将α1-AT氧化成无活性的Ox-AT，后者通过激活丝裂原激活蛋白激酶(JNK)促进细胞因子IL-8的分泌，IL-8含量增加可促进炎症细胞如巨噬细胞、中性粒细胞的分泌，这些炎症细胞释放的氧化物反过来促进Ox-AT的生成，致使孕妇血清和胎儿脐带血Ox-AT含量明显升高。Ox-AT含量增加表明活性α1-AT降低，致使其抗炎、抑制基质降解作用减弱，引起胎膜破裂并募集炎症细胞至炎症部位，同时也增加了细菌感染的风险。

pPROM合并HCA无典型临床症状，早期难以诊断。传统的CRP检测虽能较好地反映细菌感染情况，但特异性较低，另外患者入院后通常使用地塞米松促胎肺成熟，这一定程度影响CRP的改变[14]，因此不能真实反应感染是否存在。本研究结果显示，pPROM合并HCA孕妇血清CRP与无HCA孕妇比较差异无统计学意义，但NE、Ox-AT水平均比无HCA组高，说明NE、Ox-AT对HCA的预测价值高于CRP，两者存在明显的正相关性，其原因可能是炎症反应促进了降解细胞外基质的细胞因子金属基质蛋白酶9和NE的释放，进而引起Ox-AT生成增加。IL-8是炎症介导因子，本研究结果显示其与NE、Ox-AT在pPROM合并HCA孕妇血清及其新生儿脐带血中有着相似的变化，且呈明显正相关，说明IL-8水平检测亦可较好地反映pPROM孕妇的HCA发生情况及严重程度。

HCA无特异临床表现，无有效预测方法，因此一旦发生极易诱发母儿并发症。本研究结果显示，HCA组母体并发症及新生儿并发症发生率均明显高于无HCA组，同时HCA组剖宫产率也明显升高，这可能与pPROM并发HCA可能增加了子宫收缩、感染有关。

综上所述，孕妇血清和新生儿脐带血中NE、Ox-AT、IL-8水平变化与pPROM合并HCA及母儿并发症的发生密切相关。因此，动态监测孕妇血清NE、Ox-AT、IL-8水平变化，有利于尽早预测pPROM合并HCA的发生及妊娠结局，从而及时采取干预措施，降低母儿并发症的发生风险。

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The relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes with chorioamnionitis, pregnancy outcome

WANG Miaoying1，JIAO Pengzeng2，ZHAO Yuanyuan1

(1.Handan Central Hospital, Handan 056001, Hebei, China；2.The First Hospital of Handan,Handan 056001,Hebei,China)

Objective It is to investigate the relationship between protease, IL-8 and preterm premature rupture of membranes (pPROM) with chorioamnionitis (HCA) and pregnancy outcome.Methods 53 pregnant?women with pPROM who delivered in our hospital were selected and were divided into HCA group(n=22) and non HCA group(n=31) according to whether HCA occurring.The levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in serum of pregnant women and neonatal umbilical cord blood were compared between two groups.The levels of NE,Ox-AT,IL-8,CRP,WBC in neonatal umbilical cord blood were compared between different severity of HCA in HCA group.Pregnancy outcome was recorded in both groups.Results The levels of WBC, CRP in serum of pregnant women and newborn's cord blood had no obvious difference between both groups.The levels of NE, Ox-AT, IL-8 in HCA group were significantly higher than those in non HCA group (P<0.05); the levels of NE, Ox-AT, IL-8, CRP, WBC in neonatal umbilical cord blood of pregnant women with severe HCA were significantly higher than those of ones with mild or moderate HCA.There were positive correlations between maternal serum NE, Ox-AT, IL-8 and those of neonatal umbilical cord blood (P<0.01).There were weak correlation between NE, Ox-AT, IL-8 and WBC, CRP (P<0.05).There was positive correlation between NE and IL-8, Ox-AT, or between Ox-AT and IL-8(P<0.05).The rate of cesarean section, neonatal asphyxia, puerperal morbidity ,pneumonia in HCA group were significantly higher than those in non HCA group, the rate of maternal complications, neonatal complications in HCA group were higher than those in non HCA group (P<0.05).Conclusion Dynamic monitoring the changes of serum NE, Ox-AT, IL-8 level of pregnant women is beneficial to early forecast the occurrence of pPROM with HCA and pregnancy outcome, thus to take intervention measure, and to reduce risk of maternal and neonatal complications.

protease; interleukin-8；preterm premature rupture of the membrane; chorioamnionitis

王妙英，女，硕士，副主任医师，主要从事产科并发症的诊治工作。

焦朋增，E-mail：13931000564@163.com

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.20.007

R0714.433

A

1008-8849(2015)20-2188-04

2015-01-15