疾病预防控制领域检验中胶体金免疫结合试验的应用探析

赵春

疾病预防控制领域检验中胶体金免疫结合试验的应用探析

赵春

探析胶体金免疫结合试验在疾病预防控制领域检验中的价值。分别将胶体金免疫结合试验分别应用在不同细菌性疾病、病毒性疾病、寄生虫疾病及其他微生物疾病检验中, 分析其在不同病菌中的应用效果。胶体金免疫结合试验在多种疾病中具有明显的检测结果, 可为疾病诊断与治疗方案的制定提供重要信息。胶体金免疫结合试验在多种疾病预防、检验与控制中应用效果良好。

疾病预防控制；检验；胶体金免疫结合试验

胶体金免疫结合试验将酶免疫结合试验作为基础, 是一种固相标记免疫测定技术, 优势明显, 如有单份测定、得出结果时间短、操作简便等多种优点, 并将商品试剂排除, 在测定中不需任何仪器设备辅助, 几分钟后就可得出结果, 是目前临床广泛应用的一种检测技术［1］。本院为分析在疾病预防控制领域检验中胶体金免疫结合试验的应用价值, 将该技术应用于不同细菌性、病毒性疾病检验中。现报告如下。

1 胶体金免疫结合试验原理

胶体金免疫结合试验技术的检测原理分析：以微孔滤膜为检测载体, 对已知抗原或抗体进行包被, 随后把待检标本依次加入, 在滤膜的毛细管作用下, 使标本中的抗原或抗体与膜上包被的抗原与抗体充分结合, 最后经胶体金结合物达到本次检测目的。按照不同的检验装置可将其分为GIFA(金免疫渗滤试验)与GICA(金免疫层析试验)。

2 在疾病预防控制领域检验中胶体金免疫结合试验的应用价值

2.1 鼠疫耶尔森菌 在鼠疫耶尔森菌检测中使用快速金免疫渗滤法进行检测, 具有特异性好的优点；且在检测中不和小肠结肠耶氏菌起明显的交叉反应, 最低检出限为2.4×105cfu/ml。其中在鼠疫耶尔森菌检测中, 免疫层析法检测的灵敏度为1×105cfu/ml, 使用F1抗体金探针检测F1抗原的最低检出限为10 μg/ml。

2.2 沙门菌 抗沙门菌处于封闭环境下, 采用抗原吸收法处理可使之其避免与其他肠道杆菌发生反应, 探针使用标记胶体金溶胶制备而成, 然后使用选择多膜复合法将胶体金溶胶制作成免疫层析条, 其中其灵敏度为12.1×106cfu/ml。因为沙门菌与其他杆菌之间无反应发生, 所以检测108～1011 cfu/ml菌悬液未出现钩状效应。通过对沙门菌09抗氧采用快速免疫金渗滤法检测, 沙门菌09抗原单克隆抗体3-47-0及胶体金标记亲和纯化的羊抗鼠IgG, 肠炎沙门菌标准菌株灵敏度为6×104cfu/ml点。可以使用快速免疫金渗滤法检测疾病中存在的09抗原的沙门菌, 同时在检测时, 其与其他阳性菌、肠道杆菌等不发生反应。

2.3 金黄色葡萄球菌 在金黄色葡萄球菌检测中, 快速金免疫渗滤法检测最低检测下限为(3.3～6.1)×106cfu/ml。本次研究中主要是对12株大肠埃希菌与18株不产生毒素的金黄色葡萄杆菌进行检测。根据检测结果可知, 各有1株产生了明显的交叉反应, 其他均未出现交叉反应。

3 在病毒性疾病检验中胶体金免疫结合试验的应用价值

3.1 在艾滋病抗体中的应用价值 在本次研究中, 主要对18家注册艾滋病抗体快速检测试剂实施了系统评价。在对300份强阳性标本进行检测, 根据检测结果可知, 试剂检测灵敏度均为100%；在本次健康献血员血液标本中(共450份), 除去未参与本次检测的3家试剂外, 其他15家特异度为96.9%～100%。259份血液标本属于高危人群, 均使用18家试剂进行常规检测, 检测灵敏度为73.6%～94.9%；1家特异性为58.7%, 其余均超过95.3%。

3.2 在流行性出血热抗体检验中 对160份流行性出血热患者使用胶体金免疫结合试验进行检验, 患者血清结果均呈阳性, 检测灵敏度为97.9%。对黑线姬鼠、家猫血清及兔免疫血清标本(共10份)进行检测, 结果显示均为阴性。对健康人群血清标本(共80份)进行检测, 其检测结果也均为阴性；对220份钩体病、乙脑、乙肝及其他出血性疾病样本使用该技术进行检测, 其结果同样均为阴性；对肾综合征出血热(HFRS)患者血清标本(共120份)中抗旱坦病毒IgM抗体经胶体金免疫渗滤法实施检测, 其中3 d内的32份病程中, 28份结果显示为阳性, 剩余超过4 d的88份病程中, 结果显示为阳性。

3.3 柯萨奇病毒检测 由于科萨奇病毒对多种疾病的发生与发展均有重要作用, 因此在检测萨奇病毒中使用柯萨奇病毒IgM抗体胶体金免疫层析诊断试纸条实施检测, 在本次检测的血清标本中(共72份), 将RT-PCR标准作为评价依据,胶体金免疫结合试验最终灵敏度为96.2%, 特异度为66.8%。

4 在病寄生虫病检验中胶体金免疫结合试验的价值

血吸虫抗体使用快速免疫金渗滤法进行检测, 其总灵敏度为96.8%, 另外, 急性患者血吸虫灵敏度为99.9%, 慢性患者灵敏度为97.8%, 晚期患者灵敏度为92.8%。对40例华支睾血吸虫病患者及198例健康人进行检测, 结果显示均为阴性。快速免疫金渗滤法的灵敏度、特异度及诊断效率和胶体金SEA-dipstick检测方法一致。

5 胶体金免疫结合试验在其他微生物疾病检验中的应用

梅毒使用胶体金免疫结合试验进行检测, 我国胶体金免疫结合试剂盒的检测灵敏度均高于日本富士公司的TPPA试剂与美国梅毒螺旋体特异性抗体胶体金法, 其灵敏度为72.5%。对70份孕妇血清、160份红斑狼疮患者血清及50份正常体检者血清采用胶体金免疫结合试验进行检测, 其结果显示均为阴性。

6 小结

胶体金颗粒的化学效应及物理效应具有独特性, 因此在免疫学、生物学及医学等多个领域应用广泛。由于胶体金标记对生物分子活性影响相对较小, 在多种生物分子中均为理想标记物［2］。但由于胶体金免疫试剂缺乏统一标准, 导致其检测灵敏度及特异度存在一定差异, 因此需建立一套完善的胶体金制备质量标准体系, 提高试剂质量, 发挥其在疾病预防控制领域的检测作用。

［1］ 章小雨, 戴晓爱.免疫胶体金技术在医学检验领域的应用与进展.实验与检验医学, 2014, 32(3):279-281.

［2］ 何金林.胶体金免疫结合试验在疾病预防控制领域检验中的应用.中国预防医学杂志, 2008, 9(11):1012-1013.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.19.204

2015-01-05］

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