用盐酸小檗碱作为黄连等中药质量评价指标探讨临床用药的安全

安敬美273400山东省费县人民医院

用盐酸小檗碱作为黄连等中药质量评价指标探讨临床用药的安全

安敬美
273400山东省费县人民医院

目的：以盐酸小檗碱为对照依据，探讨中药质量确定控制指标的科学性，同时作为临床安全用药的凭据。方法：以HPLC对盐酸小檗碱在黄连中的含量进行检测，然后通过对其在饮片、药对以及复方制剂3种不同药品中的含量、用药合理性与疗效对比，研究其在临床用药中的可靠性与有效性。结果：黄连及其药对以及复方制剂中含盐酸小檗碱（5.49±0.067）％～（0.12±0.007）％，而黄柏及其药对以及复方制剂中含盐酸小檗碱（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％。结论：中药药效得以发扬主要依靠的是药效组分物质，本次研究中，盐酸小檗碱在黄连、黄柏与其药对还有复方制剂的含量远远小于临床用药标准。

盐酸小檗碱；黄连、黄柏及其药对以及复方制剂；含量及安全性研究

本文以HPLC对盐酸小檗碱在黄连中的含量进行检测，然后通过对其在饮片、药对以及复方制剂3种不同药品中含量情况以及各个药物的疗效情况进行统计，同时展开对比，现报告如下。

资料与方法

药品选择：盐酸小檗碱对照样品（中检所，110713-200911）、黄连、黄柏、木香、栀子和苍术。所有药品均与《中国药典》标准相符，复方剂：白头翁汤，黄柏苍术汤、葛根芩连汤以及黄连解毒汤。

仪器选择：色谱仪（紫外线检测仪器规格：SPD-15C；四元泵规格：LC-SC；自动进样器规格：SIL-1OAF，电子天平（规格：BP110S与BT25S），冷冻干燥器（规格：NB4X Scientz1ON）。

实验方法：首先进行溶液配制，可以分为对照组与试验组的溶液配制。即前者可以采用甲醇对盐酸小檗碱进行溶解，配比0.1g/L的溶液；后者需要配比醇提取物以及水提取物，醇提取物配比方法：以40mg的黄连以及黄柏粉溶解在甲醇盐酸混合液中（比例100：1），过超声半小时，待冷却后取10mL放在量瓶中定容（采用甲醇）；水提取物的配比方法：取定量的黄连、黄柏与其药对、复方制剂，加入10倍量的水以电热套煎煮20min，滤掉残渣，对滤液进行低压浓缩，同时把握压缩温度60℃左右，当体积达到标准后停止浓缩，取两种提取物溶液再次以甲醇进行定容，完成以上所有步骤后，将定容完的溶液转移至50mL大量瓶中。

条件和方法：①色谱柱：C18（4.6 mm×250mm×5μm），波长：345 nm；流动相：乙腈与0.05mol/L磷酸二氢钾进行（50：50）配比，此外每100mL配比溶液配比0.4 g十二烷基磺酸钠，pH以磷酸调整为4.0左右，进样10μL。②测定与含量计算：分别取对照溶液、配比的醇、水提取物作为测定对象，进样后测定数据，再以外标法进行计算，结果显示盐酸小檗碱色谱的峰值时间12min，而盐酸小檗碱色谱和邻近色谱的谱峰有明显区分，符合相关规定标准。③重复步骤2的测定与计算，同时得出结果，盐酸小檗碱含量RSD 1.09％。④线性分析：取盐酸小檗碱对照品，配比成五种不同浓度的溶液，浓度分别为0.0404 g/L、0.0606 g/L、0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，过滤进样，通过计算峰面积，可得结果分别为：1559516、2255120、2888724、3777364以及4457654，由此推算 线 性 方 程 ：Y=36230297.0297X+60267.6（R2=0.9973）。⑤回收率实验：去6份黄连进行分组，然后在其中加入称量好的盐酸小巢碱对照品，根据流程1的步骤完成溶液配比，同时获取配比好的溶液1mL，在其中加入甲醇盐酸混合液（比例100∶1），将溶液二次配比成10mL的3份不同浓度的溶液，浓度分别为0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，依然遵循步骤2的进样过滤流程，最后获得平均回收率100.01％，RSD值2.07％。⑥多次操作稀释以上对照组溶液，过滤进样（标准：0.45μm），可测谱峰高是基线噪声的10倍左右，定量限1.8mg。⑦用以上测量法分别测量对照组与实验组配比的溶液，统计盐酸小檗碱含量。

结果

含量动态分析：根据检测结果，对于黄连、黄柏水提取物而言，盐酸小檗碱溶出率分别为58.91％与34.78％，而两者药物的水提取物方面，溶出率分别为2.28％～14.93％与3.72％～13.60％；两者混合的水提取物方面，溶出率27.06％；复方剂方面，两者水提取物的盐酸小檗碱溶出率分别为15.42％与5.95％，而混合复方剂方面，则为7.86％～24.18％。

中药质量评价的合理性：传统盐酸小檗碱用量300～600mg/次，日用量不得超过3次。而黄连的日用量2～5 g，即包含61.4～153.5mg的盐酸小檗碱（含水的提取率）；黄柏的日用量3～12 g，其中含35.4～141.6mg的盐酸小檗碱。而本次研究结果表明：黄连、黄柏及其药对以及复方制剂中的剂量仅为《中国药典》标准的20％～50％左右，明显低于用药标准。

各类中药中盐酸小檗碱的药效对比：以上检测结果表明，黄连、黄柏及其饮片、药对和复方制剂的盐酸小檗碱的成分含量较低，而黄连及其药对以及复方制剂中盐酸小檗碱含量要低于目前规定用药标准（有效成分5.5％以上）的5.1～45.8倍不等，若计算中考虑提取液的差异误差，根据水提取率，预估其盐酸小檗碱含量应低于用药标准含量的2.8～25.6倍；而对于黄柏及其药对以及复方制剂中盐酸小檗碱含量而言，也低于目前规定用药标准，若计算中考虑提取液的差异误差，根据水提取率[1]，预估其盐酸小檗碱含量低于标准含量的1.2～9.07倍不等。此外，如果与单一药物日服用标准量进行对比，两者的含量仅为该标准量的25％～83.33％。

盐酸小檗碱的用量与中药标准的关联性分析：对于药剂质量控制来说，《中国药典》虽然有明确指出于黄连的质量由盐酸小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀4种指标影响，而黄柏则是由盐酸小檗碱与黄柏碱进行影响，但依旧已经包含了药效成本，而且检测统计中显示，黄连与黄柏两种中药及其药对以及复方制剂中盐酸小檗碱含量远低于《中国药典》中的要求标准，而且也要对于临床单一用药的规定标准。

讨论

作为生物碱的一种，盐酸小檗碱可以有效治疗肠炎、痢疾等严重病症，而且其可以减少细菌的菌毛，减低其附着力，同时也可以作为钙通道的拮抗剂。本次研究的侧重点是以中药传统的黄连、黄柏及其饮片、药对和复方制剂为标准[2]，通过研究其中盐酸小檗碱的含量数据，并且与现今规定标准数据进行对比，作为整体临床安全用药的依据，同时也是对于目前的临床的有效性和安全性提供指导和提示依据，从而保证临床用药的规范性和有效性。

[1] 师永清,康淑荷,王爱军.HPLC法同时测定黄连双清丸中栀子、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱和大黄素的含量[J].药物分析杂志,2013,9（9）：1612-1615.

[2] 侯艺辉,张贵君,徐蓓蕾.用盐酸小檗碱作为黄连等中药质量评价指标探讨临床用药的安全性和有效性[J],中国实验方剂学杂志,2012,9（18）：129-132.

To discuss the safety of clinicalmedication with the quality evaluation index of berberine hydrochloride for Chinese goldthread and other Chinesemedicine

An Jingmei
The People'sHospitalofFeiCounty,Shandong Province 273400

Objective：Taking berberine hydrochloride as the reference,to explore the scientific nature of quality control index of Chinese medicine,at the same time,to provide the evidence of clinical safety medication.Methods：The content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread was detected with HPLC,then,we compared the content,rationality and efficacy ofmedicine of it in pieces,coupletmedicines and compound preparation,to study the reliability and validity of the clinicalmedication.Results：The contentof berberine hydrochloride in Chinese goldthread and its coupletmedicines and compound preparation were（5.49± 0.067）％～（0.007±0.12）％.The content of berberine hydrochloride in golden cypress and its coupletmedicines and compound preparation were（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％.Conclusion：Chinesemedicine can carry forward.Itmainly depended on the drug substance,the content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread and golden cypress and its coupletmedicines and compound preparationweremuch less than the standard ofclinicalmedication in this study.

Berberine hydrochloride；Chinese goldthread and golden cypress and its couplet medicines and compound preparation；Contentand safety studies

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.6