激活毒蕈碱乙酰胆碱受体经claudin-4调控下颌下腺旁细胞途径的通透性

丛　馨，张　艳，吴立玲△，俞光岩(北京大学医学部生理学与病理生理学系，口腔医学院，北京0087)

激活毒蕈碱乙酰胆碱受体经claudin-4调控下颌下腺旁细胞途径的通透性

丛馨1，张艳1，吴立玲1△，俞光岩2
(北京大学1医学部生理学与病理生理学系，2口腔医学院，北京100871)

目的:探讨激活毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)能否经调控紧密连接而促进下颌下腺的分泌。方法:跨上皮细胞电阻(TER)和旁细胞通透性实验评价紧密连接的功能; Western blot和免疫荧光检测紧密连接的表达和分布;转染claudin-4 shRNA 或cDNA观察claudin-4对紧密连接功能的影响。免疫共沉淀检测相关信号通路。结果: mAChR激动剂卡巴胆碱可降低下颌下腺细胞TER值，并增加旁细胞途径通透性。卡巴胆碱可下调claudin-4的表达和分布，但不影响其它紧密连接分子。敲低claudin-4可使卡巴胆碱降低TER值的作用消失;而在过表达claudin-4细胞中，卡巴胆碱仍能降低TER值和claudin-4表达。卡巴胆碱可经细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)促进claudin-4丝氨酸磷酸化。磷酸化的claudin-4可与β-arrestin2结合，招募clathrin引起claudin-4发生内化，并进一步在胞浆中被泛素化降解。结论:激活mAChR通过ERK1/2/β-arrestin2/clathrin/泛素化途径下调claudin-4的表达，进而增加旁细胞途径的通透性。

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