肖 静,潘 宇,李晓红,吴岳恒,姜 霖,杨翔宇,余细勇,△(广东省人民医院,广东省医学科学院医学研究中心,广东广州50080;南方医科大学,广东广州5055;广州医科大学药学院,广东广州546)
心脏干细胞可通过旁分泌exosome保护心肌细胞发生凋亡
肖静1,2,潘宇1,李晓红1,吴岳恒1,姜霖1,2,杨翔宇1,2,余细勇1,3△
(1广东省人民医院,广东省医学科学院医学研究中心,广东广州510080;2南方医科大学,广东广州510515;3广州医科大学药学院,广东广州511436)
心脏干细胞移植在心肌梗死治疗中具有广泛应用,外泌体(exosome)被认为是细胞旁分泌的重要介质。本研究拟建立心脏固有干细胞(CPCs)的成熟分离方法,并初步探索CPCs分泌的exosome在体外保护氧化应激状态下心肌细胞的凋亡。原代分离培养鉴定Sca-1 + CPCs,离心加试剂盒分离出CPCs分泌的exosome,并进行表型鉴定和粒径分析;将心肌细胞分成对照组与CPC-exo预处理组,用H2O2处理心肌细胞诱导其凋亡,Western blot (WB)检测cleaved caspase-3蛋白水平。结果显示:磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca-1呈现阳性表达,流式细胞术提示分选前和分选后Sca-1阳性细胞的比例差异具有统计学意义(n =3,P<0. 01) ; CPCs来源的exosome,WB结果提示其CD63表达阳性;体外凋亡保护的WB结果显示,加了CPC-exo的细胞凋亡状态明显改善,且相关蛋白表达显著降低(P<0. 05)。因此,心脏干细胞可以分泌出携带有重要信息物质的exosome,能在体外保护心肌细胞,避免其发生凋亡,为临床心梗等疾病提供全新的治疗策略。
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