硫化氢在低剪切应力导致内皮细胞自噬障碍中的作用

唐　蕙，唐志晗，任　重，彭　娟，危当恒，任晓晴，肖卫晋，刘录山，姜志胜(南华大学心血管疾病研究所，动脉硬化学湖南省重点实验室，湖南衡阳421001)

硫化氢在低剪切应力导致内皮细胞自噬障碍中的作用

唐蕙，唐志晗，任重，彭娟，危当恒，任晓晴，肖卫晋，刘录山，姜志胜△
(南华大学心血管疾病研究所，动脉硬化学湖南省重点实验室，湖南衡阳421001)

目的:探讨硫化氢在低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬障碍中的作用。方法: HUVECs经培养传代分为3组:对照组、低剪切应力组(5 dyn/cm2)和正常剪切应力组(15 dyn/cm2)。在平板流动腔上对内皮细胞进行剪切应力处理，Western blot检测CSE蛋白水平，RT-PCR检测CSE的mRNA含量，荧光显微镜MDC染色观察自噬表泡，免疫荧光检测LC3表达，Western blot检测Beclin1LC3p62蛋白水平，以评估不同剪切应力下，诱导HUVECs自噬障碍过程中内源性H2S生成的变化。接下来用CSE干扰siRNA及CSE过表达质粒分别转染HUVECs后，再分别用5/15 dyne/cm2处理1 h，测自噬表达情况。结果: WB结果显示，与正常剪切应力组相比，低剪切应力组CSE表达明显减少。Beclin1及LC3表达减少，p62表达增高，免疫荧光结果显示低剪切应力组LC3表达减少。提示低剪切应力组自噬障碍。结论:低剪切应力诱导的人脐静脉内皮细胞存在自噬障碍，其与CSE表达降低相关。

△E-mail: zsjiang2005@163.com