金丝桃素介导的声动力诱导THP-1巨噬细胞凋亡和自噬的机制研究*

李雪松，郑龙彬，寇佳媛，田　野，△，杨力明△(哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室，黑龙江哈尔滨5008;哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科，黑龙江哈尔滨5000)

金丝桃素介导的声动力诱导THP-1巨噬细胞凋亡和自噬的机制研究*

李雪松1，郑龙彬1，寇佳媛1，田野1，2△，杨力明1△
(1哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室，黑龙江哈尔滨150081;2哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科，黑龙江哈尔滨150001)

目的:探讨金丝桃素结合低频超声(HY-SDT)对THP-1巨噬细胞产生的作用及机制研究。方法:激光共聚焦检测细胞内HY定位、活性氧(ROS)产生、线粒体通透性转换孔(mPTP)开放和LC3表达。荧光显微镜观察线粒体膜电位(MMP)。Hoechst-PI染色、透射电镜和流式细胞术观察自噬与凋亡。Western blot(WB)检测Bax与cytochrome C转位以及凋亡与自噬相关蛋白的表达。结果: HY在THP-1巨噬细胞的细胞核和线粒体等细胞器均有分布。HY-SDT后2 h细胞内自噬增加; 6 h细胞存活率下降，凋亡率、ROS和MDA升高，MMP降低，自噬抑制剂3MA导致凋亡率进一步升高。WB显示SDT后早期LC3-II 和Beclin 1表达增多，随后Bax和cytochrome C发生转位，Bcl-2下调，线粒体-caspase凋亡相关蛋白表达增多。NAC可明显抑制ROS增加、MMP下降、mPTP开放和凋亡自噬相关蛋白的变化。结论: HY-SDT通过产生ROS早期增加自噬，随后促凋亡因子Bax从胞浆转位锚定在线粒体上，增加Bax/Bcl-2比值，诱导mPTP开放，释放cytochrome C，从而诱导凋亡。

国家自然科学基金资助项目(No.81271734; No.81000688)

△杨力明E-mail: limingyang@ems.hrbmu.edu.cn;田野E-mail: yetian@ems.hrbmu.edu.cn