医学媒介生物领域能力验证现状分析及对策

田洁郭惠琳吴孝槐边勇李婧刘艳华刘来福赵静

医学媒介生物领域能力验证现状分析及对策

田洁1郭惠琳1吴孝槐2边勇1李婧1刘艳华1刘来福1赵静1

（1.北京出入境检验检疫局 北京 100621；2.中国合格评定国家认可委员会）

通过分析医学媒介生物领域能力验证活动的现状，找出存在的问题及原因并提出解决对策，以提高医学媒介生物领域能力验证活动的专业性、实用性和可操作性，提升医学媒介生物领域实验室检测水平。

能力验证；医学媒介；对策

1 前言

医学媒介生物领域是医学领域的子领域，医学媒介生物控制在公共卫生尤其是口岸卫生安全中发挥着重要的作用。医学媒介生物领域的实验室主要分布于检验检疫系统各直属局以及重点口岸的分支局、国家级及省级疾病预防控制中心、军队疾病预防控制系统。医学媒介实验室建设起步较晚，水平参差不齐，研究方向各有侧重，主要涉及医学媒介生物种类鉴定、自然感染病原体检测、控制及药剂、防护产品研发等方面。规范医学媒介检测，推动该领域实验室检测能力的确认和评价，是医学媒介实验室管理国际化的关键。

能力验证（Proficiency Testing）是利用实验室间比对确定实验室的校准/检测能力（ISO/IEC指南43）［1］。能力验证计划指某一为确定实验室在某个特殊领域的检测、测量和校准能力而设计和运作的能力验证项目（ILAC G13）［2］。国家认证认可监督管理委员会2006年第9号公告《实验室能力验证实施办法》指出，能力验证是利用实验室间指定检测数据的比对，确定实验室从事特定测试活动的技术能力［3］。能力验证活动是评价、判断和监控实验室能力、维持认可机构间国际互认的重要技术方法，是实验室进行自身质量控制并向客户证实技术能力的手段，在实验室管理中发挥着十分重要的作用。我国真正符合国际要求的能力验证开始于1999年，依据是ISO/ IEC指南43；医学媒介生物领域能力验证活动始于2010年认监委组织的“成蚊形态学鉴定CNCA-10-A11”和“基孔肯亚病毒核酸荧光PCR检测CNCA-09-B05”项目，此后，认监委组织了2次、认可委组织了3次医学媒介生物种类鉴定能力验证。北京出入境检验检疫局的国家医学媒介生物监测重点实验室为全国首家医学媒介生物领域能力验证提供者。

2 医学媒介生物领域能力验证活动现状分析

2.1特殊性

医学媒介生物检测属于医学范畴，但在《实验室认可领域分类》（CNAS-AL06）“07医学”领域中未提及医学媒介生物相关内容，与之最为接近的是“0704寄生虫学”，目前许多医学媒介实验室在资质认定和实验室认可时使用“0704”作为领域代码，该领域分为“01寄生虫检测和鉴定”和“02其它试验”两个项目，远不能涵盖医学媒介生物检测实验室目前开展的各类检测项目。医学媒介生物检测工作内容主要包括医学媒介生物种类鉴定和自然感染病原体检测。医学媒介生物种类鉴定目前主要采用传统方法，借助显微镜等对各类标本进行形态学观察，通过查阅检索表，比对已明确种类的标本来确定鉴定对象的种类。在种类鉴定能力验证中，各样本完全独立，《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNASGL03）“4.1.1从样品总体中随机抽取10个或10个以上的样品用于均匀性检验”的方法对于种类鉴定样本不适用，而是应对所有能力验证样本进行逐一鉴定，并确保关键的形态学鉴别特征完整，在种类鉴定样本分发过程中也应着重关注样本的完整性。此外，由于医学媒介生物传播疾病的特性，在能力验证活动的各个环节中应保证生物安全。

2.2承办者综合水平有待提高

目前，医学媒介生物领域能力验证活动才刚刚起步，能力验证提供者仅有1家，能力验证活动的组织和开展还处于探索阶段。截至目前为止，只有北京出入境检验检疫局、广东出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局、福建出入境检验检疫局、厦门出入境检验检疫局曾承办医学媒介生物领域能力验证活动，其中承办次数最多的北京出入境检验检疫局也仅承办过3次。各能力验证活动承办单位的组织人员大多是实验室医学媒介专业技术人员，由于平时相互接触、交流、合作较多，加之组织人员接受的保密性培训不充分，往往在能力验证活动中出现结果沟通、暗示等情况，影响能力验证结果的公正性和真实性。医学媒介生物领域对能力验证样品制备的关键技术缺乏研究，至今没有实验室建设成种类齐全、数量充足、保存完善、生物安全的能力验证样品库，影响了能力验证活动水平的稳定性和一致性。

2.3现有能力验证活动不能满足实验室认可需要

医学媒介实验室的研究对象主要包括鼠、蚊、蝇、蜚蠊、蚤、蜱、螨、蠓共8类医学媒介生物，自然感染的病原体包括鼠疫杆菌、立克次体、登革病毒、疟疾等多种细菌、病毒以及原虫类病原体，检测方法包括基于形态学、分子生物学种类鉴定，针对病原体的病原学、血清学、普通PCR、荧光定量PCR等分子生物学检测方法等。然而在该领域组织的7次能力验证活动中，5项是种类鉴定类能力验证活动，仅有2项为荧光定量PCR病原体检测项目。《能力验证规则》（CNAS-RL02）4.5.2“只要存在可获得的能力验证活动，已获准认可的实验室，其获得认可的领域的主要子领域每四年至少参加一次能力验证活动。四年是最低频次要求，当不同认可领域有特定要求时，执行特定要求。”因此，目前医学媒介生物领域中病原体检测类项目未能提供频次满足要求的可获得的能力验证活动。而且，在已组织的种类鉴定能力验证活动中所使用的样品全部为常见种类，仅能证实实验室种类鉴定的基本能力，对于口岸把关亟需的外来医学媒介生物种类鉴定能力却无法评估。病原体检测能力验证活动仅涉及基孔肯亚病毒和登革病毒，与各实验室日常开展的汉坦病毒、乙脑病毒、立克次体等20余种医学媒介生物传播携带的病原体检测范围还有很大差距。因此目前已开展的能力验证活动的次数和所涉及的检测项目远不能满足实验室对能力验证活动的需求，给认监委和认可委在资质认定和实验室认可过程中对实验室能力的评价带来困难。

2.4缺乏统一规范

在我国能力验证开展和实施的十余年中，各专业根据自身特点制定了相关能力验证规范，如《出入境动物检疫实验室能力验证技术规范》（SN/T 0941-2011）、《植物检疫实验室能力验证规范》（SN/ T 2966-2011）等，但医学媒介生物领域目前还没有相关的能力验证规范。虽然医学领域建立了《医学实验室能力验证的应用》（GB/T 27409-2010），但该标准主要规定了医学实验室能力验证应用方面的通则，未涉及各类检测项目能力验证活动组织和实施的具体和详细要求。规范的缺乏导致实验室在组织和参加能力验证活动时对《能力验证规则》（CNASRL02）、《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》（CNAS-GL02）及CNAS-GL03的理解产生偏差，导致实验室运行及能力验证活动中存在诸多不完善、不统一之处。例如不同承办者组织的种类能力验证活动所使用的样本数量、结果满意与否的评价标准等都有很大差别，影响了能力验证活动对实验室技术能力评价的有效性。目前还未建立对医学媒介生物领域能力验证组织单位各项能力的评估标准，未对能力验证活动的关键因素，如实验人员、场地、仪器设备、技术水平等做出明确的规定，给认监委对能力验证提供实验室的选择和评估带来难度。

2.5参加实验室较为局限

从历次医学媒介生物领域能力验证活动的参加情况来看，参加者主要集中在检验检疫系统，数量占所有参加实验室的90%以上，国家级及省级疾病预防控制中心、军队疾病预防控制系统的医学媒介实验室对该领域能力验证活动的关注度不高，参加率较低。参加能力验证实验室中来自发达地区的明显多于欠发达地区，许多医学媒介生物实验室从未参加过能力验证活动，这可能与欠发达地区对能力验证活动的重视程度不高，信息来源较为闭塞、滞后有关。参加能力验证活动实验室的局限性严重影响力了医学媒介生物实验室规范、有序的发展。

3 解决对策

3.1组织体制建设

对医学媒介生物领域能力验证计划进行长期规划，拓宽能力验证活动范围，逐步涵盖医学媒介生物种类鉴定、医学媒介生物携带病原体检测、医学媒介生物消杀药效评价等各类实验室检测项目。对实验室执法把关所必需检测项目优先列入计划，保证医学媒介生物领域能力验证活动的广度和频次，保证对实验室常规检测能力的充分评估和监控。研究开展外来医学媒介生物鉴定、输入性虫媒传染病病原体检测的能力验证活动，切实提高医学媒介生物实验室对口岸执法把关的技术支撑水平。

3.2组织实验室建设

建立医学媒介生物领域能力验证提供实验室评估规范，对能力验证提供实验室的各项专业能力作出详细规定，包括实验室人员检测技术水平、能力验证样品制备及检验所需仪器设备、设施环境条件等，保证能力验证提供实验室具备足够的专业技术水平。依托认可委“能力验证计划提供者评审”对能力验证活动的各环节进行规范，对实验室能力验证活动的开展进行监督，保证能力验证活动的真实性。鼓励有能力的实验室承担能力验证活动，在领域内开展专业培训或研讨会等，对能力验证活动的组织情况进行交流、探讨，在能力验证提供实验室之间建立广泛的沟通合作平台，互相取长补短，提高能力验证活动组织水平，早日在系统内培养一批技术过硬、操作规范的能力验证提供者。

3.3组织样品建设

开展能力验证样品制备关键技术研究，包括对种类鉴定样品如何准确鉴定；在制备、保存及运送过程中如何最大限度保持鉴定特征；病原体检测样品制备过程中如何保证均匀性、稳定性、一致性；能力验证过程中如何保证生物安全等。丰富样本库样本种类，除我国本底的医学媒介生物标本及病原体样本外，注重收集、积累国外输入性医学媒介生物标本和病原体样本，为实验室基本检测和输入性医学媒介生物及病原体检测能力验证活动提供充足的样本来源。建立保存条件良好的样品库，配备充足的保存设备和设施，保证样品库的微小气候、冷链条件和生物安全满足实验室样品保存要求。

3.4标准建设

建立医学媒介生物领域能力验证规范，既充分考虑医学媒介生物领域能力验证活动的特殊性，同时满足医学领域能力验证的通用要求，具体内容应涵盖：样品来源及真实性检验要求，样品制备及保存技术要求，样品检验（包括稳定性、一致性、生物安全性、正确性）要求，样品发送要求，能力验证方案设计要求，能力验证结果判断和能力评价原则及指标的建立，能力验证结果应用等内容。

3.5品牌建设

通过认监委、认可委、能力验证提供者等各级能力验证组织机构的共同努力，使医学媒介生物领域能力验证在实验室管理、评价以及资质认定和实验室认可中发挥重要作用，使实验室及实验室管理部门充分意识到能力验证的重要性，积极主动地参加能力验证活动，尤其是吸纳更多检验检疫系统外的医学媒介实验室参加到能力验证活动中，全面提升医学媒介实验室技术水平。收集国外医学媒介种类分布信息，研究国外医学媒介生物领域新技术、新方法，提高实验室鉴定外来医学媒介生物及传入病原体检测的水平和能力，有条件时，与国外实验室开展能力验证活动，实现实验室检测能力互认，为我国医学媒介生物防控工作提供有力的技术支撑。

4 结语

我国医学媒介生物领域能力验证活动目前尚处于起步阶段，能力验证活动的数量、质量都有待提高。通过对能力验证活动现状及存在问题的分析，能够更加清晰、准确的明确该领域能力验证活动未来的发展思路，在该领域内较快建立起系统、规范的能力验证体系，提高医学媒介生物领域能力验证活动的专业性、实用性和可操作性，提升我国医学媒介生物领域实验室检测水平。

［1］ISO/IEC指南43利用实验室间比对的能力验证［S］.

［2］ILAC G13能力验证计划提供者认可准则［S］.

［3］国家认证认可监督管理委员会.实验室能力验证实施办法［Z］.

Status Analysis and Countermeasures Discussion of Proficiency Testings in Medical Vector Field

Tian Jie1，Guo Huilin1，Wu Xiaohuai2，Bian Yong1，Li Jing1，Liu Yanhua1，Liu Laifu1，Zhao Jing1
（1.Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Beijing，100621；2.China National Accreditation Service for Conformity Assessment）

To improve the expertise，practicality and operability of proficiency testings and promote the detection capability of labs in medical vector field，analysis was made on problems and reasons of proficiency testings and countermeasures were put forward.

Proficiency Testing；Vector；Countermeasure

R185

E-mail：tianj@bjciq.gov.cn

国家质检总局科技计划项目（2014IK154）

2015-01-19