三类消毒药对牛舍消毒效果的比较

于亚玲，霍妍明，陈国亮，张东冉，李晓丽，薛小双，赵伍祥，邱殿锐

(1.河北省承德市动物疫病预防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游职业学院,河北 承德 067000)=

三类消毒药对牛舍消毒效果的比较

于亚玲1，霍妍明1，陈国亮1，张东冉1，李晓丽1，薛小双3，赵伍祥2，邱殿锐2

(1.河北省承德市动物疫病预防控制中心, 河北 承德 067000;2.河北省承德市畜牧研究所, 河北 承德067000; (3.河北旅游职业学院,河北 承德 067000)=

[目的]比较醛类消毒剂、季铵盐类及两类消毒药的络合物三类消毒药对牛舍空气、地面细菌的抑菌效果的差异，探究牛舍在温度为11～24℃时最佳消毒周期。[方法]用三种消毒药对不同圈舍消毒，采集不同高度的空气细菌样品并在消毒后的八天连续采集地面细菌样品。[结果]三种消毒药对空气中细菌的和圈舍地面细菌消杀率都很高，均超过80%，超强毒灭消毒效果最理想。[结论]四天为一个消毒周期最理想。

醛类消毒剂;季铵盐类消毒剂;醛类和季铵盐类络合物消毒剂;消毒周期

近些年来，我国养殖业集约化程度不断提高，规模化养殖场逐渐增多，科学的饲养管理理念越来越得到养殖场的认可，其中体现在日常预防性消毒工作中，但还存在一些误区[1]。消毒剂的种类繁多，消毒剂配置，适用范围不尽相同，制定消毒方案，选择适合的消毒药品，是预防疫病的发生的重要环节[2-3]。本试验于2013年9月选取三个养殖场，养殖场温度11～24℃，针对醛类消毒剂、季铵盐类及两类消毒药的络合物三类消毒药[4-5]，通过喷洒消毒的方法，以牛舍的空气，地面为消毒对象，其消毒效果进行比较和评价，并对消毒周期进行探索，为养殖生产提供较优的消毒药品和消毒方案。

1 材料与方法

1.1 材料

消毒剂：超强毒灭(苯扎溴铵络合稀戊二醛溶液)，醛灭灵(稀戊二醛溶液)，强效百毒杀(苯扎溴铵溶液)。

器材和药品：培养基，镊子，灭菌棉签，EP管，，生理盐水，移液器，签字笔，分析天平，恒温培养箱，蒸汽式高压锅，菌落计数器，喷雾器，灭菌玻璃珠等。

1.2 试验方法

选取六个圈舍A、B、C、D、E、F，确定每个圈舍的三个位置。并在每个位置处用油漆画若干个1 cm*1 cm的圆。

1.2.1 空气中细菌采集 沉降法。对A、B、C圈舍进行机械清扫，然后使用喷雾器喷洒自来水对圈舍进行预处理。30 min后在每个圈舍的标记位置，距地面2 m，1 m，0.5 m，分别放置培养基，打开培养皿盖子，使培养基表面暴露10 min，再将培养皿盖盖上后倒置[6]。然后用喷雾器对三个圈舍喷洒三种不同的消毒药(按照说明书的配制方法进行配制)，30 min后在距地面2 m，1 m，0.5 m，分别放置培养基，做相同处理。采样后，将培养基置于37℃恒温培养箱内培养24 h，使用菌落计数器进行菌落数。以圈舍为单位，即一个圈舍为一组，进行结果统计[7]。

1.2.2 地面上细菌采集 棉签擦拭法。对A、B、C圈舍(天天对其进行消毒)进行机械清扫，然后使用喷雾器喷洒自来水对圈舍进行预处理。30 min后用灭菌棉签涂抹整个圆圈进行采样(每次采集新圆圈的细菌)，每个位置采取三个圆圈作为一份样品装入一个EP管中，做好标记。然后用喷雾器对三个圈舍喷洒三种不同的消毒药(按照说明书的配制方法进行配制)，30 min后用灭菌棉签涂抹整个圆圈进行采样(每次采集新圆圈的细菌)，每个位置采取三个圆圈作为一份样品装入一个EP管中，做好标记。A、B、C圈舍，连续9天重复上述实验并记录[8-9]。

1.2.3 确定消毒周期的方法 第一天对圈舍D、E、F的实验方法圈舍A、B、C相同。第二天对D、E、F圈舍作如下处理：先进行机械清扫，然后使用喷雾器喷洒自来水对圈舍进行预处理。30 min后用灭菌棉签涂抹整个圆圈进行采样(每次采集新圆圈的细菌)，每个位置采取三个圆圈作为一份样品装入一个EP管中，做好标记，连续消毒九天。

1.2.4 地面采集样品的处理方法 分别向采集样品的EP管中加入1 ml的生理盐水，静置30 min，转移入自制的EP管中，6 000 rpm，离心1 min，取上清液进行倍比稀释，稀释度分别为1:102，1:103，1:104，1:105吹吸混匀，做好标记。无菌环境，取稀释的上清液10 ul接种至无菌培养基中，放入三个灭菌玻璃珠，轻轻晃动培养皿若干次，使上清液均匀涂布在培养上，将培养皿倒置放入置于37℃恒温培养箱内培养24小时，使用菌落计数器进行菌落计数[10]。

2 结果和结论

2.1 空气消毒效果分析

三种消毒药对三个养殖场A、B、C圈舍空气中细菌的消杀效果如表1，三种消毒药的消毒率都高于80%，其中超强毒灭的效果明显优于醛灭灵和强效百毒杀，醛灭灵的消杀效果强于强效百毒杀。

2.2 天天对地面消毒效果分析

三种消毒药对三个养殖场A、B、C圈舍地面上细菌的消杀效果如表2，三种消毒药的消毒率都高于80%，其中超强毒灭的效果优于醛灭灵和强效百毒杀，醛灭灵的消杀效果强于强效百毒杀。如图1显示，每天消毒圈舍地面的细菌数量逐渐减少，消毒效果显著，连续九天消毒菌落数量减少50%左右。

注：同列标相同小写字母者表示差异不显著(\%P﹥0.05)，有不同小写字母表示差异显著(P﹤0.05)，有不同大写字母表示差异极显著(P\%﹤0.01)

2.3 圈舍消毒周期分析结果

三种消毒药对三个养殖场D、E、F圈舍地面上细菌的消杀效果如表3，三种消毒药的消毒率都高于80%，其中超强毒灭的效果优于醛灭灵和强效百毒杀，醛灭灵的消杀效果强于强效百毒杀。

根据图1,细菌消毒及消毒后增长曲线表明，细菌在消毒后前四天缓慢增长，第五天细菌增长速率增大，接下来三天细菌维持在较高水平。为了预防疾病的爆发建议在细菌恢复率在60-80%进行消毒效果最佳。

3 讨论和小结

随着养殖场规模化和科学化的推进，牛舍建设、疾病预防和日常消毒和防护都得到了高度的重视。从日常消毒角度讲，消毒药的选择和消毒周期的确定，对养殖场持续高效的发展有至关重要的作用。常见的消毒药有八种，季铵盐类和醛类消毒剂是其中重要的两种，季胺盐类消毒剂作用原理是通过表面活性，使菌体细胞膜的通透性发生改变甚至破裂；醛类消毒剂是一类强的蛋白质变性剂，是细菌、病毒蛋白质变性从而达到杀灭细菌的作用；季铵盐和醛类消毒剂的络合物，集中季铵盐类和醛类消毒剂的优点，起到更强效的抑菌作用[12-14]。

通过对圈舍空气进行消毒，得出三种消毒药对空气菌群消杀率都在80%以上，季铵盐和醛类消毒剂的络合物消毒效果最佳。连续消毒九天，地面原始菌群数量可降低50%以上，季铵盐和醛类消毒剂的络合物消毒的圈舍地面菌群数相对最低。通过消毒一天采样，观察并统计细菌增殖率，在消毒后第三天细菌恢复率达到60%以上，第四天达到80%，建议在北方秋季四天为一个消毒周期。

在实际应用中，选择消毒药在考虑经济成本的同时，选择消杀效果好的消毒药，但还应综合消毒剂作用时间，消毒剂的作用原理、微生物的耐药性和杀菌谱等多方面因素进行选择，建议消毒药的种类间隔使用。有调查表明，机械清扫，通过通风保持圈舍干燥也可以有效抑制病原微生物的生长。

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Comparative study on disinfectant efficacy of the three disinfectants in cattle sheds

Yu Ya-ling1,Huo Yan-ming1,Chen Guo-liang1,Zhang Dong-yan1,Li Xiao-li1,Xue Xiao-shuang3,Zhao Wu-xiang2,Qiu Dian-rui2
(1.ChengdeCity,HebeiProvinceCenterforDiseaseControlandPreventionHebei,Chengde067000;2.InstituteofAnimalHusbandry,Chengde, 067000;3.HebeiTourismVocationalCollege,Chengde, 067000)

[Objective] To study the disinfectant efficacy of aldehyde disinfectant,quaternary ammonium disinfectant and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant to the barn air, ground bacterial,explore the best sterilization cycle when the temperature is 11-24 ℃.[Methods]After disinfecting the barn by the three disinfectant , collect the air samples at different heights and the groud samples eight days in a row. [Results] The results showed that the disinfection effect were well to the barn air and ground,and the complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant was best, and the higher than 80%,aldehyde disinfectant was good and quaternary ammonium disinfectant was worst.[Conclusion] The best sterilization cycle was four days.

aldehyde disinfectant , mmonium disinfectant, complexes of aldehyde and quaternary ammonium disinfectant,sterilization cycle

2014-12-26 修改日期:2015-01-18

河北省现代农业产业技术体系奶牛产业创新团队建设专项资金；承德市科技支撑计划项目(201422074)

于亚玲(1985-)，女，河北承德人，硕士，就职于河北省承德市动物疫病预防控制中心，主要从事疫病监测和重大动物疫病病原学和血清学检测工作。

S8-1

A

1001-9111(2015)02-0056-04