HPLC法测定注射用葡醛酸钠的含量

韩 芸，蔡姗英，王雪芹

（海南省食品药品检验所，海南海口570216）

HPLC法测定注射用葡醛酸钠的含量

韩 芸，蔡姗英，王雪芹

（海南省食品药品检验所，海南海口570216）

目的：建立测定注射用葡醛酸钠中葡醛酸钠含量的高效液相色谱方法．方法：依利特Hypersil BDS C18柱（4．6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：0．25%四丁基氢氧化铵溶液（用磷酸调节pH至5．0）-乙腈（95∶5）；流速：1．0 mL／min；检测波长：210 nm．结果：葡醛酸钠在0．25～2．01 g／L范围内线性关系良好，r＝1．000，平均回收率为99．4%（n＝9），定量限为0．80 μg．结论：该方法灵敏、准确、专属性高，可用于注射用葡醛酸钠的质量控制．

葡醛酸钠；高效液相色谱法；含量测定

0 引言

注射用葡醛酸钠为葡醛内酯在碱性条件下水解所得葡醛酸钠的无菌冻干品，其进入机体后，在酶的作用下变为葡糖醛酸而起作用，可降低肝淀粉酶的活性，阻止糖原分解，使肝糖原含量增加，脂肪贮藏减少，对食物或药物中毒时的保肝及解毒有辅助作用［1］．葡醛酸钠为肝脏病辅助用药，可用于急慢性肝炎和肝硬化的辅助治疗．由于葡醛酸钠结构中含多个羟基，亲水性强，在现行质量标准含量测定方法中，该成分出峰早，基本不保留［2］．本实验室建立的HPLC法可同时测定葡醛酸钠的有关物质和含量，相对于原标准，本方法具有专属性高、灵敏度高、准确性好的特点，可有效地运用于葡醛酸钠的质量控制．

1 仪器和试药

1260型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；工作站为Chemstation；XS105电子天平（METTLER TO-LEDO公司）；葡醛酸钠对照品（批号100495-200601，含量92．0%，中国食品药品检定研究院）；注射用葡醛酸钠（海南皇隆制药股份有限公司，批号：20100801、20110101-2、201301013）；乙腈为色谱纯（美国Tedia公司）；超纯水，自制（美国Millipore公司）；其余试剂为分析纯．

2 方法和结果

2．1 色谱条件 色谱柱：依利特Hypersil BDS C18（4．6×250 mm，5 μm）；流动相：0．25%四丁基氢氧化铵溶液（取10%四丁基氢氧化铵25 mL，用水稀释至1000 mL，用磷酸调节pH值至5．0）-乙腈（95∶5）；流速：1．0 mL／min；进样量：20 μL；柱温：25℃；检测波长：210 nm．

2．2 系统适用性实验 称取葡醛酸钠对照品10 mg，置10 mL量瓶中，用流动相 5 mL溶解后，加入1 mol／L氢氧化钠溶液1 mL，放置30 min，再加入1 mol／L盐酸溶液1 mL中和，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液，取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图．葡醛酸钠峰的保留时间约为10 min，葡醛酸钠峰与碱降解物峰（相对保留时间约为1．1 min）分离度应大于1．5．

2．3 对照品溶液的配制 精密称取对照品适量，用流动相溶解并定量稀释制成1 mg／mL的溶液，即为对照品溶液．

2．4 供试品溶液的配制 精密称取装量差异项下供试品适量，用流动相溶解并定量稀释制成1 mg／mL的溶液，即为供试品溶液．

2．5 线性关系考察 精密称取葡醛酸钠对照品适量，加流动相制成1 mg／mL的溶液，分别进样5、10、20、30、40 μL，记录色谱图．以峰面积A对葡醛酸钠质量浓度C进行线性回归，得葡醛酸钠的回归方程：A＝667．02C+2．0061（r＝1．000，n＝5），结果表明葡醛酸钠质量浓度在0．25～2．01 g／L范围内线性关系良好．

2．6 精密度试验 精密称取葡醛酸钠对照品适量，加流动相制成1 g／L的溶液，进样20 μL，重复进样5次．得浓度峰面积的RSD为0．19%，表明仪器精密度良好．

2．7 重复性试验 取批号为20100801的样品，按2．4方法操作，平行制备6份供试品溶液，分别测定，结果葡醛酸钠含量的RSD为0．33%，表明重复性良好．2．8 定量限 精密量取葡醛酸钠对照品溶液，逐级稀释，按信噪比（S／N）为10，测得葡醛酸钠定量限为0．80 μg．

2．9 稳定性试验 按2．4方法制备供试品溶液，在4℃、室温下分别于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h进样20 μL，结果峰面积的RSD分别为0．47%和0．45%，表明供试品溶液在4℃、室温时10 h内稳定性均良好．2．10 回收率试验 在空白辅料中，分别加入一定量的葡醛酸钠对照品，配成高、中、低三种浓度溶液（0．8、1．0、1．2 g／L），按上述的色谱条件进行分析，测得回收率分别为99．4%，99．4%和99．5%，RSD分别为0．37%，0．37%和0．37%（n＝3），平均回收率为99．4%（n＝9）．

2．11 样品的含量测定 三批样品按前述方法测定，结果葡醛酸钠的标示量百分率分别为 93．4%、90．9%、93．5%．

3 讨论

注射用葡醛酸钠现有标准及文献中大多数采用C18色谱柱，磷酸盐溶液-乙腈系统、磷酸盐溶液系统或庚烷磺酸钠溶液0．1 mol／L磷酸二氢钾溶液的流动相体系，经试验复核，在以上色谱系统中，葡醛酸钠不保留［3］．经试验摸索，流动相采用四丁基氢氧化铵溶液（pH 5．0）-乙腈（95∶5）时，葡醛酸钠在色谱柱上保留，主峰保留时间约为10 min，峰型较好［4］．该方法结果准确，操作简单，可作为该品种的质量控制方法．

［1］杜立峰．病毒性肝炎的治疗药物研究进展［J］．西北药学杂志，2004，19（2）：92-94．

［2］国家药典委员会．化学药品地方标准上升国家标准：第8册［S］．北京：化学业出版社，2002：235．

［3］仇丽颖，张 丹，赵 曦，等．HPLC测定注射用葡醛酸钠的含量及有关物质［J］．华西药学杂志，2005，20（2）：149-151．

［4］陈 辉．RP-HPLC法测定葡醛酸钠注射液的含量［J］．西北药学杂志，2011，26（2）：104-106．

Content determination of sodium glucuronic acid for injection by HPLC

HAN Yun，CAI Shan-Ying，WANG Xue-Qin
Institutefor Drug and Food Control of Hainan Province，Haikou 570216，China

AIM：To establish the high performance liquid chro-matography（HPLC）method for quantifying the contents of sodi-um glucuronic acid for injection．METHODS：A Elite Hypersil BDS C18 column（4．6 mm×250 mm，5 μm）was used with 0．25%tetrabutyl-ammoium hydroxide solution（pH adjusted to 5．0 with phosphoric acid）-acetonitrile（95∶5）as mobile phase．The flow rate was 1．0 mL／min，and detection wavelength was 210 nm．RESULTS：The calibration curve was linear（r＝1．000）in the range of 0．25～2．01 g／L for sodium glucuronic acid，with the average recovery rate being 99．4% （n＝9）．The LOD was 0．80 μg．CONCLUSION：HPLC method is sensitive，reliable and specific，and can be used for the quality control of sodium glucu-ronic acid．

sodium glucuronic acid；HPLC；content determina-tion

R927．2

A

2095-6894（2015）06-122-02

2015-04-25；接受日期：2015-05-10

韩 云．本科，主管药师．E-mail：25026427＠qq．com