九龙虫对老年大鼠心肝自由基的影响

杨家林+潘朝旺

【摘 要】 目的：观察九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏自由基的影响。方法：18月龄Wistar大鼠随机分为老年对照组、九龙虫高、中、低剂量组，4月龄大鼠为青年对照组。给药42天后，生化方法检测各组大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力及MDA含量。结果：与青年组比较，老年对照组大鼠心脏和肝脏MDA含量显著升高，SOD、GSH-PX活力明显下降，九龙虫各剂量组均能提高大鼠心脏和肝脏SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。结论：九龙虫抗衰老作用可能与提高心脏和肝脏抗氧化能力有关。

【关键词】 九龙虫；衰老；心脏；肝脏；自由基

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作为一种自然现象，与体内氧自由基的含量密切相关。九龙虫，别名“洋虫”，在《本草纲目拾遗》和《中药大辞典》均有记载，对多种疾病有良效。在民间，九龙虫被广泛用着抗衰老保健食品，本实验旨在研究九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影响，为九龙虫应用于抗衰老提供理论依据。

1 材料与仪器

1.1 动物 Wistar大鼠，清洁级，18月龄40只，体重500±50g，3月龄10只，体重280±20g，雌雄各半，由三峡大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 药品与试剂 九龙虫散（自制），用前配成混悬液；丙二醛（MDA）试剂盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒（20130617）；考马斯亮蓝试剂盒（20130408）；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）试剂盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 仪器 高速离心机，上海安亭科学仪器公司；UV754紫外可见分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司。

2 方法

2.1 动物分组及给药 将18月龄大鼠随机分为4组，每组10只，即老年对照组、九龙虫高剂量组、九龙虫中剂量、九龙虫低剂量；3月龄大鼠为青年对照组。给药，九龙虫高、中、低剂量组灌胃给予九龙虫混悬液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年对照组和青年对照组给予生理盐水15ml/kg·d，连续42天。末次给药24h后，各组动物均给予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打开胸腔取出心脏、打开腹腔取出肝脏，进行相应指标检测。

2.2 大鼠心脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心脏左心室，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，按试剂盒说明进行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的测定。

2.3 大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝脏右侧叶，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，检测方法同心脏。

2.4 统计学处理 数据用spss17.0软件进行统计处理，各实验组数据均采用均数±标准差（x±s）表示，用t检验进行显著性检验。

3 结果

3.1 对衰老大鼠心脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组心脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异显著。见表1。

3.1 对衰老大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组肝脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异有显著性意义。见表2。

4 讨论

自由基学说是目前公认的衰老机制之一，而机体自由基产生的途径有內内源性和外源性两个方面，另一方面，机体内又具有清除自由基的系统，使自由基在体内维持正常水平。研究表明，随年龄的增长，机体清除自由基的能力下降，导致自由基蓄积[1]。过量自由基不但可以氧化细胞膜，还可以氧化酶类、蛋白质、核酸等生物大分子，使细胞膜上脂质发生过氧化反应，生物酶活力下降，蛋白质和核酸分子交联，导致细胞形态改变、功能发生障碍，最终导致机体衰老、死亡[2]。

抗氧化剂和抗氧化酶类组成机体抗氧化系统。体内抗氧化酶类的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前发现唯一以自由基为底物的酶，在各种生物体内广泛分布，是机体内对抗自由基的第一道防线[3]，它与GSH-PX协同作用减少脂质过氧化，减轻其代谢产物对机体的损害；。研究表明，衰老动物体内SOD活力明显低于青年动物[4-5]。GSH-PX是一种含硒的水溶性四聚体蛋白酶，对由羟自由基和活性氧诱发的过氧化脂质及过氧化氢有极强的清除能力，从而减轻自由基对机体细胞的损害。研究表明，随年龄的增加，体内自由基也会随之增多，而GSH-PX的活性逐渐降低，因此可作为机体衰老的又一个重要评价指标[6]。MDA是自由基损伤生物膜过氧化分解产物，间接地反映了自由基攻击机体细胞的严重程度，因此是老化的重要指标。

本实验结果显示，九龙虫可以提高自然衰老大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老机制之一。

参考文献

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪浔，金惠铭.人体病理生理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：11.

[3] 刘奇，刘雪平.抗衰老学[M].北京：军事医学科学出版社，2006：16.

[4]李应东，王博雯，周倩倩，等.当归红芪超滤物对自然衰老大鼠抗氧化作用机制的研究[J].时珍国医国药，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亚平，李媛，李姝臻.铁筷子总黄酮对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].华西药学杂志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.

【摘 要】 目的：观察九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏自由基的影响。方法：18月龄Wistar大鼠随机分为老年对照组、九龙虫高、中、低剂量组，4月龄大鼠为青年对照组。给药42天后，生化方法检测各组大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力及MDA含量。结果：与青年组比较，老年对照组大鼠心脏和肝脏MDA含量显著升高，SOD、GSH-PX活力明显下降，九龙虫各剂量组均能提高大鼠心脏和肝脏SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。结论：九龙虫抗衰老作用可能与提高心脏和肝脏抗氧化能力有关。

【关键词】 九龙虫；衰老；心脏；肝脏；自由基

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作为一种自然现象，与体内氧自由基的含量密切相关。九龙虫，别名“洋虫”，在《本草纲目拾遗》和《中药大辞典》均有记载，对多种疾病有良效。在民间，九龙虫被广泛用着抗衰老保健食品，本实验旨在研究九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影响，为九龙虫应用于抗衰老提供理论依据。

1 材料与仪器

1.1 动物 Wistar大鼠，清洁级，18月龄40只，体重500±50g，3月龄10只，体重280±20g，雌雄各半，由三峡大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 药品与试剂 九龙虫散（自制），用前配成混悬液；丙二醛（MDA）试剂盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒（20130617）；考马斯亮蓝试剂盒（20130408）；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）试剂盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 仪器 高速离心机，上海安亭科学仪器公司；UV754紫外可见分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司。

2 方法

2.1 动物分组及给药 将18月龄大鼠随机分为4组，每组10只，即老年对照组、九龙虫高剂量组、九龙虫中剂量、九龙虫低剂量；3月龄大鼠为青年对照组。给药，九龙虫高、中、低剂量组灌胃给予九龙虫混悬液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年对照组和青年对照组给予生理盐水15ml/kg·d，连续42天。末次给药24h后，各组动物均给予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打开胸腔取出心脏、打开腹腔取出肝脏，进行相应指标检测。

2.2 大鼠心脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心脏左心室，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，按试剂盒说明进行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的测定。

2.3 大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝脏右侧叶，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，检测方法同心脏。

2.4 统计学处理 数据用spss17.0软件进行统计处理，各实验组数据均采用均数±标准差（x±s）表示，用t检验进行显著性检验。

3 结果

3.1 对衰老大鼠心脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组心脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异显著。见表1。

3.1 对衰老大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组肝脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异有显著性意义。见表2。

4 讨论

自由基学说是目前公认的衰老机制之一，而机体自由基产生的途径有內内源性和外源性两个方面，另一方面，机体内又具有清除自由基的系统，使自由基在体内维持正常水平。研究表明，随年龄的增长，机体清除自由基的能力下降，导致自由基蓄积[1]。过量自由基不但可以氧化细胞膜，还可以氧化酶类、蛋白质、核酸等生物大分子，使细胞膜上脂质发生过氧化反应，生物酶活力下降，蛋白质和核酸分子交联，导致细胞形态改变、功能发生障碍，最终导致机体衰老、死亡[2]。

抗氧化剂和抗氧化酶类组成机体抗氧化系统。体内抗氧化酶类的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前发现唯一以自由基为底物的酶，在各种生物体内广泛分布，是机体内对抗自由基的第一道防线[3]，它与GSH-PX协同作用减少脂质过氧化，减轻其代谢产物对机体的损害；。研究表明，衰老动物体内SOD活力明显低于青年动物[4-5]。GSH-PX是一种含硒的水溶性四聚体蛋白酶，对由羟自由基和活性氧诱发的过氧化脂质及过氧化氢有极强的清除能力，从而减轻自由基对机体细胞的损害。研究表明，随年龄的增加，体内自由基也会随之增多，而GSH-PX的活性逐渐降低，因此可作为机体衰老的又一个重要评价指标[6]。MDA是自由基损伤生物膜过氧化分解产物，间接地反映了自由基攻击机体细胞的严重程度，因此是老化的重要指标。

本实验结果显示，九龙虫可以提高自然衰老大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老机制之一。

参考文献

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪浔，金惠铭.人体病理生理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：11.

[3] 刘奇，刘雪平.抗衰老学[M].北京：军事医学科学出版社，2006：16.

[4]李应东，王博雯，周倩倩，等.当归红芪超滤物对自然衰老大鼠抗氧化作用机制的研究[J].时珍国医国药，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亚平，李媛，李姝臻.铁筷子总黄酮对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].华西药学杂志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.

【摘 要】 目的：观察九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏自由基的影响。方法：18月龄Wistar大鼠随机分为老年对照组、九龙虫高、中、低剂量组，4月龄大鼠为青年对照组。给药42天后，生化方法检测各组大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力及MDA含量。结果：与青年组比较，老年对照组大鼠心脏和肝脏MDA含量显著升高，SOD、GSH-PX活力明显下降，九龙虫各剂量组均能提高大鼠心脏和肝脏SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量。结论：九龙虫抗衰老作用可能与提高心脏和肝脏抗氧化能力有关。

【关键词】 九龙虫；衰老；心脏；肝脏；自由基

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）06-0023-02

衰老作为一种自然现象，与体内氧自由基的含量密切相关。九龙虫，别名“洋虫”，在《本草纲目拾遗》和《中药大辞典》均有记载，对多种疾病有良效。在民间，九龙虫被广泛用着抗衰老保健食品，本实验旨在研究九龙虫对自然衰老大鼠心脏和肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和丙二醛（MDA）的影响，为九龙虫应用于抗衰老提供理论依据。

1 材料与仪器

1.1 动物 Wistar大鼠，清洁级，18月龄40只，体重500±50g，3月龄10只，体重280±20g，雌雄各半，由三峡大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（鄂）2011-0012。

1.2 药品与试剂 九龙虫散（自制），用前配成混悬液；丙二醛（MDA）试剂盒（20130328）；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒（20130617）；考马斯亮蓝试剂盒（20130408）；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）试剂盒（20130524），南京建成生物工程研究所。

1.3 仪器 高速离心机，上海安亭科学仪器公司；UV754紫外可见分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司。

2 方法

2.1 动物分组及给药 将18月龄大鼠随机分为4组，每组10只，即老年对照组、九龙虫高剂量组、九龙虫中剂量、九龙虫低剂量；3月龄大鼠为青年对照组。给药，九龙虫高、中、低剂量组灌胃给予九龙虫混悬液0.028、0.014、0.007g/kg·d，老年对照组和青年对照组给予生理盐水15ml/kg·d，连续42天。末次给药24h后，各组动物均给予10%水合氯醛（0.35ml/100g）腹腔注射麻醉，迅速打开胸腔取出心脏、打开腹腔取出肝脏，进行相应指标检测。

2.2 大鼠心脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取心脏左心室，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，按试剂盒说明进行SOD、GSH-PX活力和MDA含量的测定。

2.3 大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力及MDA含量 取肝脏右侧叶，称重，加9倍重量生理盐水制备匀浆，检测方法同心脏。

2.4 统计学处理 数据用spss17.0软件进行统计处理，各实验组数据均采用均数±标准差（x±s）表示，用t检验进行显著性检验。

3 结果

3.1 对衰老大鼠心脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组心脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异显著。见表1。

3.1 对衰老大鼠肝脏SOD、GSH-PX活力和MDA含量的影响 与青年对照组比较，老年对照组肝脏SOD、GSH-PX活力降低，而MDA含量升高，差异显著；与老年对照组比较，九龙虫各剂量组SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低，差异有显著性意义。见表2。

4 讨论

自由基学说是目前公认的衰老机制之一，而机体自由基产生的途径有內内源性和外源性两个方面，另一方面，机体内又具有清除自由基的系统，使自由基在体内维持正常水平。研究表明，随年龄的增长，机体清除自由基的能力下降，导致自由基蓄积[1]。过量自由基不但可以氧化细胞膜，还可以氧化酶类、蛋白质、核酸等生物大分子，使细胞膜上脂质发生过氧化反应，生物酶活力下降，蛋白质和核酸分子交联，导致细胞形态改变、功能发生障碍，最终导致机体衰老、死亡[2]。

抗氧化剂和抗氧化酶类组成机体抗氧化系统。体内抗氧化酶类的主要成分是SOD和GSH-PX。SOD是目前发现唯一以自由基为底物的酶，在各种生物体内广泛分布，是机体内对抗自由基的第一道防线[3]，它与GSH-PX协同作用减少脂质过氧化，减轻其代谢产物对机体的损害；。研究表明，衰老动物体内SOD活力明显低于青年动物[4-5]。GSH-PX是一种含硒的水溶性四聚体蛋白酶，对由羟自由基和活性氧诱发的过氧化脂质及过氧化氢有极强的清除能力，从而减轻自由基对机体细胞的损害。研究表明，随年龄的增加，体内自由基也会随之增多，而GSH-PX的活性逐渐降低，因此可作为机体衰老的又一个重要评价指标[6]。MDA是自由基损伤生物膜过氧化分解产物，间接地反映了自由基攻击机体细胞的严重程度，因此是老化的重要指标。

本实验结果显示，九龙虫可以提高自然衰老大鼠心脏和肝脏组织SOD、GSH-PX活力，降低MDA含量，是其可能的抗衰老机制之一。

参考文献

[1] Finkel T，Holbrook N J.Oxidants，oxidative stress and the biology of aging[J].Nature，2000，408（6809）：239.

[2] 王迪浔，金惠铭.人体病理生理学[M].北京：人民卫生出版社，2008：11.

[3] 刘奇，刘雪平.抗衰老学[M].北京：军事医学科学出版社，2006：16.

[4]李应东，王博雯，周倩倩，等.当归红芪超滤物对自然衰老大鼠抗氧化作用机制的研究[J].时珍国医国药，2012，23（6）：1439-1441.

[5]段亚平，李媛，李姝臻.铁筷子总黄酮对D-半乳糖致衰小鼠的抗衰老作用研究[J].华西药学杂志，2013，28（5）：458-460.

[6] Sairam RK，Singh DV，Srivaatava GC.Changes in activities of antioxidant enzymes in sunflower leaves of different age[J].Biol Plant，2003，47（1）：61.