白花三叶草替代蛋白质配合饲料效果研究

■关洪斌 余梦迪 成英俊 王晓兰

(山东大学海洋学院，山东威海 264200)

目前，豆科牧草在我国主要用于饲喂禽畜，在水产配合饲料中使用较少且研究不多，从而使豆科牧草这一分布广泛而又廉价的资源难以得到充分的开发利用。从豆科牧草作为禽畜饲料的事实中可以看出，豆科牧草作为一种绿色的饲料不仅具有营养丰富、能够改善动物体质的价值，更重要的是豆科牧草生命力顽强，分布广泛，廉价易得，对生产具有重大的意义。有研究表明：鲜白三叶草，叶柔嫩，在初花期，茎叶各占一半，蛋白质含量较高，粗纤维含量低。鲜草喂猪可减少精料消耗20%～25%，降低饲料成本近20%。干草粉易贮存，便于运输，使用方便，干草粉可加入配合饲料中作为粗料，另可独立加工成颗粒饲料。本研究依据白花三叶草具有高蛋白和较高经济价值的特点，使其部分替代原水产饲料中的鱼粉、豆粕粉和小麦粉，以提高草金鱼的增重率，降低饲料成本。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验用鱼

试验所用草金鱼来自山东大学（威海）附近的水族馆，选择体长6 cm左右，体质量10 g左右，个体均匀、活泼健康的草金鱼作为试验用鱼。草金鱼（Goldfish）属鲤科（Cyprinidae）金鲫种（Red Swallowtail）。是金鱼中最古老的一种，主要有单尾草金鱼和燕尾草金鱼。属于以动物性食料为主的杂食性观赏鱼类，不需精细管理，饲养简便。

1.1.2 试验用白花三叶草

试验用白花三叶草采自山东大学（威海）图书馆前两侧及海洋学院楼前侧的草坪，采集后洗净，放入烘箱，在120℃下连续烘干6 h，使用高速中药粉碎机粉碎至干粉过60目筛备用。

1.1.3 试验饲料

按表1配方称量白花三叶草粉末及其他饲料原料，搅拌均匀，适量加水，置于30～38℃继续发酵1～2 h，制成颗粒状饲料，在60℃下烘干成型，过14～16目筛，在120℃下完全烘干，冷却装袋备用。对照组为白花三叶草添加量0%，试验1组、2组、3组添加量分别为5%、10%和20%。

表1 各组原料配比(%)

1.2 试验环境

试验在实验室进行，采用自然散射光，避免阳光直射。草金鱼饲养于体积为60 cm×40 cm×40 cm的鱼缸内。鱼缸内有温度计和充气泵，鱼缸中装深度有30 cm曝气充氧24 h的自来水，水温(25.0±1.0)℃，pH值7.0±0.5。设置1个对照组，3个试验组。考虑到实验室中各处光照条件不同，每个试验组设置3个重复组。每个鱼缸投放13尾草金鱼。试验前用3%的食盐水浸洗草金鱼5 min,用高锰酸钾对鱼缸进行消毒处理。

1.3 试验方法

1.3.1 摄食率试验

生长性能检测采用摄食率法进行，试验开始前14 d将试验用鱼暂养在100 cm×50 cm×60 cm的鱼缸中，以对照组饲料对其进行饱食投喂，定期换水，清理粪便保持水体温度，pH值，含氧量稳定，使试验用鱼能更好的适应实验室环境。

试验历时2周，投喂表1饲料。试验开始空腹24 h后称量质量与体长，记录数据。试验期间，采用饱食投喂法，每日投喂2次，每天中午12：30和下午19：30定时投喂，定时投喂的目的是避免使鱼产生应激反应。每次的投喂量控制在鱼体质量的2%～3%，每天中午喂食前采用虹吸法清理鱼缸中的排泄物和饲料残渣，并换水1/3。试验结束后，各鱼缸中鱼空腹24 h后称取重量。对照组中随机取3尾鱼，试验组中每组各随机取1尾鱼，取样后，先测量每尾鱼的体长和重量，再解剖鱼，将内脏完整取出，使用1‰电子天平依次测量鱼皮、内脏、肝胰脏的重量。试验指标计算方法如下：

增重率(%)=(试验末体重-试验初体重）/试验初体重×100;

特定生长率（%）=(试验末体重-试验初体重）/试验天数×100;

日摄食率（%）=（日投喂量-日残食量）/鱼体增重×100;

饲料系数=饲料消耗量/鱼体增重量;

肝体比(HSI)=(试验末鱼体肝重/试验末鱼体重)×100;

丰满度(%)=(试验末鱼体重/试验末鱼体长3)×100;

内脏比(%)=(试验末鱼内脏重/试验末鱼体重)×100。

1.3.2 迷宫试验

诱食活性试验采取迷宫法，在100 cm×40 cm×50 cm的鱼缸中进行，在鱼缸中利用透明玻璃挡板组成迷宫（见图1）。放入深度30 cm曝气充氧的自来水试验开始1 h前用纱网筛将鱼群隔开，从过渡鱼缸中随机取25条草金鱼放入迷宫鱼缸的A处，取2 g饲料用纱布包裹放在迷宫的B处。待试验草金鱼适应10 min后，移去纱网开始计时，以30 min为单位，取试验草金鱼进入有效区并啄咬试球的总次数为观察值，每次测试的数据以各重复观察值的平均值±标准误差表示。以上步骤分别进行试验组饲料和对照组饲料的迷宫法试验，每种试验饲料重复5次。

图1 迷宫示意图

1.4 数据分析

数据均用平均值±标准误（Mean±SE）表示，使用EXCEL 2007作图。以试验组与对照组的数值之差的大小来判断不同比例白花三叶草添加量配合饲料的诱食活性，负值表示抑制摄食，正值表示诱导摄食。用SPSS 19.0进行统计分析，采用单因素方差分析(one-way AN0VA)分析各组差异：若差异显著，再用LSD进行多重比较，以P＜0.05为有显著的诱食意义。

2 结果与分析

2.1 不同比例的白花三叶草饲料对草金鱼生长效果的影响

试验结果见表2，对草金鱼的解剖结果进行分析，根据实验测得的数据分别求出丰满度、肝体比、内脏比等指标，观察不同比例白花三叶草饲料对草金鱼生长与发育状况的影响（见表3）。

表2 不同饲料对草金鱼生长的影响

表3 不同饲料对草金鱼生长与发育状况的影响

从图2中可以看出，添加了白花三叶草的试验组较对照组的特定生长率有了明显的增加；不同比例的白花三叶草饲料对草金鱼丰满度的影响不大，基本上无差异，但随着白花三叶草比例浓度的增加，草金鱼的肝体比不断减小而内脏比呈逐渐增加的趋势。由图3可知，饲料系数随白花三叶草添加比例的增加显著降低。随着白花三叶草比例的增加，添加了白花三叶草的饲料对草金鱼生长状况的影响显著增强。

图2 不同饲料对草金鱼发育状况的影响

图3 饲料系数对比

2.2 不同比例白花三叶草饲料对草金鱼诱食活性的影响

试验结果见表4，将结果在SPSS中进行显著性分析，见图4。

表4 不同比例白花三叶草饲料诱食效果对比

图4 迷宫试验结果的差异性分析

从表4可以看出，试验组与对照组差值均为正值时，观察t值或P值可以看出诱食活性强弱顺序一致，因此试验组饲料对草金鱼均具有诱食效果。其中，添加了5%白花三叶草的试验1组无明显的诱食效果（P＞0.05），添加10%和20%白花三叶草的饲料均有较为显著的诱食效果（P＜0.05），添加20%白花三叶草的试验3组对草金鱼的诱食效果有极其显著的影响。

3 讨论

试验结果表明，添加了白花三叶草的试验组饲料对草金鱼生长的影响要明显优于对照组，诱食效果也同样强于对照组，这可能与白花三叶草的高蛋白，低纤维有关。添加了5%白花三叶草的饲料对草金鱼无明显的诱食效果，可能是因为白花三叶草的质量浓度过小，未达到草金鱼的味觉和嗅觉感受器的生理阈值。添加了20%白花三叶草的饲料对草金鱼的诱食效果最为明显，草金鱼的增重率、特定生长率及饲料系数均处于最佳水平，效果最好。

营养丰富的食物，是保证生物生长、发育的物质基础，草金鱼也要求食物中含有适量的蛋白质、脂肪、碳水化合物、各种维生素、无机盐类和微量元素。

4 结论

本项研究水产配合饲料（适用范围：鲤科观赏鱼如草金鱼）用白花三叶草粉部分替代鱼粉、豆粕粉和小麦粉，与已有技术相比，具有以下特点：

①不影响正常生长。

②增重率大幅度提高，饵料系数降低，诱食效果显著。

③水产配合饲料的成本降低。

经过本次试验可以看出，白花三叶草作为一种分布广泛，易种植，成本低廉的优质牧草，在水产饲料的开发中具有明显的优势和经济价值，如果可以在实践中加以利用，白花三叶草作为饲料添加剂具有广阔的发展前景。